V5标记的猪圆环病毒2型Cap蛋白重组杆状病毒表达载体的构建

试验旨在利用真核表达系统构建V5标记的猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白的表达载体。采用基因工程技术将V5标签引入到PCV2 ORF2基因C末端,并将标记基因定向克隆入pFastBacHTA载体,将pFastBacHTA-ORF2-V5重组转移载体转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,使用脂质体介导法将鉴定后的重组杆状病毒质粒转染于Sf9细胞中;运用间接免疫荧光试验(IFA)、SDS-PAGE和Western blotting试验对Sf9细胞中V5标记Cap蛋白的表达进行验证。结果显示,本试验成功将V5标签引入到PCV2 ORF2基因末端,pFastBacHTAORF2-V5重组转移载体转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞后获得了Bacmid-ORF2-V5重组杆状病毒质粒;IFA、SDS-PAGE和Western blotting试验结果显示,在Sf9细胞中能检测到重组杆状病毒V5标记的PCV2Cap蛋白,具有良好的反应原性,说明本试验成功获得一株rAcMNPV Cap-V5重组杆状病毒。试验结果为PCV2标记亚单位疫苗的研制提供一定的理论依据。     

V5标记的猪圆环病毒2型Cap蛋白重组杆状病毒表达载体的构建

试验旨在利用真核表达系统构建V5标记的猪圆环病毒2型（PCV2） Cap蛋白的表达载体。采用基因工程技术将V5标签引入到PCV2 ORF2基因C末端,并将标记基因定向克隆入pFastBacHTA载体,将pFastBacHTA-ORF2-V5重组转移载体转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,使用脂质体介导法将鉴定后的重组杆状病毒质粒转染于Sf9细胞中;运用间接免疫荧光试验（IFA）、SDS-PAGE和Western blotting试验对Sf9细胞中V5标记Cap蛋白的表达进行验证。结果显示,本试验成功将V5标签引入到PCV2 ORF2基因末端,pFastBacHTA-ORF2-V5重组转移载体转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞后获得了Bacmid-ORF2-V5重组杆状病毒质粒;IFA、SDS-PAGE和Western blotting试验结果显示,在Sf9细胞中能检测到重组杆状病毒V5标记的PCV2 Cap蛋白,具有良好的反应原性,说明本试验成功获得一株rAcMNPV Cap-V5重组杆状病毒。试验结果为PCV2标记亚单位疫苗的研制提供一定的理论依据。     

奥地利发现与仔猪先天性震颤相关的新型瘟病毒(Linda病毒)

正荐语:仔猪先天性震颤可导致仔猪震颤,无法正常吸吮乳汁,常导致断奶前仔猪死亡率升高,给养猪业造成很大损失,本文介绍了奥地利某猪场暴发仔猪先天性震颤,经检测发现致病因素为一种新型瘟病病毒种类——Linda病毒。2003年在澳大利亚某猪场出现猪的非典型瘟病毒,后被称为Bungowannah病毒(BV), 该病毒引起母猪的繁殖障碍,死胎和猝死,由于其明显的致病性,BV被认为是对全球猪健康事业最大的威胁,但这种病毒或其类似病毒在其他     

猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒2型及链球菌混合感染的诊断

正2016年3月贵州省某规模化猪场的保育猪相继出现四肢无力,趴地不能站立,叫声嘶哑,死亡率高。经临床检查和实验室诊断确诊为猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒2型和链球菌混合感染。现将诊断结果报道如下:1发病情况该规模化猪场存栏猪1 000余头,2016年3月中旬开始在2~3月龄保育猪出现发病,呈叫声嘶哑、体温升高、眼缘肿大、四肢无力、趴地不能站立,并不断出现死亡现象;截止3月下旬共     

一例由PCV2感染引起母猪产木乃伊胎的诊断报告

正猪圆环病毒病感染是指由猪圆环病毒(PCV)引起的猪的一种传染病,其主要临床特征为母猪繁殖障碍、体质下降、消瘦、呼吸困难、贫血、黄疸、生长发育不良、腹泻、内脏器官及皮肤的广泛病理变化,特别是肾、脾脏及全身淋巴结的高度肿大、出血和坏死~[1]。PCV分为PCV1和PCV2两个血清型,PCV2危害极大。猪圆环病毒自2000     

猪食道口线虫与猪圆环病毒2型混合感染的诊断

正食道口线虫病是由盅口科、食道口属的线虫寄生于反刍家畜和猪的大肠所引起的一类线虫病,由于某些种类的食道口线虫的幼虫可在寄生部位的肠壁上形成结节,故又称为结节虫病~([1])。重度感染食道口线虫幼虫可使仔猪发生持续性腹泻,粪便呈暗绿色,含有多量黏液,有时带血,严重时引起死亡;慢性病例患畜则表现为便秘和腹泻交替发生,渐进性消瘦,最后可因机体衰竭而死亡。猪圆环病毒病感染是指由猪圆环病毒     

丙硫苯咪唑和吡喹酮对鸭人工感染台湾次睾吸虫的驱除试验

台湾次睾吸虫(Metorchis taiwanensis Morishta et Tseuchimochi，1925)隶于后睾科(Opisthorschuidae Braun，1901)次睾属(Metorrhis Looss，1899)，分布于江苏、广东、上海、云南、福建、安徽、江西、四川、浙江、宁夏、吉林及台湾等省市，我国各地家鸭自然感染率为2．06％～15．00％，感染强度为1～250     

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为了解贵州猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的变异情况,对分离PEDV的M基因进行了克隆测序和生物信息学分析.结果表明:分离的PEDV株(用N-GZ表示)与贵州省动物疫病研究室曾报道的PEDV株(用GZ表示)位于同一进化分支,与疫苗株CV777处于不同进化分支.N-GZ株与GZ株M基因的核苷酸序列相似性为98.5％,表明其亲缘关系较近,与CV777疫苗株的亲缘关系稍远.多重比较发现,N-GZ株与CV777株M蛋白的抗原表位区存在3个氨基酸的差异,与GZ株相比存在2个氨基酸的突变.M基因是PEDV的保守基因,但N-GZ株M基因在抗原表位区存在一定程度突变.     

贵州省某规模化猪场暴发猪瘟与链球菌病混合感染的诊断

为了解贵州某规模化猪场发病断奶仔猪死亡原因,本研究采用流行病学调查、临床症状观察、病理解剖诊断和RT-PCR检测等方法,对该规模化猪场发病猪进行了诊断。试验结果表明,通过流行病学调查、剖检病理和猪瘟抗体快速金标检测卡检测,初步诊断该猪场发病猪疑似猪瘟病毒和细菌混合感染;RT-PCR检测核酸确诊发病猪为猪瘟病毒感染;细菌培养分离、生化特性鉴定和动物致病性试验确诊为猪链球菌。造成该猪场断奶仔猪发病死亡的原因为猪瘟病毒和猪链球菌混合感染所致。     

猪繁殖与呼吸综合征诊断技术的研究进展

猪繁殖与呼吸综合征又称猪蓝耳病,是严重危害养猪业的传染病之一,2006年我国自南向北大面积暴发高致病性猪繁殖与呼吸综合征,目前该病在我国有的地区又出现不断发病的事态,在整个防控过程中快速准确的诊断方法与技术对诊断猪繁殖与呼吸综合征至关重要。本文主要从猪繁殖与呼吸综合征的病毒的分离鉴定、血清学诊断方法和分子生物学诊断等方法及技术的新研究进展进行了综述,以期为猪繁殖与呼吸综合征的诊断与防控提供一定的理论支持和参考依据。