禽巴氏杆菌C48-1外膜蛋白H基因与鸡IL-18基因真核共表达载体的构建及表达

根据鸡IL-18和真核质粒pcDNA3的序列，设计1对特异性引物，以重组质粒pcDNA3／IL-18为模板，扩增出具有完整真核表达结构的CMV-cIL-18-BGHpA片段。将此片段非定向插入重组表达质粒pcDNA3／ompH中，经酶切分析、PCR鉴定及序列测定证实成功构建了共表达禽巴氏杆菌C48-1外膜蛋白H基因和鸡IL-18基因的重组表达质粒。将共表达质粒转染Cos7细胞，经RT—PCR、SDS—PAGE及Western blotting检测，证明了外膜蛋白H基因及鸡IL-18基因均获得了瞬时表达，为研究禽巴氏杆菌C48-1外膜蛋白H的免疫原性和鸡IL-18在基因疫苗中的免疫调节作用奠定了基础。     

11种杀菌剂对梨树黑斑病菌的室内毒力测定

为筛选出防治梨黑斑病的高效低毒杀菌剂,采用菌丝生长速率法测定了11种杀菌剂对梨树黑斑病菌的毒力。结果表明:40%氟硅唑乳油对梨树黑斑病菌丝的毒力最强,EC_(50)值最低,为0.401 6μg/mL;其次是10%苯醚甲环唑乳油、20%丙环唑乳油、25%戊唑醇乳油,EC_(50)值分别为1.478 0、2.018 5、4.101 0μg/mL;1.5%噻霉酮乳油和75%百菌清可湿性粉对菌丝的抑制效果相对较差,EC_(50)较高,分别为886.52、759.468μg/mL。11种杀菌剂对梨树黑斑病菌菌丝生长均有抑制作用。     

项目教学法在动物微生物及免疫技术实践教学中的应用

根据高职高专院校教学特点,针对行业岗位需求,依据工作过程特点和职业性质特征,实现"教、学、做"一体化,笔者将项目教学法引入实践教学体系中,对实验项目的选择、过程实施、考核评价等进行了探索,取得了一定的效果,现总结如下。1项目教学法的导入项目教学法是将以教师为中心转变为以学生为中心,围绕项目组织展开教学,学生主动参与项目实施全过程的一种全新教学方法。在整个教学活动中,学生以小组的形式独立完成任务项目,教师主要起     

5个梨授粉品种与‘玉露香梨’授粉效应比较研究

为提高’玉露香梨’果实品质和脱萼率,筛选出适宜的授粉品种,选用’黄冠梨’、’雪青’、’翠玉’、’早酥’、’苹果梨’5个梨品种为授粉品种,以生长健壮、盛果期’玉露香梨’为母本进行人工授粉,测定不同授粉组合的坐果率、果实内外在品质等主要指标。结果表明,’黄冠梨’授粉坐果率最高,果形指数最小,果实偏斜度小,果形端正,果个大,可溶性固形物高,果实内外品质显著优于其他授粉品种。综合考虑认为,’黄冠梨’是景泰地区’玉露香梨’最适宜的授粉品种。     

禽大肠杆菌O2、O78菌株外膜蛋白A基因扩增及序列分析

根据Genbank中大肠杆菌K-12外膜蛋白A基因的核苷酸序列设计引物,从禽大肠杆菌O为O2、O78及它们的融合株O2．78(Chl^rNor^r)中分别扩增得到外膜蛋白A基因(ompA),进行序列测定及分析发现3个菌株的ompA均由2276nt组成,核苷酸序列完全相同,只有一个大的开放性阅读框(ORF),长1041bp,编码由346个氨基酸组成的前外膜蛋白A(pro-OmpA),前21个氨基酸残基组成信号肽,成熟的OmpA由325个氨基酸残基组成,相对分子质量为37000．其氨基酸序列也完全相同．从基因水平上证明了禽大肠杆菌O2和O78菌株存在相同的外膜蛋白A抗原。     

鸡IL-18对禽多杀性巴氏杆菌DNA疫苗的免疫佐剂作用

为了探索鸡IL-18在禽多杀性巴氏杆菌H基因DNA疫苗中的免疫佐剂作用，分别用共表达鸡IL-18基因和禽多杀性巴氏杆菌C48-1H基因的DNA疫苗、鸡IL-18真核表达质粒pcDNA3／cIL-18与禽多杀性巴氏杆菌C48-1H基因的DNA疫苗混合物、禽多杀性巴氏杆菌C48-1H基因的DNA疫苗肌肉注射5周龄鸡，首免后每周采取外周血及外周抗凝血，应用ELISA和MTT法分别检测免疫鸡的体液免疫及细胞免疫水平。二免后第2周用10 LD50禽多杀性巴氏杆菌强毒菌株C48-1进行攻击。结果鸡IL-18能够明显增强禽多杀性巴氏杆菌H基因DNA疫苗的免疫原性，显著提高免疫鸡的体液免疫和细胞免疫水平，并且鸡IL-18与禽多杀性巴氏杆菌H基因共表达时的免疫佐剂作用最强，能强有力地抵抗强毒菌株C48-1的致死性攻击。结果表明，鸡IL-18可作为DNA疫苗的一种理想的免疫佐剂。     

禽流感病毒NP cDNA反义逆转录病毒载体的构建及重组病毒的鉴定

根据反义ＲＮＡ作用原理,以禽流感病毒（ＡＩＶ）Ｈ１４Ｎ５　ｃＤＮＡ全长及５’端２３５个ｂｐ为目的基因,反向插入反转录病毒载体 ｐＬＸＳＮ中,命名为 ｐＬＸＳＮ－ＮＰ及 ｐＬＸＳＮ－ＮＰ,用脂质体包裹重组质粒转染包装细胞 ＰＡ３１７,Ｇ４１８筛选抗性克性,扩增单个克隆后提取包装细胞上清的病毒ＲＮＡ（ｖＲＮＡ）,以巢式ＰＣＲ方法检测,以及用包装细胞上清（重组病毒）感染滴定细胞系ＮＩＨ３Ｔ３,表明已筛选出产毒的的克隆细胞质,得到重组逆转录病毒,为反义ＲＮＡ抑制禽流感病毒复制的实验研究奠定了物质基础。     

中梨1号梨在甘肃景泰的引种表现及栽培技术要点

中梨1号梨引进后,经在景泰县条山集团林果公司多年栽培观察,表现果形正,外观美,肉质细嫩,品质上等,丰产稳产,抗病耐贮,适宜甘肃景泰县周边地区栽培发展.     

早熟梨新品种早玉的选育

早玉是以甘梨早6为母本、黄冠为父本杂交选育而成的早熟梨新品种。果实扁圆或圆形,果皮绿黄色,平均单果质量280.9 g;果面光洁,锈斑无或极少,果点小、隐疏;果肉乳白色,肉质细、酥脆,石细胞极少,汁液多,酸甜适口,有香味;果心小。可溶性固形物含量(w,后同)12.4%～14.3%,可溶性糖含量8.4 g·100 g^-1,可滴定酸含量0.162 g·100 g^-1,果肉维生素C含量4.0 mg·100 g^-1,品质优良。该品种树势中庸,萌芽率高,成枝力低,以短果枝结果为主,连续结果能力强。在甘肃张掖地区8月上旬成熟,货架期20 d,冷藏条件下可贮藏4个月。适宜在我国西北、华北、长江流域等梨产区推广种植。