β-1,3-1,4葡聚糖酶基因双拷贝工程菌株的构建与发酵研究

本试验旨在研究β-1,3-1,4葡聚糖酶双拷贝基因毕赤酵母工程菌株的构建及发酵。首先,通过对质粒pGAP-glu-opt进行PCR扩增获得密码子优化的β-1,3-1,4葡聚糖酶基因glu-opt,用EcoR I和Not I双酶切后与毕赤酵母表达载体pPIC9K连接,获得重组质粒p9K-glu-opt。该重组质粒经Sac I线性化后转化毕赤酵母GS115菌株,利用不含组氨酸的MDS平板和摇瓶培养,筛选重组菌株,命名为GS115/9K-glu-opt。制备GS115/9K-glu-opt感受态细胞,再用线性化的重组质粒pPIC-glu-opt二次转化,在含有抗生素Zeocin的YPDS平板上筛选glu-opt基因双拷贝重组菌株GS115/2xglu-opt。双拷贝重组菌在10 L发酵罐中进行高密度发酵培养及甲醇诱导表达,β-1,3-1,4葡聚糖酶最高酶活达到21 600 U/mL,约为单拷贝工程菌株X33/pPIC-glu-opt发酵活力的1.44倍;蛋白表达量达8.4 g/L,约为X33/pPIC-glu-opt的1.68倍。     

2012年中国奶业回顾与展望

<正>2012年我国奶业在平稳中发展,牛奶产量将达到3 870万t,比2011年增长1.5%;奶业贸易,尤其是苜蓿草和奶粉进口量比2011年有较大增长。奶牛规模化养殖进程加快,预计2012年我国存栏100头以上的奶牛场和小区的存栏量占总存栏量的比重将达到36%以上。2012年国际形势也复杂多变,美国大旱、欧洲债务危机的蔓延以及不确定的国际政治经济形势都将对2013年的全球经济继续产生影响。与此同时,我国也面临奶业转型期规模化牧场快速发展与散户大量退出市场竞争、牛肉价格提高、奶牛     

日粮大豆磷脂对奶牛生产性能和血液生化指标的影响

为研究日粮大豆磷脂水平对泌乳早期奶牛生产性能、消化代谢和血液生化指标的影响,本试验选取8头初产泌乳早期中国荷斯坦奶牛,随机分成4组,每组2头,采用4×4重复拉丁方试验设计进行研究。4种日粮处理中大豆磷脂的添加量分别为日粮干物质基础的0,1%,2%和3%。结果显示:大豆磷脂对奶牛干物质采食量无显著影响(P>0.05),但提高了饲料转化率,尤其是2%添加组饲料转化率显著提高(P<0.05);与对照组相比,2%大豆磷脂组奶牛的产奶量、4%标准乳、日产乳脂量和乳蛋白量显著提高(P<0.05);各组间乳成分和乳体细胞数无显著差异(P>0.05);3%大豆磷脂水平显著降低了酸性洗涤纤维的表观消化率(P<0.05),极显著提高了血清甘油三酯含量(P<0.01),但对粗蛋白、粗脂肪及中性洗涤纤维的表观消化率无显著影响(P>0.05)。结果表明:日粮大豆磷脂能够提高奶牛产奶量,提高奶牛的健康状况和免疫机能,经济效益显著。在奶牛日粮中最佳添加量为2%(干物质基础)。     

髓细胞瘤型J亚群禽白血病病毒四川株SCGS-1的分离鉴定及前病毒cDNA重组质粒的构建

为分析髓细胞瘤型J亚群禽白血病病毒(ALV-J)地方分离毒株的分子特征及开展该病毒的反向遗传操作研究,本试验从四川某肉种鸡场髓细胞瘤病变病鸡的组织中分离到1株髓细胞瘤型ALV-J,命名为SCGS-1.序列测定表明其前病毒cDNA全序列长7 499 bp,与其他ALV-J代表毒株序列相似性均为95％～99％.在所有基因中,其env基因和LTR序列与其他毒株相应序列同源性相对较低,env基因同源性为93.0％～99.5％,LTR基因同源性为92％～95％,pol基因同源性为97％～99％,gag基因同源性为94％～97％.根据该毒株序列和质粒pUC19的序列,将SCGS-1株前病毒cDNA全序列分3段克隆入pUC19中,构建含SCGS-1前病毒cDNA的重组载体并命名为pUC-SCGS.试验结果为研究ALV-J的进化规律和开展反向遗传操作打下基础.     

安化县兽医从业人员与动物诊疗机构现状调查

文章从安化县兽医从业人员的数量、技术水平与动物诊疗机构的形式、规模分类、内部管理模式等方面入手,系统分析了兽医从业人员与动物诊疗机构的现状,总结目前存在的问题,提出了自己的一些建议。     

鸡白痢的防治措施

鸡白痢是由鸡白痢沙门氏菌引起的各种年龄鸡均可发生的传染病,以急性败血性经过或慢性、隐性感染为特征。该病主要经卵传播,如种鸡场白痢净化不好,雏鸡在胚胎期即感染,出壳雏多衰弱并成为传染源散播病原。该病可通过消化道、呼吸道传播,死亡率可达30%以上,育成鸡和成鸡也可感染发病,严重影响生长发育,产蛋鸡产蛋率不高,死淘率升高,其危害贯穿整个养鸡周期,     

猪病混合感染的防治对策

当前,由于养猪生产中兽医防疫工作上的不足,环境消毒卫生不彻底,生物安全措施不到位等,造成环境中残存多种病原体,一旦猪群抵抗力降低,环境、气候发生变化、强毒力野毒(细菌)侵袭,进而出现从单一的病原体所致疾病转     

六堡茶产业市场形势分析报告

回顾分析2007年以来六堡茶产业的市场形势,对六堡茶产业后期市场发展做出研判,并提出相应的产业发展建议.     

日光温室早春茬水果黄瓜品种评价研究

[目的]筛选出适合烟台市及气候相似地区栽培的水果型黄瓜品种。[方法]对中农19号、夏之光(22-35)、戴多星、欧泽168、新星(NOVA)、伯金(BERGKAMP)6个水果型黄瓜进行品种比较试验。[结果]新星(NOVA)、夏之光(22-35)表现较为突出,不仅产量居前2位,而且抗病性强,果实商品性状也较好;戴多星、中农19号表现次之;欧泽168表现较差。[结论]新星(NOVA)、夏之光(22-35)水果型黄瓜品种适合在烟台市及气候相似地区进行大面积推广,戴多星、中农19号可作为搭配品种。     

草坪病害真菌拮抗放线菌的筛选及活性研究

[目的]筛选拮抗活性菌株和寻找新的活性代谢产物。[方法]以引起草坪真菌病害的3种病原真菌镰刀菌(Fusarium sp.)、丝核菌(Rhizoctonia sp.)、腐霉菌(Pythium sp.)为目标菌,通过琼脂块法初筛、管碟法复筛对采自云南香格里拉的茶园土壤进行了放线菌的分离筛选,并对其中活性较好的菌株进行了抗菌活性验证及活性物质的粗分离与检测。[结果]共分离得到85株放线菌,最终获得S-6、S-23、S-31 3株对病原真菌有较强作用的菌株,其中最高抑菌达61.90%。将3株拮抗放线菌液体发酵,并通过管碟法进一步验证抗菌活性;将发酵液乙酸乙酯萃取浓缩后,在萃取相中检测到活性成分。[结论]该研究结果为草坪病害防治提供了新资源。