控制牛冷冻精液细菌数的几项措施

牛冷冻精液在采集、稀释等生产过程中都有可能被污染,并且有大量资料表明,许多细菌性及病毒性传染病都可能通过精液而传播。被微生物污染的冷冻精液,精子活力降低,生存时间缩短,输精后容易造成早期胚胎死亡而降低受胎率。《牛冷冻精液国家标准》(GB4143-84)规定:牛冷冻精液解冻     

液氮的安全使用

液氮(LN_2)主要来自于空气中的氮气,氮气从空气中被分离、压缩后呈液态。在标准大气压下,液氮的沸点为-196℃(-320°F)。液氮主要应用于人工授精技术中,在-101℃     

腺病毒载体的研究概况

1953年,Rowe等首次由人的手术切除的扁桃体组织,用血浆埋块培养分离得到一株病毒,以后他人又陆续从人和其他哺乳动物、禽类中分离到类似的病毒.因为最初是从腺体组织分离得到,故名腺病毒.它分为两个属:哺乳动物腺病毒和禽类腺病毒[1].该病毒是无囊膜的线性双链DNA病毒[2,3],腺病毒在自然界分布广泛,至少存在100种以上的血清型,基因组长约36 kb,其两端各有一个反向末端重复区(ITR),ITR内侧为病毒包装信号.基因组上含有早期转录基因(E)和晚期转录基因(L),早期转录基因包括E1A、E1B、E2A、E2B、E3、E4, 晚期转录基因为L1、L2、L3、L4、L5[4].     

鸽圆环病毒浙江株△Cap基因的克隆与原核表达

根据已发表的鸽圆环病毒(PiCV)序列,在V1ORF保守序列部位设计引物(目的片段长度为629bp),对浙江某鸽养殖场的病料进行PCR扩增检测,获得阳性样品;应用设计的删除核定位信号外壳蛋白基因(△Cap)的引物,扩增获得680bp的△Cap基因,克隆于pMD18-T载体,进行测序;将△Cap基因亚克隆到原核表达载体pET-28a进行融合表达,SDS-PAGE电泳检测发现,△Cap融合蛋白经IPTG诱导后在大肠杆菌中以包涵体形式表达,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的22.1%。     

鹅圆环病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

为建立鹅圆环病毒(GoCV)抗体的检测方法,本研究通过原核表达重组核衣壳(Cap)蛋白,将纯化的该重组蛋白作为ELISA检测的包被抗原,利用交叉反应性,以羊抗鸡IgG(HRP-IgG)作为二抗,经反应条件的优化,建立了检测鹅血清GoCV抗体的间接ELISA方法。确立的ELISA反应最适条件为:抗原包被浓度为2.05μg/mL,待检血清稀释度为1∶50,HRP-IgG稀释度为1∶2000,待测血清和二抗均于37℃反应1.5h,底物于室温显色10 min。经38份阴性血清检测确定阴阳性临界值为0.25。特异性试验结果显示,该方法与大肠杆菌、新城疫、禽流感H5和H9、小鹅瘟、鹅副粘病毒抗原阳性血清均无交叉反应;重复性试验结果显示,其批内和批间变异系数均小于10%。应用该方法检测了从4群GoCV PCR检测阳性种鹅群采集的血清,结果显示其血清阳性率在60.0%～90.9%。本实验建立的间接ELISA方法具有较好的特异性和重复性,为进一步开展GoCV流行病学调查提供了一种便捷可靠的手段。     

初学操作系统分析

操作系统作为计算机系统的灵魂,一直被公认为是难以理解和实现的,由于其强大的特性,复杂的算法,使许多计算机爱好者对它的学习是充满了疑问。学习这样一门学科,我们既想努力钻研,但又苦于其中知识零碎且复杂。不过正是因为它的这些特性,使操作系统的地位从来没有变过,说它是计算机的支柱也不为过。     

山黧豆抗氧化酶基因的克隆与表达分析

【目的】克隆山黧豆抗氧化酶基因,并对其进行生物信息学及表达模式分析,为研究抗氧化酶基因在山黧豆中的抗旱机制奠定基础。【方法】以萌发7 d的山黧豆叶片为材料,通过RT-PCR克隆山黧豆抗氧化酶基因的编码序列(CDS);采用荧光定量PCR分析抗氧化酶基因的组织表达模式;利用在线软件ExPASy ProtParam、SignalP 4.1、TMHMM V. 2.0、TargetP 1.1分别分析抗氧化酶基因编码的蛋白质理化性质、信号肽、跨膜区域以及亚细胞定位;利用在线工具Conserved Domain、SOPMA预测蛋白质保守结构域和二级结构,利用MEGA 6.0软件构建蛋白系统进化树;并利用20%PEG 6000溶液模拟干旱处理山黧豆,采用荧光定量PCR分析干旱胁迫不同时间抗氧化酶基因在叶片中的相对表达量。【结果】RT-PCR克隆获得山黧豆抗氧化酶基因APX、CAT、MnSOD、FeSOD和Cu/ZnSOD的编码序列,其长度分别为864,1 485,723,1 005和942 bp。生物信息学分析表明,APX、CAT、MnSOD、FeSOD和Cu/ZnSOD抗氧化酶均为酸性不稳定蛋白质,且均由α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲共4种二级结构组成;山黧豆抗氧化酶均包含高度保守的结构域。聚类分析结果表明,山黧豆的APX、CAT、MnSOD、FeSOD、Cu/ZnSOD依次与蒺藜苜蓿、蚕豆、豌豆、豌豆和锦鸡儿具有较高的相似性、较近的亲缘关系和遗传距离。表达分析结果表明,APX、CAT、MnSOD、FeSOD和Cu/ZnSOD基因在山黧豆根、茎、叶组织中均有表达。APX、CAT和MnSOD基因均响应了干旱胁迫,其中APX、CAT基因的表达量在干旱胁迫后迅速升高,3 h后达到最高,分别是0 h的5和4.3倍。【结论】成功克隆了山黧豆抗氧化酶基因APX、CAT、MnSOD、FeSOD和Cu/ZnSOD,推测其可协同清除干旱胁迫下产生的活性氧。     

黑龙江省中小规模奶牛场问题分析

正黑龙江省是国家的奶业大省,奶牛饲养量一直居全国前列。随着奶业提档升级步伐的加速,奶牛养殖的规模化程度也在不断提升。以往的"小规模、大群体""千家万户养牛"的模式已经淡出了历史舞台。但是,对于由散养而走向集中饲养的存栏500头以下的中小规模奶牛场来说,目前在以下几个方面存在着比较突出的问题。1疾病防控规模奶牛场的第一要务就是做好疾病防控,这是有别于散养的最大不同之处。对于奶牛场来说,一旦感染了传染性疾病就极难净化,很可能造成场区的废     

关于马龙区农机安全发展的困惑与对策

<正>近年来,随着"免费监理"、"购机补贴"和"放管服"改革的深入,农机驾驶操作人员不断增加,农业机械化进程不断加快,监管范围越来越广,监理要求越来越高,工作难度越来越大,安全发展面临着新时代的挑战。云南省曲靖市马龙区与全国全省一样,农机安全监理的困惑影响着农机化供给侧结构性改革和农机振兴。     

浅议生姜的功效与作用

生姜因其独特刺激的辛辣味,以及能够温热身体、升高体温的功效,越来越受到人们的瞩目,并且我们不但可以利用生姜水来沐浴,同时食用生姜对人体健康也非常有帮助,而且这两种方式都可以帮助身体排出毒素,减少脂肪。