蓝莓VcLon1基因的克隆、表达及抗旱性分析

【目的】Lon1蛋白酶具有降解叶绿体和线粒体内氧化蛋白、维持细胞正常代谢的功能。在分析蓝莓VcLon1时空表达模式的基础上,利用烟草遗传转化技术结合干旱生理分析,揭示蓝莓VcLon1的生物学功能,为运用生物技术培育蓝莓抗旱品种提供理论基础,并为其他植物抗旱机制研究提供基础信息。【方法】在从南高丛蓝莓‘夏普蓝’中克隆得到VcLon1全长(Gen Bank登录号:MF972079)的基础上,利用DNAMAN、MEGA4.0、Wo LF PSORT和Protparam等生物信息学软件及在线程序预测VcLon1序列及蛋白结构特征,分析比对氨基酸序列同源性并构建其同源蛋白序列进化树;同时,采用实时荧光定量PCR分析蓝莓VcLon1在不同组织及干旱条件下的表达模式;最后,构建表达载体,遗传转化本氏烟,以野生型、VcLon1超表达这2种基因型本氏烟为材料,进行干旱处理并分析二者在生物量生长、光合生理及氧化胁迫水平等方面的差异。【结果】1)PCR扩增得到VcLon1的ORF序列长2 982 bp,该序列编码993个氨基酸,预测蛋白的理论等电点为5.44,分子量为109.5 kDa。VcLon1编码的蛋白序列含有1个典型的AAA+结构域,属于AAA+超家族,定位分析编码蛋白在叶绿体和线粒体中表达,该蛋白与葡萄、苹果等Lon1蛋白酶亲缘关系较近。2)利用实时荧光定量PCR对VcLon1的表达量分析,发现其在‘夏普蓝’蓝莓各组织中均有表达,老叶中的表达量显著低于嫩叶,干旱胁迫显著提高蓝莓VcLon1的转录水平。3)干旱胁迫下各株系本氏烟生长均受到抑制,但VcLon1超表达植株均较野生型生长健壮,其中又以VL-6长势最佳,其叶片未发黄且根系发达,其株高、干质量分别比野生型高36.66%、114.29%。4)干旱胁迫下野生型本氏烟叶绿体肿胀明显且部分基粒片层结构模糊,分层不明显,而VcLon1超表达本氏烟仅部分叶绿体基粒片层空隙增大,其叶绿体超微结构未出现明显损伤,且叶片叶绿素含量高于野生型。同时,野生型本氏烟胞内线粒体普遍出现肿胀、变形,嵴断裂、解体并空泡化的现象,而VcLon1超表达本氏烟的线粒体仍维持正常椭球形。5)在氧化胁迫水平方面,VcLon1超表达植株干旱胁迫下的MDA含量均比野生型低34.38%~49.68%,且其叶片中H2O2的积累也较低,而野生型叶片的褐色面积明显上升。羰基化蛋白含量也呈现相似的变化趋势,VcLon1超表达本氏烟比相同条件下的野生型低36.89%,这可能由于VcLon1超表达植株各株系中SOD、GR、APX及POD等抗氧化酶的活性普遍显著高于野生型所致。【结论】干旱胁迫下,南高丛蓝莓‘夏普蓝’内VcLon1的运作机制可能是通过维护细胞膜系统及叶绿体的正常形态结构,同时通过降解线粒体内羰基化蛋白质,使线粒体结构保持完整、能量代谢等功能得以正常维护,减少活性氧自由基(ROS)的产生及维护抗氧化酶类活性,从而有效地降低细胞器内ROS的产生与积聚,并最终降低胞内的氧化胁迫水平,维持正常植物代谢,提高其抗旱能力。     

怎样观察水色

水是鱼类生活的重要条件，鱼要生长的好，水质必须好，除水中溶氧充足、温度适宜外，其水的肥度要适当。水的肥度一般分为四种类型，可根据水色表现情况，判断水的肥瘦程度，以便采取相应的措施，促使鱼类生长。     

植物减菌降尘能力比较与西安地区应用研究

为了筛选出西安地区滞尘能力较强的园林植物,通过对园林植物滞尘机理的分析,并比较具体植物的滞尘量试验结果,发现产生植物滞尘能力差异的主要原因分为内部和外部2种。植物叶片结构、植株形态与生长状况是主要内部因素;天气、季节和空气中颗粒物的多少也影响植物的滞尘能力。并给出供种植参考的植物种类以及种植建议。     

猪配套系育种方法研究进展

随着生猪养殖业的蓬勃发展,对于生猪品种的要求也随之提高。近年来猪配套系育种得到广泛应用,旨在选育出生产性能和肉质性能优的生猪品种,提高养猪经济效益,促进养猪业健康稳定发展。本文主要围绕配套系的出现、配套系的概念、猪配套系育种的基本方法、配套系在联合育种中的应用以及国内外种猪配套研究进展等进行总结,以期为猪配套繁育体系在生猪养殖业的应用和发展提供理论指导。     

不同贮藏条件对鸡蛋蛋白质二级结构的影响

为了研究不同贮藏条件对鸡蛋蛋白质二级结构的影响,试验选择39周龄伊莎褐蛋鸡鸡蛋100枚,分别采用蛋白高度测定仪和傅里叶红外光谱仪测定不同贮藏温度(4℃和16℃)和时间(第1,8,15,22天)的鸡蛋蛋白高度和蛋白质二级结构。结果表明:随着贮藏时间的延长,鸡蛋的哈氏单位逐渐降低,蛋白质二级结构的含量在不同的贮藏条件下也发生了不同程度的变化;随着贮藏时间的延长,α-螺旋和β-折叠的含量下降,β-转角和无规卷曲含量升高。说明鸡蛋在贮藏期间蛋白质由有序结构转为无序结构,随着哈氏单位的降低,蛋白质二级结构也发生了相应的变化。     

钙敏感受体基因在大鼠不同组织的表达分析

为了研究钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)基因在大鼠不同组织的相对表达差异,探索其在不同组织上的潜在功能,随机选取7周龄左右的雌性及雄性SD大鼠各5只,采用实时荧光定量PCR技术检测CaSR基因在大鼠胃肠道(胃、十二指肠、空肠、回肠)、代谢器官(肝脏、肾脏)及生殖器官(睾丸、附睾、子宫、卵巢)的相对表达量。结果显示:胃CaSR基因表达量显著高于其他肠段(P0.05);肾脏CaSR基因表达量显著高于肝脏(P0.05);睾丸CaSR基因的表达量显著高于附睾(P0.05);子宫与卵巢的表达量较低,且二者无显著差异(P0.05)。结果表明:CaSR基因在雌性、雄性大鼠的胃肠道、代谢器官以及生殖器官组织中均有表达,且在各组织间的表达存在显著差异。     

长春及周边地区鹅致病性大肠杆菌的分离鉴定及敏感药物筛选

为了给长春及周边地区鹅大肠杆菌病提供可行用药方案,本研究采集230份疑似大肠杆菌病患鹅的心、肝、脾等组织,进行病原学检测。经过分离培养、纯培养、显微镜镜检、生化试验及分子生物学试验,其中190份被鉴定为大肠杆菌。选用52种临床常用抗菌药物进行体外药敏试验,药敏试验结果表明:分离菌株对庆大霉素、阿莫西林、盐酸土霉素、诺氟沙星产生耐药性,对硫酸粘菌素、阿米卡星、磷霉素钠和氧氟沙星高度敏感。     

不同负压条件对17保存猪精液生化指标的影响

基于猪附睾中低氧的环境,本实验旨在探讨不同负压条件对17℃保存猪精液生化指标的影响。将稀释好的精液分别保存在正常大气压、负0.02 MPa、负0.04 MPa、负0.08 Mpa条件下,而后放置在17℃恒温箱保存,连续保存13 d,每隔24 h检测精子活率、p H、总抗氧化能力、过氧化氢(H2O2)含量。结果表明:在17℃恒温负压下保存的猪精液p H、总抗氧化能力、H2O2含量显著优于常压对照组(P0.05),在负0.04 MPa下保存的猪精液精子活率显著高于其他组(P0.05)。综上可知,17℃恒温保存的过程中,在负0.04 MPa时能够提高猪精液的保存效果,提高猪精子的活力。     

2011-2012年转地蜂场养蜂规模经济效益调查

养蜂规模是影响蜂场经济效益的主要因素之一,尤其是在转地蜂场生产成本高、风险系数大等条件下.怎样的养蜂规模能取得最佳经济效益（适度养蜂规模）是业内普遍关注的热点.2011-2012年,跟踪调查了浙江省缙云县80家转地蜂场养蜂规模经济效益,结果发现,2011年的适度养蜂规模为4人蜂场平均饲养186群西方蜜蜂;2012年的适度养蜂规模为3人蜂场平均饲养158群西方蜜蜂.这表明转地蜂场适度养蜂经营规模处于动态变化中.调查结果对指导转地蜂场调整适度养蜂规模,增加经济效益具有现实意义.     

2011～2012年转地蜂场组织结构、人文素质及组织化程度调查分析

为了了解转地蜂场的发展情况,2011～2012年对浙江省缙云县80家转地蜂场进行蜂场组织结构、人文素质及组织化程度调查.结果显示,80家转地蜂场全部是一户一家的家庭结构专业化养蜂场.蜂场以2～4人为主,平均每人饲养52群意蜂.蜂农平均年龄38.5岁,以青壮年为主,适应转地蜂场高强度劳动要求.蜂农文化程度以初中学历为多数,小学、初中、高中的比例约为1∶12∶1.蜂农组织化程度达76.25％～82.5％.上述结果表明,转地蜂场是一种能使养蜂业可持续发展的模式.调查中还发现,蜂协、蜂农专业合作社是组织蜂农、普及科学技术、提高蜂农素质、确保蜂产品安全、增加蜂农收入的好组织,具有推广意义.