白细胞介素-12对犬细小病毒VP2 DNA疫苗的免疫增强作用

犬细小病毒编码的VP2蛋白是该病毒重要的结构蛋白和抗原蛋白。利用VP2基因制备的DNA疫苗能够刺激机体产生免疫应答反应。为进一步提高VP2DNA疫苗的免疫应答水平,本研究在小鼠体内尝试了利用白细胞介素12（IL-12）基因表达载体提高VP2DNA疫苗的免疫应答水平。首先采用RT-PCR方法从小鼠脾淋巴细胞中分别扩增IL-12大亚基（P40）和小亚基（P35）cDNA基因;然后在真核表达载体pcDNA3.1A上通过引入内部核糖体进入位点（IRES）序列,分别将P40基因和P35基因插入到IRES序列的上下游,构建成IL-12（P40和P35双亚基）基因表达载体,pcDNA-P40-IRES-P35。将上述表达载体与本室构建的VP2表达载体通过磷酸钙方法转染HEK 293T细胞进行瞬时表达,以确定构建的表达载体能否介导相应基因在真核细胞中进行分泌表达。然后用VP2载体单免疫和VP2载体和IL-12载体共免疫方法对小鼠进行免疫（用pcDNA3.1A作为对照）。免疫后在特定时间通过ELISA方法检测小鼠血清抗VP2蛋白的抗体水平,并通过淋巴细胞增殖实验检测免疫后35d小鼠脾脏淋巴细胞增殖反应。结果表明,扩增的小鼠IL-12P40和P35亚基基因与GenBank的参考序列基本一致。Western-blot检测结果表明,重组IL-12和VP2均能够在HEK293T细胞中进行分泌性表达。ELISA检测结果表明利用IL-2载体与VP2载体共免疫小鼠,其血清中抗VP2的抗体水平明显高于VP2载体单免疫组（P〈0.01）,抗体水平在第35天高达1：5120。淋巴细胞增殖试验结果表明,免疫小鼠的淋巴细胞刺激指数均明显高于对照组（P〈0.01）,VP2载体与IL2载体共免疫组的刺激指数明显高于VP2载体单免疫组（P〈0.05）。由此可见,在小鼠体内,IL-12基因表达载体可明显提高CPV VP2基因疫苗的免疫应答水平。     

淋巴结检验在宰后检疫中的重要性

淋巴结的检验是生猪屠宰最基本的检疫手段和措施,是基层兽医卫生检疫监督员必须掌握的主要检验检疫方法之一。当病原微生物侵害机体某组织或器官时,很快被局部淋巴结阻     

热磨系统中的自平衡油膜推力轴承

介绍了目前热磨系统中普遍使用的自平衡油膜推力轴承的结构、工作原理和工作过程,并与传统推力轴承进行比较,阐述了自平衡油膜推力轴承的特点和优点,结合本公司设计和开发的44英寸热磨机的情况,介绍了此种轴承在热磨机上的应用和选用注意事项。     

内蒙古大兴安岭林区森林资源生态效益分析

内蒙古大兴安岭林区是四大国有林区之一,是呼伦贝尔草原和松嫩平原的天然屏障。对其进行生态效益分析具有极为重要的意义。     

精氨酸及N-氨甲酰谷氨酸对断奶羔羊肠道免疫力的影响

研究旨在观察不同水平瘤胃保护性精氨酸及N-氨甲酰谷氨酸(NCG)对断奶羔羊肠道免疫能力的影响.选用15只体况良好,体重为25.00 kg±3.39 kg的5月龄半同胞鄂尔多斯断奶羯羔羊随机分为5组.分别为对照组(1组)、瘤胃保护性精氨酸Arg-1.5组(2组)、瘤胃保护性精氨酸Arg-2组(3组)、瘤胃保护性N-氨甲酰谷氨酸NCG-0.15组(4组)、瘤胃保护性N-氨甲酰谷氨酸NCG-0.20组(5组).在45 d试验期以后,每组分别选取一只试验羊,空腹12h后,用戊巴比妥钠麻醉后进行屠杀,迅速屠宰后,采取肠粘膜样品来检测小肠的白细胞介素-2(IL-2)、分泌型免疫球蛋白A(SIgA)、一氧化氮(NO)和一氧化氮酶(TNOS与iNOS)的含量.结果表明,各处理组的IL-2浓度和SIgA浓度与对照组相比差异均显著(P＜0.05);对于NO,TNOS和iNOS只有NCG-0.15组与对照组无显著性差异(P＞0.05),但含量比对照组较高.其他处理组与1组均差异显著(P＜0.05).综合得出NCG-0.20,Arg-2.0与Arg-1.5对肠道免疫力的影响较大,其中Arg-1.5影响最大(P＜0.05).结果提示,日粮添加瘤胃保护性精氨酸及N-氨甲酰谷氨酸对肠道免疫力有提高作用.     

浅谈高职学生职业素质的培养

简述了职业素质内涵、高职学生职业素质现状以及高职教师如何针对学生的特点进行职业素质培养,提高学生的专业技能,为学生顺利就业做准备。     

核桃树的修剪

整形修剪是核桃树管理中十分重要的技术措施，合理的整形修剪可以形成良好的树体结构，培养丰产树形，调整生长与结果的关系，从而达到旱结果、多结果及连年丰产的目的。     

浅谈建筑中的光视觉环境

建筑环境中的“光”,不仅具有重要的实用功能,而且具有美学功能和精神功能。     

PCR检测鸭瘟病毒的研究

根据鸭瘟病毒DNA聚合酶基因序列，设计、合成了1对引物，以1株鸭瘟病毒疫苗株DNA为模板，进行：PCR扩增，扩增出预期563bp的目的DNA片段。将扩增出的DNA片段克隆到pMDl8—T载体，经Amp／IPTG／X-gal平板筛选，HindⅢ、XbaⅠ双酶切鉴定，获得阳性重组质粒。对重组质粒进行序列测定，与参考序列比较，二者同源性为99．3％。小鹩瘟病毒、鸭肝炎病毒、鹅副黏病毒：PCR扩增均为阴性。用此方法检测人工感染和自然感染鸭瘟的组织(脑、肝、脾)，均能检测到鸭瘟病毒DNA。PCR检测鸭瘟病毒具有高度的特异性、敏感性，能够用于鸭瘟急性及亚临床感染的检测与诊断。     

埃博拉病毒抗体间接血凝检测方法的建立

以纯化后的埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)糖蛋白(GP)作为抗原,致敏醛化的绵羊红细胞,进行最佳反应条件优化,建立间接血凝抗体检测方法。以EBOV高免马血清、纯化的IgG和精制免疫球蛋白F(ab’)_2为待检样品进行检测,并将检测结果与假病毒中和试验检测结果相比较。结果显示,该方法可特异性检测EBOV抗体,与马尔堡病毒、裂谷热病毒等的阳性血清均不发生反应;与假病毒中和试验测得的抗体效价增长规律相一致。结果表明,本试验成功建立了EBOV抗体间接血凝检测方法,该方法安全、简便、快捷,为EBOV疫苗免疫后的效果评价提供了又一新的检测方法。