黑叶猴支原体及细菌混合感染的诊治

<正>2016年夏,贵州省某动物园国家一级保护动物黑叶猴4只均出现流涎、喘气、消瘦、被毛脱落、全身无力等症状,其中2只发病1 d后死亡。该黑叶猴没有接种过任何疫苗。为弄清病因,于是送检发病死亡黑叶猴1只及发病猴血液2份到我校物动物医院进行确诊。根据临床症状、病理剖检和实验室诊断,确诊黑叶猴为支原体感染、链球菌及结核分支杆菌混合感染引起死亡。现报道如下。1临床症状黑叶猴发病前身体消瘦,被毛脱落、粗乱,发病     

母猪繁殖障碍类疫病流产的PCR技术诊断及其防治

母猪流产是母猪繁殖障碍类疫病中较为普遍存在的一特征性临床表现,其主要症状为母猪产出死胎,未足月的活胎儿（早产）或木乃伊胎。临床上引起母猪流产的原因较多,但多数是由病毒、细菌等传染性病原微生物引起的,少数是由于营养缺乏、饲养管理等其他因素引起。本文主要通过对母猪繁殖障碍类疫病的病因分析、PCR技术诊断及防治方法的建立进行探讨,为临床上母猪繁殖障碍类疫病的诊断防治提供参考。     

长白猪IL-4基因克隆及真核表达载体的构建

将长白猪外周血淋巴细胞在刀豆素A(ConA)的刺激下培养24 h后,提取其总RNA,应用RT-PcR技术扩增白细胞介素-4(IL-4)cDNA,克隆到pMD19-T载体并测序.将构建好的载体双酶切并回收目的片段与pcDNA3.1(+)载体连接并转化入Top10中构建真核表达载体,真核表达载体经双酶切及测序结果表明:克隆的IL-4 cDNA全长为411个碱基,其中ORF为402个碱基,编码133个氨基酸,与GenBank公布的猪IL-4比对同源性为100%,从而证实成功构建了长白猪IL-4 cDNA真核表达载体.     

母猪繁殖障碍类疫病流产的PCR技术诊断及其防治

母猪流产是母猪繁殖障碍类疫病中较为普遍存在的一特征性临床表现,其主要症状为母猪产出死胎、未足月的活胎儿(早产)或木乃伊胎.临床上引起母猪流产的原因较多,但多数是由病毒、细菌等传染性病原微生物引起的,少数是由于营养缺乏,饲养管理等其他因素引起.本文主要通过对母猪繁殖障碍类疫病的病因分析,PCR技术诊断及防治方法的建立进行探讨,为临床上母猪繁殖障碍类疫病的诊断防治提供参考.     

犬瘟热病毒H基因原核表达质粒的构建

为H蛋白进一步表达作为诊断用抗原、建立特异的犬瘟热病毒(CDV)抗体检测方法及CDV的预防奠定基础,以已构建含有犬瘟热病毒H基因的pMD18-H质粒为模板,利用合成的特异性引物进行PCR扩增,得到1824bp的目的DNA片段,将所得H基因克隆至经相同双酶切处理后的pET32a(+)原核表达载体中,获得重组质粒pET32...     

贵州省某规模化猪场猪瘟、猪伪狂犬病和大肠杆菌病混合感染的诊断

为了解贵州省某规模化猪场猪只发病原因,课题组成员采用流行病学调查、临床症状观察、病理剖检诊断、酶联免疫吸附试验(ELISA)、PCR/RT-PCR检测、细菌分离鉴定等方法对送检的发病猪病料进行诊断.结果表明,该猪场猪只为猪瘟病病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)和大肠杆菌混合感染.建议该猪场根据诊断结果及时做出处理.     

犬瘟热病毒贵州株融合蛋白基因原核表达质粒的构建

为了研究犬瘟热病毒贵州株(CDV-GZ1)完整融合蛋白(F),试验采用PCR方法以pMD18-F质粒为模板,利用特异性引物扩增获得大小为1 989 bp的目的 DNA,并将其克隆至pET32a(+)原核表达载体中,获得重组质粒pET32a(+)-F。结果表明:目的基因插入位置和阅读框均正确,说明F基因原核表达质粒构建成功;质粒pET32a(+)-F在BL21(DE3)中经诱导表达未获目的蛋白,说明CDV融合蛋白可能不适合在该表达系统中进行完整蛋白的表达。     

某规模化猪场急性巴氏杆菌感染的诊治

<正>猪巴氏杆菌病又称猪肺疫,是由多杀性巴氏杆菌引起的急性或散发性传染病,俗称"锁喉风"、"肿脖瘟",是一种人畜共患病。2017年1月某规模化猪场发生猪急性死亡,于是猪场工作人员送检有相同临床症状的保育猪1头于实验室检测。猪场现有保育猪600头,猪群突然发病,发病率为14.7%(88/600)。现将其诊治防控情况介绍如下。     

猪传染性胃肠炎病毒SC-Y株编码复制酶聚蛋白 ORF1的克隆及结构特征分析

应用RT-PCR方法扩增了猪传染性胃肠炎病毒SC-Y株编码复制酶聚蛋白的ORF1序列,将其进行克隆、序列测定和分析。确认SC-Y株ORF1全长20 053 nt(GenBank收录号DQ390461)。该序列包含2个ORF,其中ORF1a由12 053个核苷酸构成,可编码由4 018个氨基酸组成的多肽,ORF1b由8 036个核苷酸构成,可编码由2 678个氨基酸组成的多肽。对SC-Y与TGEV参考毒株及不同冠状病毒对应区进行序列比较,结果显示,SC-Y株与PUR46-MAD株的同源性最高,ORF1a的核苷酸同源性为99.5%,推导氨基酸同源性为99.2%,ORF1b的核苷酸及推导氨基酸同源性均为99.8%;不同冠状病毒之间ORF1b比ORF1a具有更高的保守性。     

猪场爆发猪繁殖与呼吸综合征的临床诊断及实验室检测

在对某猪场疑似猪繁殖与呼吸综合征的临床诊断、病理诊断、抗体快速金标检测、回归动物实验和细胞病变观察的基础上,参考GenBank上PRRSVLV和VR-2332毒株核苷酸序列,设计并合成一对特异性引物,以提取来自贵州某猪场猪繁殖与呼吸综合征疑似病料（包括血液、肝、肺、肾、淋巴结、心、脾组织）的总RNA为模版,应用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法,经94℃预变性2min;94℃变性45s,60℃退火1min,72℃延伸1min进行35个循环;72℃再延伸10min进行扩增。扩增产物经回收纯化后,应用pMD18-T载体进行克隆后测序。测序结果表明,所扩增DNA片段大小为716bp,该核苷酸序列与湖南发现的PRRSV序列同源性为100％。本实验结果说明临床诊断及实验检测方法作为猪繁殖与呼吸综合征的诊断方法是可靠的,可为猪繁殖与呼吸综合征诊断提供参考依据。