兔抗鸡碱性氨基酸转运载体b0,+AT多克隆抗体的制备及其效价和特异性分析

为了获得兔抗鸡碱性氨基酸转运载体b0,+AT多克隆抗体,并对多克隆抗体进行特异性分析,本试验利用鸡b0,+AT cDNA全序列(GenBank登录号HQ338713)进行生物信息学分析,预测其蛋白质理化性质、跨膜区域、二级结构及抗原表位,并设计出1段抗原多肽;构建鸡pET-32a(+)-b0,+AT质粒,原核表达融合蛋白经纯化后,注射于新西兰大白兔,经3次加强免疫后,制备兔抗鸡b0,+AT多克隆抗体,并采用酶联免疫分析(ELISA)和蛋白质免疫印迹(Westernblot)技术分析其效价和特异性。结果如下:1)鸡肠道b0,+AT分子质量为53.8 ku,等电点为8.27,编码493个氨基酸,其中含33个强碱性氨基酸残基(K、R)、28个强酸性氨基酸残基(D、E)、235个疏水性氨基酸残基(A、I、L、F、W、V)、122个极性氨基酸残基(N、C、Q、S、T、Y);经推测,b0,+AT有12个跨膜螺旋结构,由32.05%α-螺旋、25.96%延伸链和41.99%无规则卷曲组成。2)成功构建了鸡pET-32a(+)-b0,+AT质粒并获得兔抗鸡b0,+AT多克隆抗体,抗体效价可达到1∶204 800,且特异性较好。3)利用制备的兔抗鸡b0,+AT多克隆抗体作为一抗,肠道组织膜蛋白为抗原,采用Western blot验证获得预期的特异性条带,一抗稀释比例为1∶4 000。结果提示,本试验成功制备了与膜蛋白b0,+AT特异性较好的多克隆抗体,同时其在鸡肠道组织中具有较好的应用效果。     

开封地区西瓜病毒病发生原因与防治对策

河南省开封市是我国著名的西瓜主产区，常年种植面积3．3万-4．0万hm^2。一般于3月上旬大棚育苗，4月上旬移栽，小拱棚双膜覆盖栽培，7月上中旬上市。近几年西瓜病毒病发生严重，在坐果节位雌花开放前后暴发，损失惨重。据调查，2007年开封瓜区病毒病发生面积占种植面积的55％，发病盛期病株率平均可达21．3％，重发病地块病株率在85％左右。由于瓜农对病毒病传毒媒介、发生规律缺乏足够的认识，不能及时准确地防治蚜虫、蓟马等传毒媒介，往往错过了防治适期，造成不可挽回的经济损失。     

长沙水稻主产区土壤肥力现状评价

2023年,从长沙市稻田主产区长沙县、望城区、宁乡市、浏阳市4个县（市、区）的稻田中采集340个土壤样点,测定了土壤pH值、有机质、全氮、碱解氮、有效磷与速效钾养分含量。结果表明：（1）长沙水稻主产区的土壤肥力特征差异较大,其中,长沙县、望城区和浏阳市的土壤p H值变异系数最小,属于小变异;4个县（市、区）的有机质、全氮和碱解氮属于中等变异;4个县（市、区）的土壤有效磷及长沙县、浏阳市和宁乡市的速效钾变异系数较大,属于高度变异。（2）4个县（市、区）土壤pH值以二级与三级为主,存在土壤酸化问题。（3）土壤有机质、全氮与碱解氮含量较丰富,有效磷含量一般,速效钾含量普遍偏低。综之,研究区土壤酸化问题依然存在,需进一步调控酸碱度。     

饲料VD3水平对黄颡鱼转录组差异基因表达的影响

为研究饲料中添加维生素D_3对黄颡鱼基因表达的影响,实验基于RNA-Seq技术对用添加不同水平维生素D_3[0(VD0),1243(VD2),22700(VD20)IU/kg]的饲料喂养的黄颡鱼肾脏和小肠的转录组数据进行分析。通过对305 568982条原始reads的筛选和排除,得到了83 265条unigenes,平均长845.38 nt,N50为1620 nt。利用Blast等相关软件对数据进行深度分析,得到功能注释基因共29 224个。根据GO富集分析发现,差异表达基因主要集中在细胞过程、代谢通路、生物调控等通路中,KEGGpathway富集分析结果显示,代谢通路涉及基因最多,有1532个。相对于对照组,添加1243和22700 IU/kg的VD_3(VD0 vs VD2/VD0vs VD20)可得到共同上下调基因共380个,其中上调基因266个,下调基因114个;3种水平下共同上下调的基因共2 1个,其中上调基因4个,下调基因1 7个。研究表明,在饲料中添加不同浓度维生素D_3会对黄颡鱼的生长代谢和生物调控等相关基因表达产生影响,且不同浓度实验组,相关基因的表达存在差异。本实验通过对差异表达基因的后续分析及预测,为黄颡鱼的生长代谢及疾病预防等方面的研究提供了丰富的数据来源。     

不同羊肚菌菌株核桃林下栽培试验

开展了6个羊肚菌菌株的核桃林下栽培试验,以期为大理地区羊肚菌的栽培与推广提供技术支持。通过观测各个品种羊肚菌菌丝、菌核、原基、子实体整个生长周期的特点,综合对比分析了各个品种在成熟时间、出菇特点、品质、产量等方面的差异。结果表明:在试验区内,6个羊肚菌试验菌株中以六妹系列的LL-1出菇时间最早、品质最佳、产量最高。     

无锡市犬类狂犬病防疫的现状、问题和对策

自太湖水治理以来,随着奶牛完全的退出,生猪家禽的限养,在无锡主城区犬类狂犬病防控将逐步成为动物防疫的最主要对象。狂犬病是一种重要的人兽共患病,全国每年死于狂犬病的人数常年排在所有法定传染病的前三位,而人得狂犬病的来源大部分都是由犬类带来,因此防好犬类狂犬病事关人民身体健康和社会稳定。     

生产无公害畜禽产品把“三关”

1．饲料安全关 饲料安全是生产无公害畜禽产品的首要条件。所以生产无公害畜禽产品,饲料的种植、生产、加工、包装、运输等都必须符合无公害食品的质量和卫生标准,保证饲料安全。     

烟草幼苗根系抗氧化系统对渗透胁迫的生理响应

用不同渗透势的PEG-6000对2个烟草品种幼苗根系进行渗透胁迫处理,研究了根系质膜透性、MDA含量和抗氧化系统的变化情况.结果表明,根系质膜透性随渗透胁迫强度的加强而增大,根中MDA含量和H2O2含量增加.渗透胁迫期间几种保护酶活性变化不同,SOD和CAT活性呈先升后降的变化趋势,POD活性上升,而抗坏血酸过氧化物酶(ASP)活性下降.根中抗氧化物质(AsA和GSH)在低渗透胁迫下含量增加,高渗透胁迫下含量下降.渗透胁迫期间根系抗氧化酶和抗氧化物质含量与膜脂过氧化水平及膜透性呈一定的负相关性.2个供试品种的抗氧化系统对PEG-6000渗透胁迫的反应存在一定差异.     

鸡用异源抗血浆的研制

用绵羊作为免疫动物、制备异源抗新城疫(ND)、传染性法氏囊炎(IBD)、传染性支气管炎(IB)三联抗血浆及减蛋综合症(EDS—76)抗血浆,可防止传播同源传染病的危险。按筛选的免疫程序连续免疫,连续采血、抗凝离心制备的抗血浆效价高,ND 血凝抑制反应(HI)价1280~x—5120~x、IBD琼扩试验(AGP)价64~x—256~x,IB AGP价4~x—16~x,EDS-76HI价2560~x—10240~x,并持续2.5个月,产量高,500ml血液可制备370ml左右抗血浆。制备时间短、污染机会少。ND早期治愈率80％以上,预防保护率第10天仍为80％。IBD早期治愈率95％以上,预防保护率第10天为100％。IB早期治愈率80％以上,预防保护率第10天为90％。EDS—76早期治疗,在治疗后第5天即可恢复原产蛋水平。预防保护率在第10天仍为100％。是当前防治IBD、ND、IB、EDS—76,特别是对ND与IBD或ND与IB合并感染时,特效、安全、实用、利于推广的生物制品。     

不同氮肥施用量对连作圃地毛白杨生理特性的影响

为解决毛白杨连作苗圃地育苗中幼苗长势减弱的问题,试验通过追施氮肥的方式改善树体营养状况和生理特性,以促进苗木健壮生长。试验在田间条件下,以2年生苗木为试材,设置氮肥施用量分别为0 g·株~(-1)(CK)、10 g·株~(-1)(T1)、20 g·株~(-1)(T2)、30 g·株~(-1)(T3)、40 g·株~(-1)(T4)5个处理,3次重复。结果表明:5～9月T4叶绿素、可溶性蛋白、游离脯氨酸含量、SOD活性、POD活性、PPO活性均处于最高值;与T4相比,T3降低了各项生理指标,但差异不显著;与T3相比,7～9月T1、T2叶绿素含量显著降低,5～8月T1、T2均显著高于CK;与T3相比,CK、T1、T2均降低了可溶性蛋白含量,7～8月T2与T3之间存在显著差异;与T3相比,T1、T2游离脯氨酸含量显著降低,8～9月T1显著低于T2;与T3相比,T1、T2处理SOD、POD活性显著降低,6～7月T1显著高于对照;与T3相比,T1、T2在6、9月份显著降低了PPO活性,5～8月T2显著高于对照,T1与对照之间无显著差异。结合试验结果,毛白杨连作圃地育苗中建议氮肥施用量为30～40 g·株~(-1)。