一种提取荒漠拟步甲昆虫基因组DNA的新方法

昆虫基因组DNA的提取是研究昆虫功能基因的关键环节。一些荒漠昆虫个体较小,不易除去的外壳会造成多糖污染,用普通动物组织DNA提取方法效果不佳。通过紫外分光光度测定、凝胶电泳检测、PCR反应及限制性酶切分析表明,CTAB-NaCl法是一种适用于拟步甲科小个体昆虫提取基因组DNA的好方法,蛋白质、多糖及RNA影响很低,完全能够满足后续DNA研究的需求。与传统方法相比简便快速,且成本低,尤其适用于拟步甲科昆虫DNA的分离。     

新疆甘蓝型油菜下胚轴的组织培养和植株再生研究

以新疆甘蓝型油菜(Brassica napus L.)1khp11品系下胚轴为外植体,不同浓度6-BA与NAA激素组合的分化培养基诱导芽苗的分化,研究发现下胚轴在不同激素及浓度的6-BA与NAA组合中再生频率、分化率存在显著差异.通过种子实生无菌苗苗龄、诱导分化,4-D的预培养、添加AgNO3等因素的系统分析:五日无菌种子实生苗的下胚轴通过3d短时间的预培养,在最适分化培养基MS0+3.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+3.5mg/LAgNO3中,再生频率和分化率分别为35;和122.5;,初步建立了甘蓝型油菜1khp11品系下胚轴的高频率再生植株体系,为开展优良性状甘蓝型油菜的生物技术育种工作提供了条件保证.     

新疆濒危植物盐桦试管苗生根培养的研究

采用L27(313)正交试验方法探讨了培养基种类A、植物生长调节剂及其不同浓度配比B、蔗糖量C、培养的光照条件D四因素对诱导盐桦生根(平均根长、生根系数、生根率)的影响.结果表明,生长素B、生长素×培养基(A×B)对生根系数有极显著的影响,培养基A、生长素B、生长素×培养基(A×B)仅对平均根长有极显著的影响,四个因子对生根率均无显著的影响.研究获得诱导盐桦平均根长的优化培养基为A2B1C3D1(即S27处理)MS+NAA 0.2 mg/L+蔗糖10 g/L+琼脂7;,诱导盐桦生根系数优化培养基为A3B2C3D2 (与处理S21的A3B2C3D3相似)1/2MS+IBA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7;+暗光处理3 d,诱导盐桦生根率的优化培养基为A2B3C1D1(即S10处理) MS+IAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7;.最佳生根培养基为:1/2MS+IBA 0.5mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7;+暗光处理3 d.其生根系数高达5.308,生根率高达96.30;以上.     

猪多杀性巴氏杆菌对HeLa细胞附着能力的研究

本研究通过猪肺疫的活菌疫苗和死菌疫苗多杀性巴氏杆菌菌株(Pasteurella multocida,Pm)对小鼠的毒力试验测定它们的毒力性。结果表明,死菌疫苗Pm的毒力性比活菌疫苗Pm的强,即死亡率分别为10 0 %和0 %。通过两菌株对He L a细胞的附着试验测定它们的附着能力,结果证明强毒菌的附着能力明显地比弱毒菌强(P<0 .0 1) ,平均附着数分别为11.96和2 .4 4 ;从上述菌株细胞荚膜中分别提取荚膜蛋白,用SDS- PAGE分离测定两菌株荚膜蛋白质结构,结果表明39k Da荚膜蛋白是强毒菌的特异性蛋白。以上研究结果证明Pm的毒力与He L a细胞的附着能力是密切相关的,同时暗示本菌39k Da荚膜蛋白可能与它们的毒力和He L a细胞的附着能力有关     

干旱胁迫下胡杨生理适应机制的研究

胡杨具有很强的抗旱能力,是生长在沙漠地区少有的乔木树种,在我国主要分布于新疆的塔克拉玛干沙漠.为了更深入阐明胡杨的抗旱机制,我们对生长在新疆塔克拉玛干沙漠的天然胡杨林进行了实地调查、现场采样和室内相关实验.结果表明,在干旱胁迫下,胡杨叶片的蒸腾作用减少,气孔阻力增加.严重干旱胁迫后,叶片中的K+和Ca2+含量增加,分别为对照的1·43倍和2·99倍,而Mg2+和Na+变化不明显.和对照相比,中度干旱胁迫下胡杨叶片质膜H+--ATPase的质子转运活性没有差别,但严重干旱胁迫则使其活性降低,质膜H+--ATPase转运质子的能力下降.以上结果表明,胡杨可通过增加气孔阻力来降低胡杨叶片的蒸腾作用,选择性的吸收无机离子以及降低ATP消耗来适应干旱环境的胁迫.     

猪瘟病毒E2基因真核表达载体表达效率和免疫效果的比较

比较猪瘟病毒E2基因的真核表达质粒proVAX-E2n和pVP22-E2n体外表达效率以及体内的免疫效果,以从中选出高效的猪瘟病毒核酸疫苗.将上述表达载体转染Hela细胞进行体外表达后,用RT-PCR和间接ELISA法检测Hela细胞体内和体外表达产物;免疫6～8周龄昆明白小鼠, 用间接ELISA法和MTS法检测小鼠血清中CSFV特异性IgG抗体水平以及脾脏中淋巴细胞增殖功能.结果表明2种E2重组质粒均能在Hela细胞中正确表达,且proVAX-E2n的E2蛋白表达量（OD值为0.575 4）明显高于pVP22-E2n（OD值为0.306 05）（P〈0.05）;proVAX-E2n刺激机体产生的抗体水平（最高抗体滴度为1：2 200）显著高于pVP22-E2n免疫组（最高抗体滴度1：1 600）;淋巴细胞增殖结果显示proVAX-E2n（刺激指数4.073）与pVP22-E2n（刺激指数2.205）相比,能诱发小鼠产生更强的CSFV的特异性淋巴细胞增殖反应.本研究表明proVAX真核表达载体对E2基因体外表达效率和小鼠免疫效果均高于pVP22真核表达载体.     

半无菌表面灭菌获得葡萄单芽茎段无菌材料的方法

介绍了对当年生葡萄嫩枝利用半无菌灭菌方法结合75%酒精处理3-5s,无菌水洗一次,0.1%升汞3min,进行表面灭菌,无菌处理效果好,污染率低,且单芽萌发情况好。     

棉花茉莉酸羧基甲基转移酶基因克隆及其表达分析

根据亚洲棉石系亚1号的转录组测序结果,克隆获得陆地棉品种"新陆早17号"的茉莉酸羧基甲基转移酶(jasmonic acid carboxyl methyltransferase,JMT)全长cDNA,命名为GhJMT(GenBank登录号KJ856913)。序列分析表明,GhJMT基因开放阅读框为1 116bp,编码371个氨基酸。保守结构域分析显示,该基因编码的蛋白具有甲基转移酶-7保守结构域。系统进化树分析显示,GhJMT与可可的茉莉酸甲基转移酶在同一分支,可能定位于细胞质,为不稳定亲水性蛋白。实时荧光定量PCR分析表明,2.5%PEG6000胁迫处理12h时,根中GhJMT基因的表达迅速上调并达到最大值,约为对照的2.6倍,在茎中GhJMT的表达量在9h达到最高,约为对照的2.3倍,而在叶中GhJMT表达量在3h达到最高,约为对照组的2.1倍,说明GhJMT基因表达受干旱胁迫的诱导。研究结果有助于阐明GhJMT基因表达与植物抗旱的相关性。     

24-表油菜素内酯对PEG与盐胁迫下棉花种子萌发的影响

盐和干旱胁迫直接影响植物种子的萌发和幼苗的生长,油菜素内酯具有调控植物耐受盐和干旱胁迫的作用。采用24-表油菜素内酯(24-EBR)浸种处理新疆主栽陆地棉品种‘新陆早17号’,探讨在干旱和盐等渗胁迫下其对棉花种子萌发的影响。结果表明,0.25mg·L-1 24-EBR浸种能够促进等渗盐胁迫下‘新陆早17号’种子发芽率和发芽指数的提高,分别提高32%和11%,与等渗干旱胁迫(33%、11%)的效应相当;而促进等渗盐胁迫‘新陆早17号’种子发芽势(34%)及活力指数(246%)提高的程度高于等渗干旱胁迫下的(20%、162%)。可见,24-EBR能够促进等渗干旱和盐胁迫‘新陆早17号’种子的萌发,并且在等渗盐胁迫下种子萌发的发芽势和活力指数效果好于等渗的干旱胁迫,这将有助于提高干旱盐碱地棉花种子的萌发率。