金黄色葡萄球菌烈性噬菌体的分离鉴定和最佳保存方法研究

基于细菌rRNA区域序列的PCR技术,通过设计特异性引物从奶样中快速、准确地鉴定奶牛乳房炎主要致病菌金黄色葡萄球菌。采用金黄色葡萄球菌与挤奶前从奶牛乳房上洗刷下来的污水经过3次富集的方法,通过双层琼脂平板法,分离纯化得到了强裂解性的奶牛乳房炎主要致病菌金黄色葡萄球菌的噬菌体。本试验分离的是可收缩尾的噬菌体,其头部为二十面体,约50 nm×62.5 nm,尾部长约187.5 nm,尾宽约37.5 nm,有尾鞘、基板等结构。纯化后在双层琼脂平板上形成的噬菌斑大而整齐,边缘光滑,透明,直径约2 mm,具有明显的强裂解性噬菌体特性,通过测定,该噬菌体的最佳感染复数为0.01,效价大于10⁹ PFU/mL。对噬菌体的不同保存方法进行比较,结果表明,将噬菌体置于-80 ℃加入7% DMSO冷藏是较好的保存方法。     

微生物菌剂对潮土区金丝小枣枣园减施氮肥的效应研究

以微生物菌剂为试材,采用田间小区试验的方法,研究了微生物菌剂对土壤-金丝小枣-肥料系统中各指标的影响变化情况,以期为该地区金丝小枣科学减施氮肥提供参考依据。结果表明:在施用微生物菌剂的前提下,氮肥施用量降至常规施氮量的80%(480kg·hm^-2)时,土壤的供氮能力最强,脲酶活性达到422mg·kg^-1,土壤碱解氮含量为90mg·kg^-1,产量为9 153.00kg·hm-2,增产率达到了17.71%;氮肥的偏生产能力较高,比对照(CK)增加了6.11kg·kg^-1;金丝小枣的品质较好,单果质量为5.655g,可溶性总糖含量达24.43%,维生素C和可滴定酸含量差异不显著;枣浆烂病和裂果病发病率也较低,比对照(CK)分别下降了16.82、6.89个百分点。     

鲤春病毒(SVCV)糖蛋白基因的原核表达

通过将鲤春病毒血症病毒(Spring Viremia of Carp Virus,SVCV)糖蛋白(Glycoprotein,G)基因截短后构建重组表达载体,实现体外高效表达G蛋白,为有关原核诱导蛋白提供参考。以质粒pEGFP-G为模板设计引物,分别扩增G基因的不同片段,与密码子优化后的G基因分别插入pET-32a表达载体,构建重组表达载体pET-32a-GX和pET-32a-OG。经过鉴定后,将重组质粒分别转入大肠杆菌BL21(DE3),通过适宜条件的诱导表达,获得诱导产物并进行SDS-PAGE和Western blotting检测。构建了重组表达载体pET-32a-GX与含密码子优化后G基因的重组表达载体pET-32a-OG;经适宜条件诱导表达了G蛋白后的SDS-PAGE和Western Blotting检测,表明G蛋白成功表达,且含截短片段的重组载体pET-32a-G2的蛋白表达量最高,与原G序列有相同的免疫原性。成功构建截短后的原核表达载体pET-32aGX与密码子优化后的重组表达载体pET-32a-GX,并实现体外大量诱导SVCV的G蛋白。     

高温对拉美斑潜蝇蛹发育的影响

拉美斑潜蝇（Ｌｉｒｉｏｍｙｚａｈｕｉｄｏｂｒｅｎｓｉｓ）是近年来传入我省的一种为害蔬菜、花卉的检疫性害虫。由于其寄主广、食性杂、繁殖快、田间种群数量大,常造成严重为害。为了有效地控制其为害,我们于室内进行了该虫生物生态学特性观察。测定其蛹发育起点温度...     

影响枣树节水灌溉新技术应用范围的因素分析

本文对沧州市黄骅、献县、沧县等8个县市区300农户及枣园企业是否已经应用节水灌溉技术及应用意向进行了调查,调查结果显示目前节水灌溉技术应用率比较低。分析原因主要与农民文化水平、对新事物的接受能力、宣传力度、经营规模、灌溉费用、示范程度等密切相关。     

核桃胚培养条件研究

以香玲核桃胚为试材,研究了不同基本培养基、蔗糖和琼脂浓度对离体胚萌发、生根和成苗的影响,筛选最佳培养条件.结果表明:最适宜的基本培养基为MS+3％蔗糖+(0.6～0.8)％,种胚培养4周后即可成苗,选生长健壮的生根苗(不需要炼苗)移栽到经高压灭菌的蛭石中,成活率可达91％以上.     

象甲虫生真菌对剪枝栎实象幼虫的毒力作用

用从病变象甲幼虫上分离得到的14种真菌,对剪枝栎实象幼虫作毒力试验,并筛选出2株有较强致病性的菌株进行浓度梯度测试。结果表明：6号被孢霉科被孢霉属菌和7号丛梗孢科青霉属菌具有较强的致病力,致死中时分别为2203d和2941d,致死中浓度分别为303×105、284×105个/mL。     

低温纤维素降解菌假裸囊菌SDF-LT的分离、鉴定及其对玉米秸秆降解特性的研究

为筛选低温高效纤维素降解真菌,从河北省石家庄、邢台、唐山等地区的小麦-玉米轮作农田采集土壤39份作为分离样品。在10℃条件下,采用纤维素钠-刚果红培养基测定菌株透明圈大小;测定滤纸酶活性进行酶活性比较,最终筛选得到1株低温高效纤维素降解真菌SDF-LT,根据菌株形态学和ITS序列分析鉴定为假裸囊菌(Pseudogymnoascus)。采用自然低温条件下沙袋法测定菌株SDF-LT的秸秆降解能力,发现接种该菌株的玉米秸秆降解率在80 d时为42.67%,显著高于市售秸秆降解菌剂和空白对照。80 d时SDF-LT处理的玉米秸秆中纤维素、半纤维素和木质素含量最少,分别为26.79%、28.52%、4.41%,显著低于常温秸秆降解菌剂和空白对照;采用扫描电镜观察秸秆的纤维结构发现,SDF-LT处理的秸秆纤维束结构断裂,纤维结构高度破坏。筛得的菌株SDF-LT为玉米秸秆的降解提供了菌种资源。     

泽兰实蝇生物学特性的初步研究

野外观察和室内试验表明:紫茎泽兰的专食性天敌泽兰实蝇,在昆明地区周年可完成4～5个世代,卵、幼虫、蛹和成虫历期分别为3～5、25～30、20～25和7～11天。由于泽兰实蝇的寄生,使紫茎泽兰的生长繁殖显著受到抑制,开花数减少40～80％,种子萌发率减少25～30％。     

泽兰实蝇人工繁殖技术

泽兰实蝇(Procecidochares utilis)是恶性杂草紫茎泽兰(Eupatorium adenophorum)的一种重要天敌,于1984年8月从西藏引至昆明。对杂草天敌国外多采用引种释放试验证明后直接释放,一般不进行室内大量人工繁殖。由于泽兰实蝇只产卵于紫茎泽兰茎顶端一对未展开的心叶之间,在植物开花期,适于产卵的枝条甚少,常导致田间泽兰实蝇种群数量下降;同时也为大量繁殖泽兰实蝇带来困难。泽兰实蝇寄主专一性试验表明,泽兰实蝇只能在紫茎泽兰上寄生。这样,在2～5月份紫茎泽兰盛花期必需有足够数量的寄主植物才能保证繁虫工作的正常进行。为解决这些问题,开展了有关试验研究,初步结果整理于后。