利用重叠延伸PCR技术进行定点突变研究

[目的]建立一种高效、便捷、经济的DNA定点突变方法。[方法]以重组人组织型纤溶酶原激活剂rPA(Reteplase)基因为模板,采用重叠延伸PCR技术对3个位点进行定点突变,将突变基因片段克隆到克隆载体pEASY-Blunt上,并通过测序验证突变结果。[结果]测序结果表明3个位点的突变结果与预期完全一致,即第10位引入单个碱基A、第137位碱基C突变为G以及第686位碱基G突变为A,通过重叠延伸PCR技术一次引入3个突变碱基,100%的实现目的位点的定点突变。[结论]该研究成功实现目的位点的定点突变,为rPA基因的进一步克隆和功能研究奠定了基础。同时也表明重叠延伸PCR技术是一种高效、便捷、经济的DNA定点突变方法。     

泰山硫磺菌硫磺原变种的生物学特性研究

对泰山硫磺菌硫磺原变种ts菌株生物学特性研究结果表明,以葡萄糖为碳源和以蛋白胨为氮源的培养基最有利于菌丝生长,最佳培养基配方为200 g马铃薯+2.5%葡萄糖+0.2%蛋白胨+0.2%磷酸二氢钾+0.1%硫酸镁+20 g琼脂+1 000 ml水,菌丝生长适宜温度为25～30℃,适宜pH为4～6。     

应用型本科院校“生物化学与分子生物学”课程群实验教学改革探析

“生物化学与分子生物学”课程群作为生命科学各学科基础的实验学科,也是生命科学的最前沿和发展速度最快的学科.其实验技能的训练不仅会直接影响学生对相关课程的理解和学习,还会进一步影响学生科学的思维过程以及分析问题和解决问题的能力.通过对生物化学、分子生物学及基因工程等实验教学内容体系的重组、教学手段与实验考核方式的改革,结合教师的科研情况、学科前沿动态对学生创新能力的培养进行了应用型本科院校“生物化学与分子生物学”课程群实验教学改革尝试,取得良好效果,为同类课程改革提供了参考.     

不同配方培养基对果蝇生长和繁殖的影响

为了筛选出最适果蝇生长的培养基,以遗传实验室饲养的4种果蝇为试验对象,比较了5种不同培养基对果蝇生长发育周期和繁殖后代的影响,结果筛选出了水果培养基和改进的玉米粉培养基,对比得出前者所培养的果蝇三龄幼虫个体明显较大,生长周期也较后者缩短1d左右,而后者所培养的果蝇子代数量要多于前者。     

怎样提高种公牛精液品质

奶牛人工授精技术是发挥优秀荷斯坦种公牛的遗传潜力、提高奶牛遗传品质的重要技术手段。精液质量好坏直接关系到奶牛能否成功受孕。影响奶牛精液品质的因素有很多,主要有遗传、年龄、疾病、饲养水平、管理方法、气候环境和采精技术等。精液生产能力和品质的20%决定于遗传因素,80%取决于环境。只有认真研究这些因素与     

小本创业之贴纸照相店

<正>与普通照相有所区别的是,贴纸照相具有独特的电子相册功能,顾客拍照后可制做精美的电子相册作为永久的纪念。不少贴纸照相店都出现过"爆棚"场面:持币排队者有之;每天必到者有之;结伴同行者有之;一次消费达数百元者亦有之。贴纸照相店功能不断扩充,数月可回收全部成本     

提高水稻抽穗后光合作用效率的技术

在水稻生产中大多数农户,为了提高水稻产量,往往只着眼于早中期田间水稻生长是否繁茂,很少顾及抽穗后期的生长发育状况.有许多农户发现田间秧株间没有封行,就因为没有长好,多次往田里增施化学肥料,结果造成前期群体生长量过大,影响后期光合作用效率,产量反而不高.在生产的中后期采取技术措施,尽可能提高抽穗后光合作用效率,对高产起着决定性的作用.     

智慧乡村建设研究

2006年中央一号文件《中共中央国务院关于推进社会主义新农村建设的若干意见》中提出"社会主义新农村建设",我国的一部分具有较好发展基础条件的乡村进行了建设。"智慧乡村"是农村发展方式的新方向,对社会新农村建设具有重要意义。2017年习近平总书记在党的十九大报告中提出:实施乡村振兴战略。建立健全城乡融合发展体制机制和政策体系,加快推进农业农村现代化。十九大之后,我国将更加重视乡村发展。     

西瓜品种(品系)对蔓枯病的抗性鉴定与评价

为探究不同西瓜种质资源对蔓枯病的抗性特性,试验通过对80份不同地域来源的西瓜种质资源进行蔓枯病抗性鉴定,并利用SSR标记技术对该材料群体进行基因分型和群体结构分析.结果表明,供试80份材料对亚隔孢壳菌(Stagonosporopsis citrulli)均无免疫性,但不同西瓜品种(品系)间对蔓枯病抗性却存在较大差异,采...     

珠三角地区养殖及野生淡水鱼类的甲基汞积累现状

为探明珠三角地区淡水鱼类甲基汞累积的真实状况,本研究对该地区养殖及野生淡水鱼类进行了采样分析,评估了摄入鱼肉的甲基汞暴露风险,并揭示了影响鱼类甲基汞积累的关键因素。实验于珠三角地区15个样点采集不同养殖(包括饲料)及野生鱼类,取肌肉、肝脏和肠道组织,甲醇-KOH消解后用气相-冷原子荧光联用仪测定甲基汞含量。结果显示：(1)珠三角地区鱼类甲基汞含量总体较低,均未超过我国水产品食用安全标准,其中养殖鱼类肌肉甲基汞含量为0.26～331.27 ng/g dw (dry weight,干重),平均含量为61.53 ng/g dw;野生鱼类肌肉甲基汞含量为0.71～1 006.05 ng/g dw,平均含量为110.77 ng/g dw,养殖鱼类甲基汞含量显著低于野生鱼类。(2)养殖鱼类饲料中甲基汞浓度与肌肉甲基汞水平呈显著正相关(R²=0.39),野生鱼类的营养层级与肌肉甲基汞水平呈显著正相关(R²=0.23),表明食物组成及食物中甲基汞含量是决定鱼类甲基汞累积的主要因素。(3)食用该地区鱼肉的甲基汞摄入水平总体较低,其中食用野生鱼类的甲基汞摄入水平...