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71.
利用siDirect软件预测绿色荧光蛋白(GFP)基因特异性小干扰RNA(siRNA),将人工合成的相应shRNA插入含人H1启动子的pSuper载体,获得表达载体pSuper-shRNA,再将H1-shRNA插入表达GFP基因的peGFP-N1载体,获得表达载体peGFP-H1-shRNA。分别以pSuper-shRNA peGFP-N1和peGFP-H1-shRNA转染COS-1、293-T、鸡胚肝(CEL)和鸡胚成纤维(CEF)细胞,根据相同条件下GFP阳性细胞数及荧光强度变化判断产生的siRNA对GFP基因表达的沉默作用,比较人H1启动子在哺乳动物和禽源细胞中的转录活性。结果表明:人H1启动子在2种哺乳动物细胞中能有效转录shRNA,但在2种禽源细胞中的转录活性很弱,提示在禽源细胞中表达siRNA和进行基因沉默研究应选用禽源启动子。 相似文献
72.
本研究根据鹅Ⅰ型星状病毒(GAstV-1)的保守基因序列设计一对特异性引物和探针,建立并优化荧光定量PCR检测方法,并分别进行了特异性、敏感性、重复性进行了试验,且采用田间样品进行验证。结果显示,本研究建立的检测方法与新城疫病毒(NDV)、鸭坦布苏病毒(DTMUV)、禽流感病毒AIV(H9N2)、鹅细小病毒(GPV)、鹅圆环病毒(Go CV)、水禽大肠杆菌(E. coli)、鸭疫里默氏杆菌(RA)均无交叉反应;对重组质粒标准品的检测限为1.0×101 copies/μL,组内和组间的变异系数均≤1.00%。13份田间临床样品检测结果显示,本研究建立的荧光定量PCR法阳性检出率为100%。由此可见,本研究建立的GAst V-1荧光定量PCR特异性强、灵敏度高、重复性好,为鹅星状病毒的检测和监测提供了有效的技术手段方法。 相似文献
74.
为了认真贯彻“从严治警”方针,加强队伍建设,进一步增强林业公安机关廉政执法自觉性,提高干警的整体素质。会同县林业公安分局最近推出干警违纪风险抵押承包责任制。违纪范围指党内警告以上、行政记过以上处分以及黄牌警告。风险抵押实行重奖重罚和一票否决。风险抵押金额分为四个等级,即:局长、教导员抵押200元;副局长、纪检组长抵押150元;股所长、指导员(含副职)抵押100元;干警抵押50元。凡在本年度内,没有受到任何处分的干警违纪风险抵押金全部退还给本人外,在抵押金的基础上,再按抵押金的100%奖励给干警。但如有受处分者… 相似文献
75.
针对糖尿病患者需求,以三氯蔗糖、纽甜、安赛蜜和赤藓糖醇为原料,开发出一种低血糖生成指数无糖发酵酸奶。经过试验与口味测试对比,添加三氯蔗糖0.003%,纽甜0.001%,安赛蜜0.014%,赤藓糖醇5%,产品口味最佳,口味测试得分最高。 相似文献
76.
77.
基于已有的DY方法,提出了一种改进的DY共轭梯度法(NMDY算法),该算法产生的搜索方向为充分下降方向,且这一性质与所采用的线搜索方法无关。并在一定的条件下证明了该算法基于Wolfe线搜索求解非凸优化问题的全局收敛性。 相似文献
78.
以PCR方法从活化的鸡外周血淋巴细胞中扩增鸡α-干扰素的成熟肽基因序列,构建原核表达质粒pET32a-α和pGEX6p-α;SDS-PAGE及Western blotting法检测两载体特异性表达成熟肽;将纯化的pET32a-α诱导表达产物免疫小鼠,收获小鼠血清并以pGEX6p-α诱导表达产物检测其中特异性抗体滴度。结果表明:扩增的鸡α-干扰素成熟肽基因成功表达,原核表达产物免疫小鼠可产生特异性抗体,抗体效价为1∶12 000。其结果为制备安全、高效的重组干扰素奠定了基础,为定量检测机体内产生的α干扰素进而了解机体免疫状态提供较为可靠的技术手段。 相似文献
79.
目前,水产品市场上 一些唯利是图的不道德 商贩利用各种“魔术”法, 以达到缺斤短两、以次充 好的赚钱目的,《北京电 视台》也曾对北京的水产 品市场中这种“魔术”骗 法屡屡曝光。下面就小贩 常用十大“魔术”手法进 行一次揭密,你在购买水 产品时,眼睛放亮点,以 免上当受骗。 1、塑料袋装水:一些 小商贩一般在桌子下面 放有事先装好水的黑色 相似文献
80.
江西省宜春市肉牛规模化养殖场发展迅速,肉牛结核病一旦蔓延将造成巨大经济损失。为掌握宜春市某规模化肉牛养殖场结核病的感染情况,采用γ-干扰素ELISA检测方法对该养殖场的300余头肉牛进行随机抽检。结果表明,随机抽取的30头肉牛样品的阳性检出率为3.33%。其中,所调查的2个年龄段的肉牛群中,以12月龄以上的肉牛群阳性检出率最高,为6.67%。在春、夏两季节调查的牛群中,春季阳性检出率最高,为6.67%。数据表明,该牛场结核病的免疫效果较差,须加强防控措施。 相似文献