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51.
【目的】提高利用ABI3130xl全自动测序仪对小麦与条锈菌互作的cDNA文库进行大规模测序的成功率,降低成本。【方法】将BigDye(BigDye(Teminator V3.1 Cycle Sequencing RR-100)分别稀释16,24和32倍设计测序的PCR反应体系,分析了EDTA溶液(125 mmol/L,pH 7.0)和醋酸钠溶液(3 mol/L,pH 5.2)以及不同模板类型等相关因素对测序结果的影响。【结果】BigDye稀释16倍的PCR反应体系的测序结果易出现染料峰,影响碱基正确读值;稀释32倍体系的测序结果中可用序列短,成功率低;稀释24倍体系测序结果的可用序列长且准确率高,为最佳反应体系。EDTA溶液和醋酸钠溶液可提高DNA纯化的质量,改善测序效果。以质粒DNA为模板测序较PCR产物直接测序效果好,通过控制模板质量可以提高测序成功率。【结论】利用优化体系共测得15 000条ESTs序列,其中有高读长序列13 080条,占87.2%,表明该优化体系简单有效,且可有效节约成本。 相似文献
52.
条锈菌诱导的小麦叶片cDNA文库构建及表达序列标签分析 总被引:4,自引:0,他引:4
以小麦品种水源11和条锈菌CY31号小种为材料,用SMARTTMcDNA Library Construction Kit构建条锈菌诱导的小麦叶片cDNA文库。得到原始文库的滴度为6×106pfu/mL,扩增文库滴度9×109pfu/mL,重组率98%,插入片段在0.5~2.2kb。随机挑取600个克隆,测序获得594条高质量ESTs,与GenBank序列进行BLASTx分析,已知功能ESTs与植物同源比例最高,占44%;其次为真菌,占32%;有18%ESTs在GenBank中没有匹配的同源产物。蛋白功能分析表明,PIG28编码蛋白、ABC转运子、金属硫因、泛素、质膜H+-ATPase和氨基酸透酶等可能参与了寄主与病原菌互作过程。 相似文献
53.
虎年岁末,福田雷沃国际重工股份有限公司(以下简称雷沃农业装备)举行了以"跨越辉煌60万,雷沃谷神送大礼"为主题的跨年促销活动,在中原九大小麦机主销区域同时展开,拉开了跨年热销的大幕。截止2011年 相似文献
54.
55.
[目的]探索基因重组工程菌高密度发酵工艺,为得到高浓度和高产量的链球菌(Streptococcus)G蛋白(SPG)奠定基础。[方法]通过一级摇瓶、二级种子罐培养,以及将菌种转接到发酵罐并进行分批补料高密度培养,探讨了IPTG加入量等条件对发酵的影响,考察了接种量、氧气、pH、培养方式等发酵工艺。[结果]高密度发酵能得到至少80 g/L的菌体,最高达到150 g/L,每升发酵液可得到1 g的SPG。SPG高密度发酵的生产条件为:接种量10%,通气量1 vvm,溶氧控制在30%~45%,发酵过程控制pH 7.0~7.2,IPTG的诱导浓度为0.2 mmol/L,时间为4 h,发酵后SPG总蛋白能达到菌体蛋白的20%以上。[结论]利用该生产工艺可得到高浓度菌体和高产量SPG。 相似文献
56.
57.
目标区域扩增多态性(target region amplified polymorphism,TRAP)是通过一个依据EST序列设计的固定引物和一个针对外显子或内含子特点设计的随机引物对开放阅读框(open reading frames,ORFs)进行扩增。本研究首次建立了适于花生TRAP分析的PCR扩增体系:在15μl总反应体系中,模板DNA50ng,引物浓度1.0μmol/L,dNTPs浓度0.25mmol/L,Taq DNA聚合酶1U。利用该体系对24个花生品种DNA进行扩增,得到了清晰稳定的条带,且这些条带具有一定的多态性,说明所建立的体系可用于花生遗传多样性分析。 相似文献
58.
小麦条锈病菌菌种的纯化与保存方法 总被引:1,自引:0,他引:1
通过对田间收集的小麦条锈菌进行分离和鉴定,建立了单孢子堆分离方法,并比较了不同储藏温度下保存不同时间后条锈菌对小麦的致病率,以探索条锈菌的保存条件。结果表明,单孢子堆分离法获得的菌系可满足后续研究;冷冻保存后菌种的致病率均大于93%,明显高于冷藏保存后的致病率,年限越长,差异性越明显,表明冷藏保存只适宜菌种的短期保存,而冷冻保存适宜于长期保存。 相似文献
59.
植被净初级生产力是评价和估计生态系统的碳源或碳汇作用的关键因子,对了解陆地生态系统的演化和判定生态系统碳汇和生态调节过程具有重要的作用.以黑龙江省带岭林业局为例,基于SuperMap IS.NET平台,选用SQLServer 2005数据库存储数据,使用C#为主体语言开发黑龙江省带岭林业局NPP信息发布系统,初步实现图形与属性的双向查询、NPP时间曲线绘制以及简单的NPP值与高程、坡度、坡向等地形因子的数据分析,对该区域森林生态系统生产力、生物量以及碳循环方面的研究提供方便快捷的数据支持. 相似文献
60.
薏米营养成分的超临界萃取与GC-MS分析 总被引:1,自引:0,他引:1
采用超临界萃取对薏米营养成分进行分离提取,并用GC - MS分析其化学组成.结果表明:在薏米萃取物中共检测到23种物质,其中包括7种不饱和脂肪酸(76.34%)、8种饱和脂肪酸(21.44%)、1种酯(0.48%)、2种醇(0.271 6%),新检测出肉豆蔻酸、蓖麻油酸、二十四酸、9,10-亚甲基十八碳酸、顺-十七碳烯酸等5种脂肪酸.薏米中油酸(40.41%)、亚油酸(34.82%)、棕榈酸(15.61%)含量较高,所以薏米具有降血压、降血脂、降胆固醇以及抗癌、提高免疫力的功能. 相似文献