O型、A型及Asia1型3个型口蹄疫病毒通用套式RT-PCR检测方法的建立

为了建立针对流行于我国及周边国家主要口蹄疫病毒(FMDV)血清型的检测方法,本实验设计2对特异性引物,通过对反应条件的优化,建立了能够同时扩增O型、A型及Asia1型FMDV VP1全基因的套式RT-PCR (RT-nPCR)方法.该方法能特异性检测O型、A型和Asia1型FMDV,对其它相关动物病毒的检测结果均为阴性;比FMDV多重RT-PCR商品试剂盒敏感约1 000倍.利用该方法对10份FMDV样品进行扩增检测,结合扩增产物的克隆测序技术,对所检样品进行了准确定型.实验结果表明,该方法通用型强,可用于3个血清型FMDV的检测和分子流行病学调查.     

2007-2010年江苏地区猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-PCR检测及部分Nsp2基因序列分析

本研究参考GenBank已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）Nsp2基因序列,在高致病性病毒Nsp2基因缺失区的两端保守区设计并合成了一对引物,建立并优化了能够区分经典PRRSV和高致病性PRRSV的RT-PCR诊断方法,并利用该方法对2007～2010年间江苏地区的45份可疑临床病料进行了检测。结果表明临床病料阳性率为40％,所有毒株均属于高致病性毒株。对PRRSV阳性病毒的Nsp2基因序列分析表明,所有18株PRRSV均属于美洲型毒株,与中国高致病性PRRSV代表毒株JXA1、WUH1的氨基酸同源性分别在82．2％～97．6％、80．4％～95.3％。此外,18株病毒的Nsp2共同存在不连续的30个氨基酸缺失,缺失位置与同期中国高致病性PRRSV具有相同的特征。通过本研究掌握了江苏地区2007～2010年间PRRSV流行情况及Nsp2基因变异特征,为地方猪繁殖与呼吸综合征的临床诊断和防治提供参考依据。     

仔兔金黄色葡萄球菌病病原分离与鉴定

葡萄球菌病是兔的一种常见病,是由金黄色葡萄球菌引起的养兔业常见的一种传染病,可引起各年龄段的兔群发病,在临床上主要表现为各种器官的化脓性炎症及败血症、脓毒败血症等。因其病原侵害部位及扩散情况的不同,可表现出不同的临床症状。2007年2月3日,笔者接诊湟源县东峡乡某部队养殖场4只发病仔兔。其临床表现为：发病初期,仔兔突然精神不振,食欲减少,脚不敢着地,活动减少,脚底皮肤肿胀、发热,几天后肿胀皮肤破溃、流血,有的仔兔脚底皮肤肿胀、脱毛,有的有脓包,体温正常。通过病原的分离培养与鉴定,综合流行病学、临床症状确诊为仔兔金黄色葡萄球菌病,现将结果报告如下。     

H3亚型猪流感病毒分离与鉴定

从东莞和鹤山等地不同猪场采集的40份鼻拭子或病死猪的肺、气管病料中分离到4株有血凝活性的病毒,其中3株病毒与新城疫病毒阳性血清的HI试验为阳性,另外1株病毒与抗猪流感H3亚型猪流感病毒阳性血清的HI试验为阳性;根据猪流感病毒M基因设计引物,扩增出预期的约315 bp片段,表明该病毒为H3亚型猪流感病毒。     

近年世界各国和地区禽肉生产量

单位:千吨地区和国家1972/76 平均197719781979ICSO1981’琴1981变化/77(多)北美:加拿大墨西哥美国4弓1306461353J84吕88合计旦gJ751呈旦呈349匕,8306,752 539 4046,弓077,450524436旦卫611 弓22 4弓30,9077,892+13+31+2与+24南美:根廷 西 鲁内瑞拉263459 匀31321946981201941818石8 881889481,20631石 1931,096 86 1911,石66 2宝01,370 1 14 1991,893 2201,630 123 2072,180{十13}十134!+兰}+7十81阿巴秘委一合欧洲:121 91807277 398433艺3667 84124]039D2323 44864341763 99113 980633乙0 44896347783107小计3,2石23,5633 .701 121 100…     

猪弓形体病的血清学调查

采用间接血凝试验(IHA)对广东省部分地区猪场送检的269份血清进行猪弓形体病的血清学检测,结果表明有61份血清阳性,平均阳性率为22.7%,最高阳性率为71.4%,该地区猪场有猪弓形体病感染。     

规模猪场防疫中存在的问题及对策

从生产实际出发,将规模猪场防疫中存在的问题进行了分析,并提出了相应的措施。     

肾型传染性支气管炎的诊断

<正> 仪征化纤养殖场种鸡场饲养的25周龄艾维茵父母代肉鸡2446只和55周龄艾维茵父母代肉鸡3019只,在92年2月中旬后大约40天的时间内,两批鸡几乎同时发生了以排白色稀粪,伴有轻度呼吸道症状,产蛋率较大幅度下降,沙壳蛋、软壳蛋和畸形蛋明显增多的疾病。病死鸡剖检以肾肿大呈花斑状为典     

猪传染性胃肠炎病毒检测基因芯片的构建

采用PCR扩增制备TGEV的靶基因并进行纯化,对基因芯片的最佳靶基因点样质量浓度、探针质量浓度、杂交温度、杂交时间进行筛选,选择构建检测芯片的最适靶基因,进行基因芯片探针最佳标记方法试验.结果表明,质粒PCR扩增和采用异丙醇沉淀纯化的靶基因质量好,基因芯片最佳靶基因点样质量浓度为200mg/L,最佳探针质量浓度为3 000 μg/L,预杂交时间为1 h,杂交时间为3～6 h,杂交温度为48℃,以S、S3、sM、M、N、ORF7、POL等7个靶基因为构建TGEV检测芯片的最适靶基因,确定了多重PCR扩增标记TGEV探钟的最佳体系,Cy3-dCTP标记浓度为2.5 μmol/L,构建的TGEV检测芯片与标记的混合探针杂交效果好.