渠县耕层土壤养分现状及应对措施探讨

根据渠县2005年来土壤耕层养分测试与第2次土壤普查数据比较,摸清耕层养分现状及其演变。结果表明,近30年间耕层养分总体上升,其中耕层有机质、全氮、速效磷上升幅度较大,缓效钾、速效钾下降加剧,有效锌稍富余,有效镁、硼、钼缺乏;有机质及全氮高中分布比例超过85%,速效磷高中分布升高32.2%、速效钾下降41.8%,二者一半仍属缺乏。据此,提出了应对措施。     

PCR扩增invA基因特异性检测沙门氏菌

建立了扩增invA基因检测沙门氏菌的PCR方法。对收集的50个血清型123株沙门氏菌及7种27株非沙门氏菌进行PCR,2％琼脂糖电泳检查,结果所有沙门氏菌都扩增出了300bp的特异性产物,非沙门氏菌都未扩增出此目的条带。产物的特异性由slot blot杂交进一步证实。通过电泳判定结果,该法可检出扩增体系中10pg染色体DNA及10~2cfu的纽波特沙门氏菌50029。为下步克隆而设计的两个酶切点（Bam HI,Eco RI）对引物的特异性没有影响。本研究为沙门氏菌的检测提供了简洁、敏感、特异的新方法,同时为克隆invA基因做属特异性探针打下了基础。     

土地流转纠纷是这样化解的

允许农村土地承包经营权依法、自愿、有偿流转,是农业发展的客观要求.随着土地流转的不断增多,随之而来的纠纷也不断出现.我们在工作中发现,多数纠纷的起因是双方私下签订了所谓合同,这种带有普遍性的问题必须引起高度重视.     

白细胞介素-10的生物学功能及其在疾病中的作用研究进展

白细胞介素-10(IL-10)是一种多效性细胞因子,可抑制T细胞、单核细胞和巨噬细胞的活性和效应功能,其主要功能是限制或终止炎症反应。除此之外,IL-10还能调节B细胞、NK细胞、细胞毒性T细胞和辅助T细胞、肥大细胞、粒细胞、树突状细胞、角化细胞和内皮细胞的生长或分化。文章综述其主要的生物学功能及其与多种疾病间的关系。     

鲤鱼诱导型一氧化氮合成酶全长cDNA克隆及其在外周血白细胞中的差异表达分析

试验旨在获得鲤鱼诱导型一氧化氮合成酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)cDNA全长序列,并以此为基础探讨在丝裂原刺激下外周血白细胞中iNOS的表达变化。以从鲤鱼正常外周血白细胞cDNA文库中获得的iNOS的EST序列为基础,采用基因文库筛选和cDNA5'末端快速扩增技术(5'-RACE)相结合的方法,成功扩增出鲤鱼iNOScDNA全长序列,然后进行鲤鱼外周血白细胞原代培养,分成对照组和试验组,其中试验组分别为脂多糖(LPS,1.0μg/mL)刺激4、12h,刀豆蛋白A(ConA,1.0μg/mL)刺激4、24h,对照组为相同培养时间无丝裂原刺激的外周血白细胞,根据得到的iNOScDNA全长序列和鲤鱼β-actin序列分别设计特异性引物,应用实时荧光定量PCR方法检测各组外周血白细胞中iNOS在mRNA水平上的表达情况并进行分析。序列分析结果显示,最后获得的cDNA片段共3704bp,包含74bp的5'端非编码区,246bp的3'端非编码区,一个3384bp的完整的开放阅读框(ORF),共编码1127个氨基酸。序列同源性分析结果显示,该序列与鲫鱼iNOS基因同源性高达100%;实时荧光定量PCR结果显示,经LPS、ConA刺激的试验组外周血白细胞中iNOS表达量均升高,且短时间(4h)刺激的表达量高于长时间(LPS12h;ConA24h)刺激的表达量。综上所述,在LPS、ConA刺激过程中,iNOS在外周血白细胞中表达量均有上调,结果提示存在炎症反应的动态变化。     

减氮施加生物炭对盐碱胁迫下甜菜根际土壤酶活性、根活力及产量的影响

通过模拟盐碱土壤环境,在减施氮肥配合施加生物炭条件下,研究甜菜根际土壤酶活性、根际土壤氮素含量、根系活力、块根产量和含糖率的变化,明确减氮条件下施加生物炭对甜菜产量的影响,为今后盐碱土壤环境下种植甜菜、减少氮肥施用量提供依据。试验共设置6个处理,分别为盐碱胁迫全氮处理(CK)、盐碱胁迫施加占风干土壤质量3%生物炭(BC)全氮处理(BC+N180)和减氮10%(BC+N162)、20%(BC+N144)、30%(BC+N126)、40%(BC+N108)处理。结果表明:盐碱胁迫施加生物炭减氮条件下甜菜根际土壤酶的活性和根系活力相较CK明显提高,其中土壤脲酶活性增加14.9%～33.0%;磷酸酶活性增加18.6%～54.7%;蔗糖转化酶活性增加16.5%～22.7%;过氧化氢酶活性增加9.9%～12.2%;根系活力提高12.3%～24.1%。各处理中除减氮40%外,其他处理的甜菜块根产量、含糖率和产糖量均显著高于CK,减氮10%和20%处理产糖量与全氮处理无明显差异。在本试验的条件下,施加占风干土壤质量3%的生物炭,可提高土壤酶活性、甜菜的产糖量,节约氮肥10%～20%的施用量。     

旋毛虫G10-7基因在大肠杆菌中的高效表达

旋毛虫新生幼虫期特异性 G10 - 7基因从 PBK- CMV- G10 - 7重组质粒中亚克隆到 p ET- 2 8b( )原核表达载体上 ,成功地构建了重组表达质粒 p ET- 2 8b- G10 - 7。将其转化到大肠杆菌 DE3感受态细胞中 ,经 IPTG诱导表达 ,其细菌裂解物经 SDS- PAGE电泳可检测到相对分子质量约为 34 0 0 0的目的蛋白带 ,且随诱导时间的延长蛋白表达量逐渐增加 ,诱导 4h达到峰值 ,薄层扫描结果显示 ,目的蛋白占菌体总蛋白的 6 1.7%。Western- blotting检测显示 ,此蛋白可被感染旋毛虫家猪阳性血清所识别 ,表明该蛋白具有良好的抗原性。     

不同环境条件对虫生广布拟盘多毛孢退化的影响

为了解决虫生广布拟盘多毛孢(Entomogenous Pestalotiopsis disseminata)GXSTYJ03菌株在研究和应用中的退化问题,保持菌种稳定性,分别在4种光照(自然光、3天黑暗、24 h黑暗、24 h光照)条件下培养和在3种培养基(PSA、PPSA1、PPSA2)上继代,观察菌落形态和测定菌种生长速率及产孢量,探究不同环境条件对菌种退化的影响。结果表明,环境条件的改变,可导致GXSTYJ03菌株菌落形态局变、生长速率和产孢量的变化。以24 h全光照处理、PPSA1培养基培养可以保持GXSTYJ03菌株的稳定性和减缓其退化能力,并提出了控制菌种退化的措施。     

苜蓿干草捆安全贮藏条件的研究

通过对苜蓿打捆密度(50、100、150、200 kg·m^-3)、打捆含水量(14%~16%、19%~21%、24%~26%、29%~31%)和防霉剂添加量(0%、1%、2%、3%)3个因素开展研究,筛选苜蓿草捆最佳的贮藏方式,为我国优质苜蓿干草生产提供理论基础。对苜蓿打捆的3个因素设计正交试验,不同处理苜蓿草捆在贮藏360 d后,对其营养物质、饲用价值和体外消化特性3个方面综合研究,确定出苜蓿草捆的最适贮藏条件。试验一:通过不同试验处理对苜蓿干草营养影响试验,从营养成分和饲用价值综合考虑,处理A₁₀(打捆密度100 kg·m^-3,打捆含水量24%~26%,CaO添加量3%)、A₁₂(打捆密度200 kg·m^-3,打捆含水量24%~26%,CaO添加量1%)、A₁₄(打捆密度100 kg·m^-3,打捆含水量29%~31%,CaO添加量2%)和A₁₅(打捆密度150 kg·m^-3,打捆含水量29%~31%,CaO添加量1%)在贮藏360 d的苜蓿草捆各项营养指标损失相对较少,其饲用价值也相对较高。试验二:通过试验一筛选出的4个较优处理,以A₁(打捆密度50 kg·m^-3,打捆含水量14%~16%,CaO添加量0)和A₁₆(打捆密度200 kg·m^-3,打捆含水量29%~31%,CaO添加量0)为对照。通过不同试验处理苜蓿干草体外消化试验,在体外培养48 h过程中,处理A₁₄的产气量最高为53.13 mL,显著高于对照(P<0.05);A₁₄的体外培养液在各个时间点的pH都低于其他处理,其pH平均值最低为6.64;A₁₄的总挥发性脂肪酸(TVFA)含量最高为61.05 mol·L^-1,极显著高于其他各个处理(P<0.01);A₁₄的粗蛋白(CP)和干物质(DM)的降解率最高,分别为81.21%和66.84%,极显著高于其他处理(P<0.01)。从营养物质、饲用价值和体外消化特性综合考虑,苜蓿干草在高水分(29%~31%)、中密度(100 kg·m^-3)打捆,并添加2%的氧化钙防霉剂,在贮藏过程中营养保存最完好,饲用价值最高,体外消化特性最好。     

伪狂犬病病毒PCR检测方法的建立及初步应用

本研究根据伪狂犬病病毒(PRV)gp50的基因序列设计并合成引物,以我国闽A株细胞培养毒为模板,筛选最佳反应条件,建立了PRV的PCR检测方法。应用该方法对双城、Shope、Bartha等毒株的细胞培养物进行基因扩增都获得了分子量为321bp的特异性目的DNA片段,其检出敏感度为2×10~(-5)个TCID_(50)。用该方法检测人工感染仔猪的扁桃体、三叉神经节、鼻拭子、肺、脑,家兔的白细胞,小鼠的脑组织,其结果都呈现特异性阳性反应,检测狂犬病病毒,腺病毒、细小病毒皆为阴性结果。但是,应用该引物扩增马立克氏病病毒(MDV)基因,可发现一条大小约为27bp的DNA片段,表明PRV与MDV可能具有源性。本研究还建立了两种模板制备方法,即:通过煮沸裂解由细胞培养物制备DNA模板的简法,通过EDTA-胰蛋白酶消化→煮沸裂解→酚:仿:醇抽提由病料制备DNA模板的新法,为在临床上应用PRV PCR方法论断该病提供了可能。