LINC24065在体细胞核移植牛中的异常表达

旨在揭示DLK1-DIO3印记域上一个新的长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)LINC24065在自然繁殖牛(natural reproduction,NR)与体细胞核移植牛(somatic cell nuclear transfer,SCNT)中的组织表达与印记状态,对进一步了解DLK1-DIO3印记域在供体核重编程中的作用提供一定的理论基础。本研究以自然繁殖牛的大脑组织为试验材料,利用RACE和RT-PCR技术,在牛的DLK1-DIO3印记域内鉴定了一个新的印记的lncRNA基因,命名为LINC24065。用基于SNP(single nucleotide polymopisms)的RT-PCR产物直接测序方法分析LINC24065在自然繁殖牛和体细胞核移植牛组织中的表达及印记状态。序列分析发现,LINC24065编码6个可变剪接体,并在自然繁殖牛被检测的7个组织中都表达,而在体细胞核移植牛组织中没有检测到可变剪接体LINC24065-V3,且其它5个剪接体呈现组织特异性表达。印记状态分析发现,LINC24065在自然繁殖牛和体细胞核移植牛的7个组织中均为单等位基因表达,但在体细胞核移植牛的大脑组织中出现了与其他组织亲本来源不同的单等位基因表达。研究结果说明,LINC24065基因在体细胞核移植牛的大脑中出现了印记紊乱,并且剪接体在组织中的表达也发生了改变。以上研究结果说明LINC24065基因与体细胞核移植牛的发育异常有关。     

外源精胺对黑果枸杞不同性质愈伤组织诱导再生器官及玻璃化的影响

以黑果枸杞不同性质的愈伤组织为试材,将不同浓度的精胺(Spm)添加于MS培养基中,研究外源Spm对黑果枸杞不同性质愈伤组织诱导再生器官及玻璃化的影响,以期为黑果枸杞植株再生技术、遗传转化等提供参考依据.结果 表明:添加适宜浓度的Spm均能显著提高愈伤组织再生率、降低玻璃化率.4种不同性质愈伤组织的再生率、玻璃化率影响效果依次为芽愈伤组织(BEC)＞叶愈伤组织(LEC)＞茎愈伤组织(SEC)＞花药愈伤组织(AEC).青海诺木洪(QH-N)和宁夏中宁(NX-Z)的BEC添加Spm最佳浓度均为30 mg·L-1,再生率分别达到60.62％和63.89％,均无玻璃化苗发生;LEC添加Spm最佳浓度均为20 mg·L-1,再生率分别达到49.48％和52.48％,均无玻璃化苗发生;SEC添加Spm最佳浓度分别为10 mg·L-1和15 mg·L-1,再生率分别为33.60％和42.11％,玻璃化率分别降至1.14％和0％;AEC最佳浓度均为15 mg· L-1,再生率分别为19.89％和34.86％,玻璃化率分别降至12.19％和8.97％.外源精胺能有效促进愈伤组织再生率,并不同程度减轻或抑制玻璃化苗的发生.     

药用植物组织与细胞培养中的褐变问题

结合近年药用植物组织与细胞培养的研究项目,以红豆杉、冬凌草、甘草为例,探讨了药用植物组织与细胞培养中的褐变问题,讨论了褐变与基因型、外植体、培养基、培养条件及接种密度的关系。     

负氧离子对蚕繁殖力的影响

采用AS系列负氧离子(O-2)发生器,使蓖麻蚕、家蚕1～5龄生活在空气富含O-2(浓度＞5×104N/cm2)的蚕室中,按蛹、蛾、卵、蚁蚕、蚕系列生殖发育顺序,系统地研究了负氧离子对它的影响与作用.结果表明处理组比对照组出蛾齐一,羽化率增高,产卵速度加快,总产卵量增多,良卵率加大,不受精卵率减少,胚子发育整齐,孵化齐一,孵化率增高,并在一定程度上能增进次代蚕的强健度.另外,幼虫期和卵期环境中都补充O-2,可使实用孵化率极显著地高于对照11.38个百分点(家蚕)和9.08个百分点(蓖麻蚕),而只在卵期补充负氧离子,也可有效地促进胚子发育与孵化齐一,获得与整个蚕期补充O-2相近效果.     

植物生长物质对冬凌草愈伤组织生长及褐化的影响

研究了不同种类植物生长物质对冬凌草愈伤组织生长及褐化的影响,结果表明:培养基中植物生长物质的种类、浓度及其组合对愈伤组织生长及褐变起着重要的作用;适宜浓度的生长素(2,4!D、NAA和IBA)、细胞分裂素(6!BA和KT)、GA3能不同程度地促进愈伤组织的生长,减轻或抑制褐化作用,其中以2 mg/L2,4!D+0.2 mg/LKT+0.5 mg/LGA3效果最好。     

生长调节物质对黑果腺肋花楸试管苗增殖和生根的影响

研究了不同种类植物生长调节物质对黑果腺肋花楸试管苗增殖和生根的影响,结果表明:KT对黑果腺肋花楸试管苗的增殖无效果;MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA对黑果腺肋花楸试管苗的增殖、继代培养效果最好;IBA的生根效果优于NAA,尤其是1/2 MS+0.4 mg/L IBA表现最好。     

小麦与多枝赖草耐盐纯合易位系的培育及GISH鉴定

以小麦与多枝赖草属间杂种花药培养获得的纯合后代纯系为材料，经过细胞学观察、田间选拔、抗性鉴定、综合农艺性状调查以及小区产量对比试验，从中初步筛选鉴定出具有外源耐盐性状、且农艺性状好的材料，再经分子标记(GISH)鉴定纯合易位系。表明花药培养可有效克服小麦远缘杂交后代的疯狂分离，并可促进染色体的结构变异，在短时间内获得大量具有丰富变异且可稳定遗传的后代，大大缩短了小麦远缘杂交导入外源基因的年限。     

黑果腺肋花楸组织培养和快繁体系的优化研究

以黑果腺肋花楸带芽茎段为试验材料,采用组织培养的方法,研究不同激素含量和配比对其组织培养和快速繁殖的影响。结果表明:茎段在MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L培养基上诱导芽最快最好,KT能诱导愈伤组织,但对试管苗的芽诱导无明显影响;在MS+6-BA0.5mg/L+IBA 0.2mg/L培养基上继代1次,增殖系数就能达6倍以上;生根培养基1/2MS+IBA 0.5mg/L效果最好,生根率近100%;移栽基质以草炭土∶营养土∶蛭石=1∶2∶1的基质中最好,成活率达100%。     

冀北山区野生红柴胡组织培养与快速繁殖研究

以冀北山区野生药用植物红柴胡的腋芽为外植体,以MS+6-BA 1.5mg/L+IBA 0.5mg/L为诱导培养基,以MS+6-BA 1mg/L+IBA 0.5mg/L为增殖培养基,以1/2MS+IBA 0.5mg/L为生根培养基,采用渐进法炼苗,注重适时移栽,成活率达到90%以上,且苗齐苗壮。