多杀性巴氏杆菌中recN基因的克隆、原核表达及生物信息学分析

试验旨在对多杀性巴氏杆菌recN基因进行克隆和原核表达,并对其表达蛋白进行生物信息学分析。参照GenBank中recN基因序列（登录号：CP003313.1）设计1对引物,通过PCR扩增获得目的基因片段,构建pET-28a（+）-recN重组质粒并转化E.coliDH5α感受态细胞,提取质粒进行酶切鉴定,将鉴定正确的重组质粒转化E.coliBL21（DE3）感受态细胞,经IPTG诱导表达,对融合蛋白进行SDS-PAGE及Western blotting鉴定。结果表明,试验成功克隆了大小约为1 677 bp的recN基因序列,通过诱导表达的His-Tag融合蛋白大小约为66.94 ku,主要以包涵体形式存在。经生物信息学分析,recN蛋白的分子式为C₂₇₃₅H₄₄₂₈N₇₈₆O₈₅₅S₁₆,消光系数为24 785,不稳定系数为43.99,属于不稳定蛋白;理论等电点（pI）为5.62,为酸性蛋白;总平均亲水性为-0.316,与试验表达的包涵体蛋白性质相同,即同为疏水性蛋白;recN蛋白在哺乳动物网织红细胞的半衰期为30 h,在酵母（体内）中的半衰期>20 h,在大肠杆菌（体内）中的半衰期>10 h;二级结构主要以α-螺旋（64.87%）及无规则卷曲（21.00%）为主;经疏水性分析,预测该蛋白有3个高疏水性区域和9个高亲水性区域。本试验结果为进一步探究多杀性巴氏杆菌recN基因的功能提供了参考依据。     

饲用复合酶在肉猪生产中的应用试验

酶制剂的应用始于70年代,但最近几年才广泛在畜牧业生产中应用。饲用复合酶含有纤维素酶,半纤维素酶、果胶酶、蛋白酶、淀粉酶、糖化酶等,更具有酶系全、酶活高、稳定性好、用量少等特点。应用于各种畜禽饲料中,对畜禽具有补充内源性消化酶不足、消除饲料中抗营养因子的不良影响、加强体内新陈代谢和消除肌体炎症及促进生长的功能,能     

鸵鸟应激的原因及防治

鸵鸟生长期增重快,性情活泼好动,好奇性强,对外界环境中的异物、异色、异形物体、异种动物等非常敏感,受刺激后最易发生应激。常引起鸵鸟精神不振、惊恐不安、食欲减退,应激严重的鸵鸟,尿液浓稠而继发尿酸中毒,脱水,败血症而死亡。发生原因饲养环境、场地、人员、噪音、天气、温度等突然改变及其它动物（狗）突然窜入,使鸵鸟受惊吓而引发应激。饲养密度大,舍内栅栏粗糙,铁丝、铁钉划伤,受惊引起奔跑而引发应激。注射疫苗、治疗疾病等捕捉而引发应激。饲料的突变,水质不良以及长途运输等均能引发鸵鸟应激。防治加强饲养管理,维…     

一畜一禽总关情──记吉林省农安县畜牧局长高士泉

一畜一禽总关情──记吉林省农安县畜牧局长高士泉本刊记者王乃迪，尹福田早就听说高局长工作挺“火”，很想了解个大概，可第一次到局里找他就碰上了锁——他到万顺乡抓“分田到户”试点去了。一位畜牧局长怎么干这个？５０天后，第二次访他，他不在，说是一上班就被召去...     

寒地中棚草莓早熟栽培技术研究

在新疆石河子地区保护地栽培草莓,2月下旬扣棚,3—5月旬均气温为17.8℃,最低12.5℃,旬平均相对湿度87.7%,最低72.3%;10cm土壤旬平均温度为14.7℃,最低1.67℃.此条件能够满足草莓生育需要,生长健壮,坐果率高,与露地栽培相比,因都卡单果重和产量分别增加2.1g,64.1%,苏维尼尔为4.7g,51.9%;但光照强度下降,果实糖、酸含量有所降低.     

杂交水稻新组合比较试验简报

为适应当前市场经济发展的新形势 ,促进杂交水稻生产由单纯产量型向高产、优质、高效型转变 ,加速扩大“高、优、抗”兼备新品种的示范和推广 ,引进 14个增产潜力较大 ,米质较优 ,抗性较强的中迟熟杂交稻新组合开展协作试验 ,探讨其适应性、抗逆性、丰产性 ,以期为各地筛选更换发展优质、高产、适宜对路品种提供科学依据。1　材料与方法1.1　参试杂交稻新组合参试组合共 15个 :协优 413(中国水稻所选育 ) ;Ⅱ优15 39、45Ａ/10、Ｋ17/10 (重庆市农科所选育 ) ;马协 5 8、鄂粳杂1号、Ｎ5 0 88Ｓ/4 16 78(湖北省种子集团选育 ) ;Ⅱ优 16 2、Ｄ…     

肉桂酸终止低醇葡萄酒酒精发酵的工艺优化

以天津汉沽“玫瑰香”葡萄为原料酿造低醇葡萄酒,以添加SO2终止发酵为对照,以酒精度、酵母菌致死率和稳定性等重要理化指标及感官评价为检测依据,比较了单纯添加不同浓度的肉桂酸（100、150、200、250 mg/L）,以及肉桂酸（50、75、100、125 mg/L）协同SO2（60 mg/L）共同终止酒精发酵对酿造低醇葡萄酒品质的影响,并采用高效液相色谱法检测了最终成品酒中肉桂酸的含量。结果表明：单纯添加肉桂酸组和肉桂酸协同SO2组均优于对照组（单纯SO2 组）,其中单纯添加250 mg/L肉桂酸终止发酵能获得品质最高且稳定性最好的低醇葡萄酒,其酒精度为6.32%(V/V),酵母菌致死率达98.58%。所酿低醇玫瑰香葡萄酒呈浅玫瑰红色,澄清透明,果香、酒香平衡,酸甜适中,无酵母味,具有一定的玫瑰香的品种香。该低醇葡萄酒中肉桂酸检测含量为62 mg/L。     

不同PEG-6000浓度处理下几种冷季型草坪草抗旱性比较研究

研究了3种冷季型草坪草的6个品种在PEG-6000模拟干旱胁迫条件下的生长表现和生理指标。结果表明：高羊茅的“家园”品种在干旱胁迫条件下具有较好的生长表现、在土壤中的根系分布最深、且能维持较高过氧化氢酶活性，表明其与其他供试品种相比具有较强的抗旱能力。     

海南省水果型椰子园土壤养分调查与评价

通过调查海南省主要椰子园土壤养分状况,并评价土壤肥力,为掌握海南省椰子种植区土壤养分状况以及合理、科学施肥管理提供依据。采集海南省北部（海口）、东部（文昌）,南部（三亚、陵水）、中部（琼中、屯昌）、西部（昌江）等市县的椰子种植园表层(20 cm)土壤样品,测定土壤养分,并进行相关和差异显著性分析。研究结果显示：大部分调查样点土壤偏酸性;椰子土壤的有机质、氮磷钾、钙镁等养分含量较高的为海南省中北部,但滨海地区有机质、氮磷钾含量较低,尤其是文昌地区的;调查样点土壤不缺乏铜、锌、铁3种微量元素;然而,所有调查海南省样点土壤均存在缺硼现象。通过合理和科学施肥和栽培措施,提高滨海地区如三亚、陵水、文昌市等地土壤肥力水平和保肥能力,以满足该地区的椰子生长和发育的需要;另外,应重视施用硼肥,以改善海南省椰子园缺硼现状。     

干旱锻炼对B73自交后代当代干旱胁迫记忆基因表达及其启动子区DNA甲基化的影响

植物可能会记住已有的逆境刺激,且这种记忆可以跨代遗传。为研究G₀代干旱锻炼对玉米B73 G₁代当代干旱胁迫记忆基因表达的影响及其启动子区DNA甲基化的影响,实验用20%PEG-6000模拟干旱条件,选取在玉米和拟南芥已知的当代均具有干旱胁迫记忆特性的6个基因为研究对象,利用qRT-PCR技术分析这些基因的表达水平变化,并进一步利用重亚硫酸盐测序PCR技术分析在2个世代中表达差异最显著基因启动子区的DNA甲基化率变化规律。结果表明:干旱胁迫上调了6个当代胁迫记忆基因的表达水平,均呈+/+模式,同当代多次干旱胁迫时表达水平变化趋势一致,且G₁代表达水平显著高于G₀代;干旱胁迫降低了GRMZM2G₀88396基因启动子区的甲基化水平,检测区1两个世代DNA甲基化率的降低主要由CHG和CHH甲基化水平降低造成,检测区2 DNA甲基化率的降低主要是由CG和CHH甲基化水平降低造成,G₁代2个检测区总胞嘧啶甲基化率均显著低于G₀代,说明G₀代干旱锻炼使G₁代GRMZM2G₀88396基因启动子区的DNA甲基化修饰产生了可遗传的变异,它可能直接参与GRMZM2G₀88396基因的表达。