基于变异PEDV的S-N融合双基因蛋白IgA-ELISA抗体检测方法的建立及应用

猪流行性腹泻病毒(PEDV)是引发猪群腹泻的主要病原之一，给我国生猪养殖业造成了重大的经济损失。为建立IgA-ELISA抗体检测方法，本研究采用变异PEDV真核表达的S-N融合蛋白作为包被抗原，通过系列反应条件优化，建立了PEDV的IgA-ELISA抗体检测方法。该方法的最佳反应条件为包被抗原质量浓度2 mg/L,用5%BSA于37℃封闭2 h;将待检血清1∶50稀释于37℃作用1 h,加1∶20 000稀释酶标二抗于37℃作用30 min, TMB显色10 min;以D_{450 nm} ≥0.326判定为阳性，当D_{450 nm} ≤0.277判定为阴性，介于两者判定为可疑。检测猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、轮状病毒(PoRV)标准阳性血清抗体均为阴性，且重复性变异系数均低于10%。通过对我国福建地区304份样品(血清179份和乳汁125份)进行检测，并与商品试剂盒进行参照对比，总符合率达到93.2%以上，表明该试剂盒检测方法具有较高的特异性、敏感性和重复性，可用...     

色杆菌灭活疫苗的制备与免疫效果评价

为防控小熊猫色杆菌病，按细菌灭活疫苗制备程序将海峡(福州)大熊猫研究交流中心2008年、2020年分离的2株色杆菌CV08毒株和CV20毒株经条件优化后灭活，分别制备成灭活菌液与铝胶佐剂联用制备成灭活疫苗。以BALB/c小鼠为试验动物，建立色杆菌感染模型，用2种方式接种CV20毒株灭活疫苗，比较2种接种途径效果。进一步设计2株色杆菌半数致死量(LD₅₀)梯度对二免后小鼠进行攻毒保护试验，同时进行交叉攻毒保护试验。结果表明：CV20毒株灭活疫苗肌肉注射效果优于皮下注射。CV08毒株和CV20毒株对每只小鼠的LD₅₀分别为3.2×10⁸、5×10⁷CFU。色杆菌CV08毒株灭活疫苗对不同LD₅₀攻毒小鼠的保护率为83%、 70%、60%;色杆菌CV20毒株灭活疫苗对不同LD₅₀攻毒小鼠的保护率为75%、70%、10%。试验制备的CV08、CV20毒株疫苗含菌量均为4×10⁹ CFU·mL^-1,安全检验合格，能对自身菌...