大米蛋白酶水解条件及水解度对合成类蛋白的影响

观察了胰蛋白酶、碱性蛋白酶和胃蛋白酶水解米渣蛋白的条件及其水解度对合成类蛋白反应的影响。结果表明:胰蛋白酶、碱性蛋白酶和胃蛋白酶水解大米蛋白的最适温度分别为50℃、60℃和60℃,最适起始pH值分别为10.0、11.0和1.0,底物浓度分别为7%、5%和5%,E/S为1%、3%和7%,水解时间为4 h;该条件下,3种酶水解大米蛋白的水解度分别为54.0%、71.4%和57.3%,氮收率分别为56.3%、73.8%和58.1%;随着水解时间的延长,胰蛋白酶和胃蛋白酶水解产物中肽类组分变化小,而碱性蛋白酶水解产物中小分子的组分显著增加;大米蛋白水解产物的水解度对类蛋白反应的产率有显著影响,以胃蛋白酶为类蛋白合成酶时,大米蛋白的胰蛋白酶、碱性蛋白酶和胃蛋白酶水解产物的水解度分别在54.0%、71.4%和69.1%时,合成类蛋白的产率最高,分别为2.6%、17.5%和15.2%。     

用于水生病原菌的3种高通量活菌计数方法的比较

以一株副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)作为研究对象,比较了MTT [3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐]比色法、ATP生物发光法和高通量生长曲线法在活细菌高通量计数上的应用效果。用96孔培养板进行不同浓度细菌活菌计数,确定了上述3种方法在副溶血弧菌活菌计数的标准曲线和线性范围。结果显示,副溶血弧菌的MTT比色法以DMSO溶解的MTT产物甲瓒在555 nm的吸光度(OD555 nm)为计数依据,活菌数的对数(LgC)与LgOD555 nm线性关系的标准曲线为LgC=(1.0439±0.0200)LgOD555 nm+(8.0565±0.0125),相关系数R²=0.9965,线性检测范围为7.8×106~2.5×108 CFU/ml;ATP生物发光法以ATP产生的相对发光度值(RLU)为计数依据,LgC与LgRUL线性关系的标准曲线为LgC=(0.9590±0.0065)LgRLU+(0.9949±0.0366),相关系数R²=0.9994,线性检测范围为1.0×104~3.0×108 CFU/ml;高通量生长曲线法以生长曲线达到拐点的时间(Ts)为计数依据,LgC与Ts线性关系的标准曲线为LgC=?(0.8727±0.0230)Ts+(9.0128±0.1572),相关系数R²=0.9924,线性检测范围为1.0×100~1.0×107 CFU/ml。用3种方法对实际菌液测量并与平板计数法比较表明,ATP生物发光法与高通量生长曲线法有很好的准确性,MTT比色法准确度稍差,而高通量生长曲线法有最宽的线性范围,也最适合高通量测定。     

小鼠子宫内膜细胞炎症模型的建立

用0.25％胰酶-EDTA消化法分离培养小鼠子宫内膜细胞,用细菌脂多糖(LPS)诱导子宫内膜细胞炎症,以培养细胞的形态学和传统炎症指标作为炎症发生和发展的判断标准.以不同浓度的LPS作用于细胞,收集不同时段的细胞,用RT-PCR的方法测定细胞中IFN-γmRNA的表达丰度.结果表明,100 ng/mL LPS是体外培养...     

海西州主要农业气象灾害及防御措施

农业是受气候变化影响最为敏感的领域之一,灾害性天气的出现会直接对农业生产造成影响。气候变化会导致主要作物水分亏缺、生育期缩短、农作物产量下降,威胁粮食安全,同时还会改变我国现行农业种植制度和农作物布局。基于此,本文结合海西州主要气象灾害类型及其对农业生产的影响,提出了科学有效的防御措施,以降低灾害性天气对农业生产的危害,进一步促进农业生产健康、可持续发展。     

多聚磷酸盐激酶(PPK)基因植物表达载体的构建(英文)

[目的]构建融合表达PPK和绿色荧光蛋白的融合表达载体pCAMBIA1302-PPK。[方法]根据GenBank中登录的大肠杆菌PPK基因序列(L03719)设计引物,以E.coli DH5α基因组DNA为模板,通过PCR扩增得PPK基因,然后用In-Fusion@HD Cloning Kit将PPK基因克隆到pCAMBIA1302载体的NcoI酶切位点。[结果]序列测定结果显示,pCAMBIA1302-PPK含有约2.0kb的PPK基因片段,说明PPK基因已经插入植物表达载体pCAMBIA1302的绿色荧光蛋白基因前。[结论]成功构建了融合表达PPK和绿色荧光蛋白的融合表达载体pCAMBIA1302-PPK。     

勐海县湿地保护与修复规划初探

文章以云南省勐海县2019年湿地资源数据为基础,通过分析勐海县湿地资源存在的问题及受胁因素,提出相关对策,以提高湿地保护管理能力,加强湿地修复,有效保护饮用水资源,促使湿地的生态效益得到有效发挥。     

村落遗产入口外区域规划思考——触动于宏村、西递入口的燃眉之殇

由旅游开发主导,许多村落遗产入口外区域的风貌格局被大肆改变;而作为风貌格局与农业景观紧密相关的村落,该区域意义特殊,不能简单套用一般的保护控制地带规划要求;否则不当的处理会对村落遗产价值造成燃眉之殇。本文从技术、制度层面和人文层面对产生这种状况的缘由进行了思考,并提出了解决问题的对策。     

口服ND弱毒苗对鸡十二指肠中2种神经多肽阳性细胞的影响

应用新城疫弱毒苗经消化道黏膜2次免疫鸡后,采用免疫组化的方法检测鸡十二指肠中生长抑素(Somatostatin,SS)阳性细胞和P物质(Substance P,SP)阳性细胞的分布及其数量变化。结果表明,动物首免后第3周,新城疫免疫组SS阳性细胞数量极显著增加(P<0.01),而SP阳性细胞数量显著减少(P<0.05);首免后第5周和第7周,新城疫免疫组和对照组中的2种阳性细胞数差异不显著。     

几种黏膜免疫佐剂对鸡小肠IgA分泌细胞的影响

分别在新城疫Ⅳ系弱毒苗中添加黏膜免疫佐剂乳酸杆菌、CpG DNA、重组IL-2、氟化钠和大豆黄酮，经口免疫鸡后，研究十二指肠、空肠、Peyer’s斑单位面积IgA分泌细胞的变化。首先提纯鸡IgA和制备兔抗鸡IgA血清，然后应用免疫组化技术显示鸡小肠IgA分泌细胞。结果表明，在免疫后第3周、第5周乳酸杆菌组比新城疫组（ND）极显著增加各段小肠IgA分泌细胞的数量（P〈0．01）；CpGDNA、重组IL-2和大豆黄酮在整个免疫期内均明显增加鸡小肠黏膜局部IgA分泌细胞数量；NaF对鸡体黏膜局部IgA分泌细胞数量无明显增加。结果表明乳酸杆菌、CpGDNA、重组IL-2和大豆黄酮是有效的口服黏膜免疫佐剂。     

江苏地区羊鼻腔7种病原体感染的调查

为了解江苏省羊鼻腔传染性疾病的病原分布情况,于2020年冬季(11月份)采集江苏省地区多个地级市11家羊场的269份鼻腔拭子,采用PCR方法对多种病原体进行检测,分析7种呼吸道病原体在鼻腔分布的特征。结果表明：269份鼻腔拭子中,7种病原体检出率分别为溶血性曼氏杆菌(243份,90.3%),绵羊肺炎支原体(197份,73.2%),乳链球菌(138份,51.3%),多杀性巴氏杆菌(44份,16.3%),羊口疮病毒(44份,16.3%),肺炎克雷伯菌(22份,8.2%)和山羊副流感病毒3型(6份,2.2%)。其中南通(海门)、南京和淮安等市与泰州和连云港等市相比鼻腔病原的阳性率更高,检出病原种类数量更多。另外,江苏地区羊鼻腔病原呈混合感染状态,混合感染率达到82.5%。对阳性病原进行相关性分析发现,溶血性曼氏杆菌和绵羊肺炎支原体有超过50%的几率存在显著的共存关系(R=0.756,P<0.000 1)。本研究结果初步明确了江苏地区冬季羊的鼻腔病原分布情况,为进一步对羊呼吸道病原感染的防控提供了参考。