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61.
利用Primer ExplorerV4软件,针对兔波氏杆菌16S rRNA基因设计4条LAMP引物,优化反应条件,检测特异性、敏感性并对临床样品进行检测.结果显示,LAMP反应在62℃恒温扩增1h即可完成,操作简便,不需要PCR仪等复杂仪器,结果可经电泳检测及肉眼观察;具有良好的特异性;敏感性为普通PCR的100倍,最低可检测到1.65×10-6 mg/L的细菌基因组DNA.用建立LAMP检测方法对32份疑似兔支气管败血波氏杆菌(Bb)样品检测呈阳性,与PCR检测结果相符.该方法的建立为Bb的临床快速检测提供了新的思路. 相似文献
62.
纤维素酶酶活的测定方法 总被引:65,自引:0,他引:65
饲用纤维素酶在饲料工业中已普及应用 ,对其质量检测显得日益重要。纤维素酶是一种复合酶 ,按作用底物的能力划分为两部分 ,一部分是对棉花纤维素能起催化水解作用的酶 ,称为C1 酶 ;另一部分是对羧甲基纤维素钠 (Na -CMC)起水解作用的酶 ,称为Cx 酶。据此 ,一般采用两种测定方法 ,一种是适用于CX 酶的CMC法 ,另一种是适用于C1 酶的滤纸法。下面就此两种方法作一介绍。1 CMC(羧甲基纤维素 )法1 1 材料1 1 1 饲用纤维素酶 由河南省科学院生物研究所提供。1 1 2 试剂 磷酸氢二钠、柠檬酸、羧甲基纤维素、3,5 -二硝… 相似文献
63.
将生活垃圾堆肥通过筛分的方式分为5个粒径等级,并与土壤混合成为草坪组配基质,研究了不同粒径生活垃圾堆肥组配基质的特征及其对黑麦草的生态作用.结果表明:不同粒径堆肥加入土壤中,可显著地改善组配基质的理化性质,提高肥力,不同组配基质的重金属含量存在明显差异.组配基质能有效地提供养分,促进光合,加速草坪植物生长,改善草坪植物色泽,尤其以基质1和基质2的效果最佳.在整个生长期内,基质1和基质2建植草坪的植物地上生物量分别是对照的153.49%和150.77%,地下生物量分别是对照的222.16%和211.34%;叶绿素含量分别是对照的149.06%和133.02%. 相似文献
64.
利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术及RACE方法扩增得到鸭肝炎病毒(DHV)浙江分离株Z10的全基因(5',3'末端序列用RACE法扩增)及4株DHV分离株的VP1基因.结果表明,分离株Z10的全基因片段长7689 bp,有1个大的开放读码框(ORF),ORF位于626~7326位核苷酸,编码2249个氨基酸.Z10分离株全基因序列与GenBank登录的6株具有代表性的DHV核苷酸序列比对,同源性94.5%~98.4%;所测得的DHV分离株的VP1基因的序列与目前GenBank上发表的具有代表性的DHv-Ⅰ VP1基因进行比对分析,结果4株Ⅰ型DHV的VP1基因cDNA长度均为714 bp,编码238个氨基酸.4株DHV-Ⅰ之间VP1基因的核苷酸序列同源性为93%~99.7%,氨基酸序列同源性为95.0%~100%;与参考毒株VP1基因的核苷酸序列同源性为92.2%~100%,氨基酸序列同源性为95.0%~100%;表明各分离毒株的亲缘关系较近,属于同一基因群. 相似文献
65.
一、美国对口蹄疫和其他外来动物疫病入侵的应急防控体系 1.疫情监测.美国农业部动植物卫生检疫局(APHIS)有一个强大的防控体系,在检测和应对口蹄疫这样的外来疫病暴发时发挥着重要作用.自1929年以来,美国一直没有发生过口蹄疫.这种机制是由紧密与活畜生产者和APHIS合作并向州和联邦官员报告任何可疑外来疫病的美国农业部批准认可的私人执业兽医构成的框架. 相似文献
66.
67.
斑点免疫金渗滤法检测猪生殖与呼吸综合征抗体的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
应用提纯的猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗原包被硝酸纤维素膜,然后用胶体金标记的金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)建立了检测PRRS抗体水平的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。该法通过胶体金标记SPA直接显色,阳性者出现红色斑点,整个试验过程仅需5min即可判断结果;与猪瘟、猪伪狂犬病、猪细小病毒病阳性血清不发生交叉反应;纯化PRRSV抗原的最低检测量为0.0553mg/mL,即55.3ng/点。对200份猪血清用该法与ELISA同时进行PRRS抗体检测,两种方法的符合率达98%。 相似文献
68.
鸭疫里默氏菌病和大肠杆菌病多重PCR诊断方法的建立 总被引:3,自引:0,他引:3
参考GenBank中鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的外膜蛋白A(OmpA)基因序列,应用PrimerPremier5.0软件在二者高度保守区设计了2对引物,建立了适合鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的快速检测的多重PCR检测方法。以该方法对已分离并保存的鸭疫里默氏菌和大肠杆菌进行PCR扩增,分别扩增出与试验设计相符的670、408bp的特异性DNA片段。将扩增所得的DNA片段进行克隆测序,测序结果表明分别为鸭疫里默氏菌和大肠杆菌OmpA基因序列。该方法对鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的检测下限分别为4×104CFU/mL和3×104CFU/mL。表明所建立的PCR方法具有特异、快速和敏感的特点,可用于诊断鸭疫里默氏菌、大肠杆菌以及两者的混合感染。 相似文献
69.
参考GenBank中兔巴氏杆菌16SrRNA和波氏杆菌的fim2的基因序列,应用Premier 5.0软件在二者高度保守区设计了2对引物,建立了适合巴氏杆菌和波氏杆菌快速检测的多重PCR检测方法。以该方法对巴氏杆菌和波氏杆菌参考菌株进行PCR扩增,分别能从各自的基因组中扩增出与试验设计相符的644bp和425bp的特异性DNA片段。将扩增所得的DNA片段进行克隆测序,测序结果表明分别为巴氏杆菌16SrRNA和波氏杆菌fim2基因序列。该方法对波氏杆菌的检测下限为4×102 CFU,对巴氏杆菌的检测下限为6×101 CFU。对兔源性沙门菌、葡萄球菌、大肠杆菌、魏氏梭菌扩增结果为阴性。表明所建立的RT-PCR检测技术具有特异、快速和敏感的特点,可用于鉴别诊断兔巴氏杆菌和波氏杆菌以及2者混合感染。 相似文献
70.
再认识酸化剂 发展绿色畜禽业 总被引:1,自引:0,他引:1
近年来,酸化剂作为高效、无污染、无残留的饲料添加剂,与益生素、酶制剂、香味剂等并列为新型的绿色饲料添加剂。自90年代以来,人们不断对其作用机制和应用效果等问题进行深入研究,本文对此作出综述。 相似文献