猪CDK9基因的克隆及其过表达对SUVEC细胞周期的影响

【目的】克隆猪细胞周期蛋白激酶9(CDK9)基因,观察该基因过表达对猪脐静脉血管内皮细胞(SU-VEC)周期的影响。【方法】采用电子克隆方法筛选得到猪CDK9基因全长序列,并对其编码的蛋白进行生物信息学分析。利用RT-PCR方法从猪脾脏中扩增出包含完整开放读码框架(ORF)的CDK9 cDNA片段,将其与真核表达载体pEGFP-C1连接,构建重组真核表达载体pEGFP-CDK9。将pEGFP-CDK9以脂质体介导法转染至SUVEC细胞,采用绿色荧光标记和Western blot检测SUVEC细胞中CDK9基因的表达,用流式细胞仪检测转染CDK9基因后SUVEC细胞周期的变化。【结果】得到猪CDK9基因全长1820bp的cDNA序列,其ORF为1119bp,编码372个氨基酸;CDK9分子质量为42.76ku,等电点为9.04;CDK9基因定位于猪的1号染色体上。酶切和测序结果证明,重组真核表达载体pEGFP-CDK9构建成功。pEGFP-CDK9转染SUVEC细胞48h后,荧光显微镜和Western blot检测到目的基因序列在SUVEC细胞中成功表达;试验组各期SUVEC细胞比例与空载体组相比,差异无统计学意义(P0.05),细胞周期未发生显著变化。【结论】克隆了猪CDK9基因,并在SUVEC细胞中成功进行了表达。CDK9基因的过表达未引起细胞周期发生显著变化,其可能并不参与细胞周期的调控。     

茶叶再造烟叶对卷烟烟气成分的影响

以茶叶为添加物,将添加不同比例茶叶的再造烟叶加入叶组制成卷烟样品,用吸烟机抽吸样品,再用同时蒸馏萃取法（SDE）进行提取,并用GC-MS进行烟气成分分析。结果表明,与空白对照样对比,含不同比例茶叶的再造烟叶叶组卷烟中,致香成分均有不同程度的增加：羧酸类、杂环类、醛酮类、酯类和醇类含量增加,分别平均增加175.08%、58.46%、48.57%、40.83%和16.47%;随着茶叶添加比例的增加,杂环类、酯类、羧酸类和醛酮类致香物质含量呈逐渐增加的趋势。检测到主要有害成分共13种,分别有不同程度的降低,添加10%、12%、14%、16%茶叶的样品中总量分别降低19.0%、40.7%、10.6%、17.1%。     

明清桐城桂林方氏家族文化特征探析

明清时期桐城桂林方氏家族是江南著名的世家大族，以科第仕宦、研习诗文、治学习艺等著称于世，在其长期发展延续过程中积淀而成深厚的家族文化。其文化特征主要表现在：其五世方法因靖难发作毅然殉难，此忠孝节义之举为后嗣敬仰，积淀成为方氏世代传承的精神意志的象征；方氏家族文化精神的传承表现在重视教育、诗礼传家、勤学著述、编纂家族遗书等方面；方氏家训、家学、家风的传承也为家族的稳固与兴盛奠定了基础。作为个案研究，探析方氏家族的文化特征，为探究中国传统文化的内蕴提供了一个有效的切入点。     

康雍乾盛世的粮食危机与乾隆的酒禁政策

康雍乾时期,史称"盛世",然而随着人口急剧增长,耕地垦殖殆尽,粮食亩产量难以提高,人口与粮食供给的矛盾日益凸显。此时,酿酒业的兴起耗费大量的粮食,加剧了粮食危机。乾隆嗣位后即采取严厉的禁酒禁曲政策,得到了以方苞为代表的主禁派官员的坚决支持,而以孙嘉淦为代表的开禁派大臣则极力反对。双方各执一词,彼此辩驳,思想交锋异常尖锐。终乾隆一朝,酒禁政策未曾废除,但执行力度于其中后期有所缓和。酒禁政策并不能从根本上解决粮食危机,相反弊端丛生,给百姓的日常生活带来了很大的滋扰,一定程度上加重了百姓生活的困境。