泌乳量对奶牛繁殖性能、血浆代谢产物和生殖激素的影响

为了解黑龙江省集约化奶牛场泌乳量对泌乳奶牛生殖机能的影响,本试验选取年龄、胎次相近的健康泌乳奶牛30头,按泌乳量分为高(H)、中(M)、低(L)三组,每组10头,在产后30d、40d、50d、60d、70d、80d及发情时记录试验奶牛采食量、体况分、泌乳量和繁殖性能,检测其血浆GLU、NEFA、LH、FSH、E2、P4和PGF2α的水平,结果显示:1)随泌乳量增高,泌乳奶牛采食量增加,但体况分降低,首次发情时间延长,情期受胎率和年受胎率下降,配种指数和平均产犊间隔增加;2)随泌乳量增高,试验奶牛血浆E2、LH的水平增高,血浆Glu、FSH、P4>水平降低:3)发情时三组奶牛7项血浆参数的水平相近.这些结果提示:高泌乳量加重机体能量负平衡,抑制卵泡性周期活动,从而降低奶牛产后繁殖性能.     

患脂肪肝奶牛的代谢、内分泌和组织基因表达特征#br#

 【目的】旨在阐明患脂肪肝奶牛体内代谢、内分泌以及肝和脂肪中3个基因表达的变化。【方法】分别对10头患脂肪肝奶牛和10头健康奶牛进行血液指标和肝脂含量的检测,利用半定量RT-PCR检测奶牛肝PEPCK-C mRNA的丰度,应用实时荧光定量PCR检测脂肪Lp mRNA和HSL mRNA的丰度。【结果】①脂肪肝奶牛血糖浓度显著降低（P＜0.01）,血浆NEFA和BHBA的浓度显著升高（P＜0.01）,肝脂（约41.98%左右）和血清AST活性显著增加（P＜0.01）,血清γ-GT、TBI、CHE显著升高（P＜0.05）;②脂肪肝奶牛Ins浓度、Ins/Gn明显升高（P＜0.05）,肝PEPCK-C和脂肪HSL mRNA表达水平显著降低（P＜0.05）;③脂肪Lp mRNA表达水平和血浆Lp、NPY浓度显著下降（P＜0.05）。【结论】患脂肪肝奶牛存在严重的能量代谢障碍和明显的肝功障碍,体内Ins与Gn、Lp与NPY之间失调,肝PEPCK-C和脂肪HSL、Lp的基因表达减弱,是病牛能量代谢障碍发生的重要机制。     

三七红花酒对软组织损伤大鼠疗效观察

软组织损伤是指各种急性外伤或慢性劳损以及风寒湿邪侵袭等原因造成人体的皮肤、皮下浅深筋膜、肌肉、肌腱、腱鞘、韧带、关节囊、滑膜囊、椎间盘、周围神经血管等组织的病理损害，临床表现为疼痛、肿胀、畸形、功能障碍等^[1]。兽医临床上较少治疗此类疾病。赛犬和赛马的运动损伤是影响其经济价值的重要疾病。     

胰岛素、胰高血糖素对体外单层培养的肝细胞胰岛素样生长因子-ImRNA丰度的影响

以持家基因β肌动蛋白（pactin）作为内参照，通过竞争PCR法检测不同浓度的胰岛素和胰高血糖素对犊牛肝细胞中胰岛素样生长因子-ImRNA丰度的影响。结果表明，胰岛素和胰高血糖素都能直接调控胰岛素样生长因子-ImRNA的表达，胰岛素促进胰岛素样生长因子-ImRNA的表达，而胰高血糖素抑制胰岛素样生长因子-ImRNA的表达，存在量变关系。     

能量负平衡对泌乳早期奶牛生产性能、繁殖性能和机体代谢的影响

在某一集约化牛场,随机选取年龄、胎次、泌乳量相近的奶牛60头,分别在产后1、14、28、42、56d和70d时颈静脉采血,根据血糖浓度在6个时间点分为能量负平衡组和对照组,同时调查和分析奶牛日粮营养水平(能量、CP、CF、CFb、Ca、P)、生产性能(BW、MY、DMI)、繁殖性能(首次配种间隔、情期受胎率、发情率、配种指数)、血液生化指标(Glu、BHBA、NEFA)和内分泌指标(Ins、Gn、Lp、E2、P4)。结果表明:奶牛泌乳早期存在不同程度的能量负平衡(NEB),产后14d最高。NEB能使奶牛产后血浆E2、P4水平降低,产后DMI、BW和MY均减少。能量负平衡奶牛血浆Ins、Gn和Lp浓度降低,表现低血糖、高血浆NEFA和BHBA生化特性,首次配种间隔延长,情期受胎率和发情率降低,配种指数增高。这些结果提示,奶牛泌乳早期易发能量负平衡,不仅与日粮能量水平低、泌乳量高、干物质摄入少和体重损失有密切关系,而且与机体内分泌未完全协调发挥作用有关。并且能量负平衡会降低奶牛生产性能和繁殖性能。     

Ⅱ型奶牛酮病

笔者在某奶牛场营养代谢监测中发现一种以高血糖、高酮为特征的Ⅱ型酮病，报道如下。     

日粮能量水平对奶牛繁殖性能、血浆代谢产物和生殖激素的影响

为了解日粮能量水平对泌乳奶牛生殖机能的影响,选取年龄、体重、胎次、泌乳量相近的健康泌乳奶牛40头,按添加过瘤胃脂肪量分为高（H,400g/d/头）、中（M,300g/d/头）、低（L,200g/d/头）和对照组（不添加过瘤胃脂肪）四组,每组10头,试验期为产后30d至70d。产后30d、45d、60d、70d以及发情时记录试验奶牛采食量、体况分,记录繁殖性能,检测奶牛血浆GLU、BUN、ALB、TP、LH、FSH、E2、P4和PG浓度,结果显示：1）试验奶牛繁殖性能高低依次为H组、M组、L组和对照组。2）血浆GLU水平H组〉M组〉L组〉对照组;BUN水平L组〉M组〉H组;ALB和TP各组间无差异。3）血浆LH、FSH、E2水平随能量摄入增加而升高。这些结果提示：高能量摄入能缓解奶牛能量负平衡,促进卵泡正常性周期活动,从而提高奶牛繁殖性能。     

牛γ干扰素基因的表达及其多克隆抗体的制备

为了获得牛γ干扰素表达产物及其多克隆抗体,利用分子生物学软件分析GenBank公布的牛γ干扰素的氨基酸序列,针对这一基因序列设计了一对特异性引物,并从牛脾脏淋巴细胞提取基因组总RNA,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术扩增出IFN-γ基因,与pMD18-T载体连接后进行酶切、PCR扩增以及序列测定和分析,并将...     

应用内含子法构建PC基因mRNA竞争RT-PCR内参照

 运用PC基因mRNA与PC基因DNA相比缺少1个81bp内含子序列的基本原理,应用PCR技术和生物工程原理,通过1对引物,进行1次克隆,成功构建了PC基因mRNA的466bp竞争DNA模板重组质粒,PC基因mRNA与PC基因DNA可以互为内参照。为应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测糖代谢过程中PC基因mRNA水平奠定方法学基础。     

基于1H NMR技术的奶牛I型和II型酮病血浆代谢谱分析

【目的】运用代谢组学中¹H NMR技术方法筛选出Ⅰ型酮病、Ⅱ型酮病与健康对照组之间血浆差异性代谢物。【方法】选取产后7—28 d,平均胎次为2—3胎的实验奶牛50头。根据血糖（Glc）、β-羟丁酸（BHBA）和游离脂肪酸（NEFA）的含量与临床发病特点分为Ⅰ型酮病、Ⅱ型酮病与健康对照组,其中Ⅰ型酮病20头,Ⅱ型酮病为20头,健康对照组为10头。当患病牛血中BHBA＞1.20 mmol·L^-1,Glc＜2.50 mmol·L^-1,NEFA＞0.50 mmol·L^-1时,被认为患I型酮病;当患病牛血浆中BHBA＞1.20 mmol·L^-1,Glc＞2.80 mmol·L^-1, NEFA＞0.50 mmol·L^-1时,被认为患II型酮病;当奶牛血中BHBA＜1.00 mmol·L^-1,Glc＞3.75 mmol·L^-1,NEFA＜0.40 mmol·L^-1时,被认为健康对照组。运用代谢组学中¹H NMR技术对实验奶牛的血浆代谢物分析,获得相应的代谢图谱,并结合多元统计分析中的主成分分析（PCA）、正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）的模式判别,从而寻找潜在的生物标记物。【结果】通过¹H NMR分析,Ⅰ型酮病、Ⅱ型酮病与健康对照的代谢图谱差异明显,3组代谢产物各自聚集,分散区域显著。Ⅱ型酮病与健康对照比较,获得7种血浆差异代谢物,主要为丙氨酸、赖氨酸、β-羟丁酸、丙酮、乳酸等,其中血浆中β-羟丁酸、丙酮、乳酸浓度升高;丙氨酸、赖氨酸、酪氨酸、肌酸浓度呈现下降。Ⅰ型酮病与健康对照组比较,获得19种血浆差异代谢物,主要为酪氨酸、苯丙氨酸、肌酸、β-羟丁酸、丙酮等,其中β-羟丁酸、丙酮浓度升高;酪氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸、丙氨酸、肌酸、肌醇、β-葡萄糖、谷氨酰胺、谷氨酸、柠檬酸、α-葡萄糖、甲酸、甘氨酸、O-乙酰葡萄糖胺、磷酸胆碱浓度呈现下降。Ⅰ型酮病与Ⅱ型酮病比较,获得24种血浆差异代谢物,主要为柠檬酸、组氨酸、β-葡萄糖、异亮氨酸、极低密度脂蛋白/低密度脂蛋白等,其中β-羟丁酸、低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白、异亮氨酸、缬氨酸、丙酮、亮氨酸、乙酸浓度升高;柠檬酸、酪氨酸、组氨酸、肌醇、谷氨酰胺、β-葡萄糖、苯丙氨酸、谷氨酸、α-葡萄糖、赖氨酸、甲酸、甘氨酸、磷酸胆碱、丙氨酸、O-乙酰葡萄糖胺浓度呈现下降。【结论】¹H NMR技术与多元统计分析的有效结合能够有效的筛选出Ⅰ型酮病、Ⅱ型酮病与健康对照组之间血浆差异性代谢物,为进一步探究奶牛Ⅰ型酮病、Ⅱ型酮病的发病机理和诊断与防治提供了新的方向。