多杀性巴氏杆菌中recN基因的克隆、原核表达及生物信息学分析

试验旨在对多杀性巴氏杆菌recN基因进行克隆和原核表达,并对其表达蛋白进行生物信息学分析。参照GenBank中recN基因序列(登录号:CP003313.1)设计1对引物,通过PCR扩增获得目的基因片段,构建pET-28a(+)-recN重组质粒并转化E.coli DH5α感受态细胞,提取质粒进行酶切鉴定,将鉴定正确的重组质粒转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,对融合蛋白进行SDS-PAGE及Western blotting鉴定。结果表明,试验成功克隆了大小约为1 677 bp的recN基因序列,通过诱导表达的His-Tag融合蛋白大小约为66.94 ku,主要以包涵体形式存在。经生物信息学分析,recN蛋白的分子式为C₂₇₃₅H₄₄₂₈N₇₈₆O₈₅₅S₁₆,消光系数为24 785,不稳定系数为43.99,属于不稳定蛋白;理论等电点(pI)为5.62,为酸性蛋白;总平均亲水性为-0.316,与试验表达的包涵体蛋白性质相同,即同为疏水性蛋白;recN蛋白在哺乳动物网织红细胞的半衰期为30 h,在酵母(体内)中的半衰期>20 h,在大肠杆菌(体内)中的半衰期>10 h;二级结构主要以α-螺旋(64.87%)及无规则卷曲(21.00%)为主;经疏水性分析,预测该蛋白有3个高疏水性区域和9个高亲水性区域。本试验结果为进一步探究多杀性巴氏杆菌recN基因的功能提供了参考依据。     

塑料温室黄瓜育苗技术

塑料温室黄瓜育苗技术二年来，大兴安岭林业蔬菜试验场采用塑料温室黄瓜育苗，连续获得大面积壮苗，并达到了预期定植苗量和前期较好的产量，其育苗方法和技术如下：一、育苗前的准备工作１．苗床设计高７０厘米，宽１．６米，材料可用杂木制做，２．５～３米放一个马凳，...     

阿苯达唑对猪体内囊尾蚴能量代谢酶活性的影响

测定了在阿苯达唑作用下猪体内囊尾蚴磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)、丙酮酸激酶(PK)、延胡索酸还原酶(FR)、异柠檬酸脱氢酶(ICD)、苹果酸脱氢酶(ME)活性的变化。结果表明，阿苯达唑可显著改变未成熟期及成熟期猪囊尾蚴的能量代谢。提示，阿苯达唑的作用机理可能是通过干扰虫体能量代谢，阻断能量的产生导致虫体死亡的。     

灵武长枣正常果与裂果解剖结构的比较研究

运用石蜡切片对灵武长枣正常果实与裂果的解剖结构进行了观察,探讨裂果发生的原因。结果表明:长枣正常果角质层厚度、亚表皮细胞层数与裂果相近;但正常果实表皮细胞层数较裂果多,表皮厚度也较裂果厚;中果皮细胞排列较裂果的紧密;中果皮细胞大小、维管束粗细及多少、空腔大小及多少与裂果的相近。     

施肥对紫苏生长与产种量的影响分析

以提高紫苏产种量为目的 ,研究施肥对紫苏生长与产种量的影响.设置氮肥、磷肥和钾肥的三因素四水平小区试验,在紫苏收获后取样进行测定分析.结果 表明,紫苏的单株产种量与分枝上的花序数呈高度正相关,而产种量不同的单株的主茎花序数相差不大.在磷肥和钾肥用量相同的情况下,随着氮肥用量的增加,紫苏的产种量逐步增加.施用磷肥和钾肥也...     

非离子表面活性剂对棉子脱绒的作用机理

非离子表面活性剂是一类重要的表面活性物质。近年来,随着使用领域越来越广,受到人们的重视。它常常作为洗涤剂、润湿剂、分散剂、乳化剂和增溶剂用在纺织工业、食品工业和日常化学工业生产中。聚氧乙烯型和醇酰胺型非离子表面活性剂用作起泡剂已成为棉子化学脱绒工艺中代表先进水平的工艺方法。因其处理后的棉子     

焚烧对芨芨草滩地草场土壤生态条件的影响

本文研究了焚烧对芨芨草滩地草场上壤生态条件的影响。结果表明，焚烧可使土壤温度升高，地表可升温3．2～10．8℃，地表以下土层也有所升温，但其数值随深度增加而递减。焚烧后土壤含水量在0～40cm土层内可增加2．42～4．58％，土壤含盐量和土壤含磷量均有增加，但土壤含氮量则有所下降。     

不同群体条件下奶花芸豆的生长及产量研究

研究了奶花芸豆4种不同群体条件下,叶绿素含量、叶面积指数、单位面积干物质积累及产量的变化规律.研究结果表明:随着密度增大,单位叶面积叶绿素含量降低;叶面积指数增大,但密度过大则叶面积指数高值期持续时间较短;干物质积累量和产量在一定密度范围内随密度的增加而增加,但密度过大,干物质积累量和产量反而下降.     

猪瘟病毒保护性抗原E2基因的克隆及在原核细胞中的表达

应用ＲＴ－ＰＣＲ分两段扩增猪瘟病毒（ＨＣＶ）石门株Ｅ２基因,然后对其进行了克隆。利用两个片段重叠部分的单一ＢｇｌⅡ位点,将它们连接成为完整的Ｅ２基因,并克隆到ＰＵＣ１９质粒中,获得重 质粒ＰＨＣＦ２。另设计一对引物,以ＰＨＣＦ２为模板扩增出不含信号肽的Ｅ２基因,然后将其克隆到表达载体质粒ｐＢＶ２２０和ＰＥＴ＿２８ａ（＋）中,获得重组质粒ＰＢＶＥ２和ＰＥＴＥ２,用酶切,ＰＣＲ和序列分析鉴定Ｅ２基因插