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根据已发表的鹅圆环病毒GoCV-yk1株的序列,设计引物扩增出全长核衣壳蛋白基因(Cap),用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后插入到原核表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行融合表达,经SDS-PAGE电泳检测未见到目的蛋白条带。应用生物信息学分析确定Cap蛋白的核定位信号区域,新设计一对引物扩增出不包含核定位信号序列编码区的核衣壳蛋白基因,将截短Cap基因克隆入pET-28a进行融合表达,经SDS-PAGE电泳和Western blot检测,截短Cap蛋白获得了高效表达,融合蛋白的分子量约为27.6ku,表达产物以包涵体形式存在,其表达量可以达菌体总蛋白的18.3%。截短Cap蛋白的高效表达为鹅圆环病毒ELISA检测方法的建立和进一步开展GoCV致病性及其免疫机制的探索奠定了基础。 相似文献
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地下渗滤系统处理分散式生活污水的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
根据分散污水的特点,探讨了地下渗滤系统处理分散式生活污水的方法,并总结分析地下渗滤系统的3种类型及运行时注意的问题,概括分析了地下渗滤系统处理生活污水的关键性问题及解决办法:土壤选配问题;土壤的堵塞问题;氮的去除问题。 相似文献
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为探究杀菌剂与解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliquefaciens X-119菌株复配防治葡萄灰霉病的可行性,通过平板试验筛选抑菌效果较好的杀菌剂与解淀粉芽胞杆菌X-119菌株进行复配,测定不同体积比复配剂对葡萄灰霉病的防效,并通过对菌丝形态、产孢量、产核能力及协同转运蛋白超家族(major facilitator superfamily,MFS)相关调控基因表达水平的观察筛选得到最优复配组合。结果显示,咯菌腈与解淀粉芽胞杆菌X-119菌株体积比为8∶2时的复配剂对葡萄灰霉病菌Botrytis cinerea H259、H261 菌株的抑制效果最佳,毒性比率分别为 1.77 和 1.73,防效分别为 90.91% 和72.33%;离体果实防效分别为83.06%和65.48%,温室防效分别为76.72%和76.24%,且复配剂防效高于单剂。且该复配剂可阻碍葡萄灰霉病菌菌丝正常生长,显著降低其产孢能力和产核能力。实时荧光定量PCR结果显示,该复配剂处理葡萄灰霉病菌后细胞膜转运蛋白相关调控基因BCIN_09g00960、BCIN_03g02340和BCIN_09g00210的表达水平下调趋势显著。表明咯菌腈与解淀粉芽胞杆菌X-119菌株复配表现出良好的防控效果,生产中可将咯菌腈与解淀粉芽胞杆菌X-119菌株按体积比8∶2复配用于葡萄灰霉病防治。 相似文献
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[目的]验证制备新方法所获得的稳定hpRNA是否可用于RNAi载体的构建并达到基因表达干扰的效果。[方法]利用制备新方法(2μL DNA与8μL H_2O混匀,95℃5 min,37℃15 min)制备hpRNA,后采用REGS方法构建Zm MDAR RNAi载体,通过Grx1-ro GFP2和荧光实时定量PCR检测基因表达干扰的效果。[结果]利用制备新方法制备50 nt hpRNA。Zm MDAR基因的表达量变化和Grxl-ro GFP2探针的荧光比值变化表明hpRNA介导的干扰载体引起了原生质体氧化还原状态的变化。[结论]通过制备新方法所制备的hpRNA为RNAi载体所介导的干扰作用奠定基础。 相似文献
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柿树是太行山区的主要经济树种 ,栽培历史悠久 ,面积大 ,经济价值高。但河北省磁县的柿树生产由于长期粗放管理 ,产量低 ,质量差 ,市场竞争力不强 ,严重影响果农的收益。为了改变我县柿树生产落后的现状 ,我们于 1 997~ 2 0 0 0年进行了栽植于山地的满天红柿树优质丰产试验 ,取得了明显成效。现将试验情况报道如下。1 材料与方法1 .1 试验园基本情况 试验在河北省磁县南王庄村进行。当地年平均气温 1 2 .9℃ ,绝对最高气温 41 .4℃ ,绝对最低气温 -1 9.4℃ ,无霜期 1 97天 ,年降水量 50 7.67mm,降水集中在 7~ 8月。试验地海拔高度 42… 相似文献
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介绍了宁夏回族自治区中卫市永康镇农机化发展现状,指出了目前农机化发展中存在的问题,提出了今后发展农机化的意见和建议。 相似文献
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