中国荷斯坦奶牛IL-18基因的克隆与真核表达研究

为了克隆并表达中国荷斯坦奶牛白介素18(interleukin,IL-18)基因,用牛白介素18基因特异性引物对刀豆蛋白(ConA)刺激后荷斯坦奶牛外周血单核细胞(PBMCb)总RNA进行RT-PCR扩增,并将扩增产物纯化后克隆入pMD18-T中进行核苷酸序列测定,将目的基因亚克隆到真核表达载体pGFP-C1中,构建了重组质粒pGFP-IL-18,转染BHK-21细胞,检测目的基因是否表达.结果:该基因全长582 bp,编码193个氨基酸,与羊、犬和猪IL-18基因相比,核苷酸序列有较高的同源性,但与小鼠和鸡IL-18基因相比有明显的种属差异,转染48 h后,可在转染细胞胞浆中检测到黄绿色的荧光,表明已成功克隆了中国荷斯坦奶牛IL-18基因,并实现了该基因在真核细胞中的表达.     

热处理及保鲜剂Amistai Dip对甜瓜的贮藏效果

采用不同热处理温度、热处理时间、保鲜剂浓度对甜瓜进行三因素三水平的正交设计试验,通过定期对处理后贮藏甜瓜硬度、失重率、可溶性固形物等指标的测定及统计分析来说明热处理及保鲜剂Amistai Dip对甜瓜贮藏的作用,并探讨其保鲜效果的优劣。用40℃、50℃、60℃热水对甜瓜分别进行2min、3min、4min浸渍,之后,喷施50mg/kg、100mg/kg、150mg/kg不同浓度的保鲜剂。实验结果表明:50℃处理3min,浓度为150mg/kg的AmistaiDip可明显改善甜瓜的品质,延长甜瓜的寿命,延缓其衰老。     

紫草素诱导乳腺癌细胞凋亡的研究

以MTT法测定紫草素对乳腺癌细胞株MCF-7等的生长抑制作用,并通过形态学分析、Hoechst荧光染色、流式细胞术及免疫印迹等观察紫草素诱导乳腺癌细胞凋亡的形态学、生化特征改变及凋亡的可能机制.结果表明:紫草素对乳腺癌细胞株有显著抑制生长作用,效应呈时间和剂量的依赖性,24h半数抑制浓度(IC50)均在10μmol·L-1以下.紫草素诱导MCF-7等乳腺癌细胞发生典型的细胞凋亡,细胞周期阻滞于S期,凋亡过程中产生了85ku大小的PARP裂解片段,此效应可被广谱caspase抑制剂抑制,表明紫草素可能经caspase途径诱导MCF-7细胞发生凋亡.     

复方中草药对镜鲤(Cyprinus carpio L.)血清转氨酶及红细胞抗氧化酶活性的影响

在基础日粮中添加2%由不同比例的刺五加、枸杞子、金银花和黄芪配伍的复方中草药饲喂镜鲤(Cyprinus carpio L).,于第14天、第28天及第42天检测红细胞的过氧化氢酶(CAT)、超氧化物岐化酶(SOD)、血清的谷草转氨酶(GOT)以及谷丙转氨酶(GPT)活性,以研究复方中草药对镜鲤的毒副作用。在28及42d时,复方Ⅰ组红细胞CAT活性与对照组差异显著(P0.05);28d时,各复方组红细胞SOD活性均与对照组差异极显著(P0.01);28d时,复方Ⅱ组血清GOT活性及复方Ⅲ组血清GPT活性与对照组差异极显著(P0.05);42d时,各复方组血清GPT活性与对照组差异极显著(P0.01)。结果表明,试验复方中药添加到镜鲤的饲料中,可以增强其血清转氨酶及红细胞抗氧化酶活性,其中复方Ⅰ效果最佳,建议用药时间为28d。     

毛蚶保活技术研究

[目的]探讨毛蚶的无水保活技术。[方法]以毛蚶为研究对象,设置不同温度组（-1.3～25℃）的贮藏条件,并使用海水浸透的纱布控制100%的湿度对各温度组进行湿度控制,同时进行充氧包装,研究温度、湿度和氧气对毛蚶成活率的影响。[结果]毛蚶的结冰点为-1.6℃左右,生态冰温区域在-1.6～0℃。随着温度的升高,毛蚶成活率逐渐降低。成活率最高的为冰温保藏（-1.3～0℃）,在第6天时存活率仍为100%。控制湿度组成活率总体优于不控制湿度组,充氧包装可以提高毛蚶的成活率。[结论]温度是毛蚶保活的基本条件,在一定温度范围内,温度和毛蚶成活率呈负相关性;控制湿度和氧气供应对毛蚶的保活效果具有正面影响。     

一株产乙醇嗜热厌氧油藏微生物Thermoanaerobacter sp DF3的性质研究

[目的]了解油藏微生物Thermoanoerobacter sp DF3的生理生化特性,优化木糖产乙醇培养方案。[方法]利用厌氧分离技术从大港油田油层采出液中分离到一株产乙醇厌氧杆菌DF3。采用生理生化鉴定与16SrDNA序列的系统发育学分析其系统发育地位。用气相色谱分析其代谢产物。[结果]菌株DF3是一株严格厌氧的嗜热细菌,呈直杆状,G^-,菌体大小为O．42μm×（1．60～5．20）μm,单生、成对或成串生长,产顶端芽孢;生长温度为45～78℃（最适65℃）,能利用葡萄糖、木糖、果糖、核糖、甘露糖、阿拉伯糖、蔗糖、半乳糖、乳糖、纤维二糖、松三糖、棉子糖、淀粉等作为底物;其16SrRNA与zpseudoethanolicus相似性为99．7％。发酵葡萄糖与木糖的主要产物为乙醇,培养方案优化后其代谢木糖产乙醇终浓度为2．og／L。[结论]通过试验证明菌株DF3是目前已知菌株中产乙醇活性较强的茵株之一,在65℃时代谢木糖能产生2．Og／L的乙醇。目前代谢木糖高产乙醇的茵株均由国外分离获得,菌株DF3的分离获得为我国研究木质纤维素产乙醇提供了优良的出发菌株。     

利用HPLC法测定不同产地土鳖虫中尿囊素的含量

[目的]建立土鳖虫中尿囊素含量的测定方法,考察不同产地土鳖虫中尿囊素的含量,为土鳖虫药材质量标准的制订提供依据。[方法]采用HPLC法对土鳖虫的尿囊素进行定量分析,色谱柱为Agilent ODS-C18（4.0 mm×250.0 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%醋酸,梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,检测波长为360 nm。[结果]各产地土鳖虫中尿囊素含量差异较大,其中以＂致信药材＂土的鳖虫尿囊素含量最高。尿囊素在0.2~2.0μg范围内线性关系良好（r=0.999 9）,平均回收率为97.42%（RSD=4.5%,n=5）。[结论]所建立的方法准确可靠,重复性好,可用于土鳖虫药材的质量控制。     

杂色蛤在微冻保鲜过程中菌落总数的变化

[目的]研究不同保鲜方法处理后的微冻保鲜过程中杂色蛤的菌落总数变化,以探寻最佳的保鲜方法。[方法]以杂色蛤为研究对象,在-3℃微冻条件下采用生物保鲜剂、涂膜保鲜、气调保鲜等不同保鲜方法处理并进行比较。[结果]采用C、E、G组方法处理保鲜的杂色蛤,其菌落总数上升较少,保鲜效果较佳。[结论]复合生物保鲜剂、气调保鲜、涂膜保鲜法均具有抑菌作用,气调保鲜结合生物保鲜剂法、涂膜结合生物保鲜剂的法比单独使用生物保鲜剂的抑菌效果好。     

茉莉酸甲酯对采后赛买提杏冷藏品质的影响

以新疆赛买提杏为试材,研究茉莉酸甲酯对采后赛买提杏冷藏品质的影响.将赛买提杏置于密闭气调箱内用不同浓度茉莉酸甲酯熏蒸处理绿熟期赛买提杏,处理浓度分别为0（CK）,1×10^-4,1×10^-5,1×10^-6 mol/L,处理时间均为24 h,之后放置在（0士0.5）℃条件下贮藏30 d.结果表明,茉莉酸甲酯处理可抑制绿熟期杏果腐烂率的发生,降低呼吸速率,保持较高的维生素C及可溶性固形物含量,有效降低绿熟期杏果实细胞膜透性,浓度1×10^-4 mol/L茉莉酸甲酯处理可以较好保持绿熟期赛买提杏的贮藏品质.     

遮光处理对天女木兰幼苗光合特性的影响

在生长季节,对天女木兰幼苗采取四个遮光率处理（A（CK）：0;B：30％;C：60％;D：90％）,采用Lcpro＋便携式光合测定仪测定天女木兰幼苗的净光合速率日变化,同时测定叶片叶绿素含量,结果表明：天女木兰净光合速率日变化规律在不同的遮光处理下均呈现双峰型曲线,有明显的光合“午休”现象,净光合速率日最大值为B＞A＞C＞D;在四种遮光处理中,叶绿素含量为D＞C＞B＞A.综合得出：苗期采取30％遮光处理是最适宜的遮光率,适度遮光可促进幼苗生长.本研究为天女木兰在吉林地区的育苗、绿化应用提供了技术支撑.