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3.
利用PCR技术扩增蜱传脑炎病毒(tick-borne encephalitis virus, TBEV)E蛋白第三结构域(DomainⅢ,DⅢ)基因并将其插入原核表达载体pET-30a(+),构建重组质粒pET-30a(+)-TBEV-E-DⅢ。将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导目的蛋白表达,利用镍离子金属螯合亲和层析介质(Ni-NTA)纯化目的蛋白。将纯化的重组蛋白作为包被抗原,建立TBEV抗体间接ELISA检测方法。结果显示,重组蛋白TBEV E-DⅢ在大肠杆菌中主要以包涵体形式表达,蛋白表达的最佳条件为30℃、0.6 mmol/L IPTG诱导6 h; TBEV抗体间接ELISA检测方法的最佳抗原包被浓度为1 mg/L,该方法可特异性检测TBEV阳性血清,与寨卡病毒(Zika virus, ZIKV)、日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)和西尼罗病毒(West Nile virus, WNV)阳性血清无交叉反应,批内和批间变异系数(CV)均小于10%。结果表明,成功表达并纯化了TBEV E-DⅢ重组... 相似文献
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传染性鼻炎(IC)是由副鸡嗜血杆菌引起的鸡的一种急性呼吸道病,可造成育雏育成鸡生长缓慢,容易继发其他细菌感染,死淘率增加,使体重不能到达标准.产蛋鸡产蛋率明显下降(10%~30%),处于产蛋高峰期的鸡群死亡率可达到5%~40%不等.主要症状为鼻腔流出浆液性或粘液性分泌物、面部水肿和结膜炎,伴随呼吸道症状.病鸡精神不振,采食和饮水下降,同时出现腹泻. 相似文献
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研究乳糖代替异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导海藻糖合成酶(Tres)在基因工程菌p ET-30a(+)Tres/BL21中的表达,分别对用乳糖作为诱导剂时的诱导时机、乳糖浓度、诱导持续时间和添加方式,确定了乳糖诱导的最佳条件。经过试验验证,工程菌对数生长中期,OD600 nm约为0.8时,分批次添加终浓度为0.5 mmol/L的乳糖于25℃条件下,诱导5 h,乳糖诱导的蛋白表达量达到最高值。通过试验证明,乳糖可以作为一种很好的诱导剂代替IPTG诱导p ET-30a(+)Tres/BL21中重组产物海藻糖合成酶,为今后海藻糖合成酶生产开发利用提供试验基础。 相似文献
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福海县畜牧业发达,广阔的天然草场为畜牧业发展提供了充足的饲草饲料,但是受加工、生产等条件的制约,饲草饲料产业发展不足,牲畜饲料长期依靠外购,制约了本地畜牧业的健康发展。本文通过分析县域饲草、饲料产业发展形势,破解产业发展瓶颈,提出发展建议,为当地下一步发展饲草饲料产业提供参考。 相似文献
8.
研究以纯化的羊抗草鱼呼肠孤病毒多克隆抗体作为捕获抗体,抗草鱼呼肠孤病毒的单克隆抗体为检测抗体,建立草鱼呼肠孤病毒抗原捕获ELISA检测方法,其最佳反应条件是:羊多克隆抗体包埋浓度为2.5μg/mL,抗草鱼呼肠孤病毒单克隆抗体工作浓度为1:400稀释,以3%牛血清白蛋白作为封闭液。该方法的检测限为5×105 pfu/mL,且能够特异性检出发病草鱼内脏组织中的草鱼呼肠孤病毒。特异性试验结果表明该方法具有较高的特异性,与病毒性出血性败血症病毒、传染性造血器官坏死病毒和鲤春血症病毒等水产动物病毒株均不反应。该方法还具有较好的稳定性。 相似文献
9.
高宏丽 《辽宁农业职业技术学院学报》2010,12(1):7-8
肉种鸡在饲养过程中腿病发生率很高,公鸡尤为明显和敏感,对以后种蛋的生产影响较大,严重影响其生产性能,使鸡场的经济效益严重受损。本文就一例肉种鸡公鸡发生腿病进行诊治,诊断结果为细菌感染,使用敏感抗生素阿莫西林治疗有效。 相似文献