异鳞石山棕ISSR-PCR反应体系的建立及其亲缘关系分析

为进一步明确异鳞石山棕(Guihaia heterosquama)的分类地位以及异鳞石山棕的遗传多样性本研究以异鳞石山棕及其近缘种共10种40份植物为材料,利用L₁₆(4⁵)正交设计实验建立异鳞石山棕的最佳ISSR-PCR反应体系(总体积20μL,包括2μL 10×Buffer,2.5μL Mg^2+(25 mmol/L),0.7μL dNTPs(10 mmol/L),0.5μL引物(10μmol/L),模板DNA 50 ng,Taq DNA聚合酶1.25 U),并通过筛选的ISSR引物对40份植物进行亲缘关系分析。结果表明筛选出的14条引物共扩增出209个位点多态性位点200个,平均多态性位点百分率为95.7%。异鳞石山棕与两广石山棕(Guihaia grossifibrosa)遗传相似系数最大(0.718),亲缘关系最近,与多裂棕竹(Rhapis multifidi)遗传相似系数最小(0.565),亲缘关系相较于其他种最远。10种植物共聚为3大类,异鳞石山棕和石山棕(Guihaia argyrata)、两广石山棕聚到一起。研究结果支持将异鳞石山棕划分至石山棕属(Guihaia)的观点,为异鳞石山棕的分类提供分子水平上的证据,同时也为后续异鳞石山棕的遗传多样性、种质资源的开发利用提供参考依据。