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为建立一种灵敏、准确且快速检测禽源大肠杆菌的方法,根据禽源大肠杆菌uidA基因的一节特异性保守序列设计引物,建立用于禽源大肠杆菌的荧光定量PCR(qPCR)检验方法,并对其各方面进行评价。试验数据表明所建立的qPCR方法的Ct值与标准品在4.69×102~4.69×109copies/μL范围内存在优良的线性关系,线性相关系数为R2=0.993;该方法标准曲线方程为y=-3.2786x+39.032,熔解曲线表现为单峰,不存在非特异性扩增。对重组质粒标准品的最低检测浓度为4.69×102copies/μL,是普通PCR方法的1000倍。该方法检测临床样本阳性率为68.3%(41/60),普通PCR阳性检出率为23.3%(14/60),阳性检出率高出45%。此次研究建立的检测禽源大肠杆菌的荧光定量PCR检测方法可用于禽源大肠杆菌的快速诊断,对于禽大肠杆菌病的监测具有重要意义。 相似文献
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致弱过程中高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株部分生物学特性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为了研制高致病性猪繁殖与呼吸综合征(HP-PRRS)弱毒疫苗,将高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)HuN4株进行了致弱驯化,在Marc-145细胞上对其进行了3次蚀斑克隆和连续传代.该毒株的病变速度随着代次增高逐渐加快,传至80代以后其病毒滴度达到最高并保持稳定;电镜观察发现低代次病毒粒子形态以棒状为主,高代次病毒粒子形态以球形为主;蚀斑形态比较发现低代次病毒形成的蚀斑大小不一,而高代次病毒形成的蚀斑大小均一;序列分析和病毒抗原性分析表明HuN4株传代过程中GP5蛋白羧基端1个主要抗原表位(196QWGRL200)发生突变即196Q突变为196R,针对该表位的单克隆抗体只与HuN4株低代次病毒反应而不与高代次病毒反应.以上结果表明:在Marc-145细胞上经蚀斑克隆和连续传代致使HP-PRRSV HuN4株部分生物学特性发生改变,这些特性的改变在病毒弱化过程中的作用还有待进一步的研究. 相似文献
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【目的】探究锌指BED结构域结合蛋白6(zinc finger BED domain-containing protein 6,ZBED6)基因敲除对猪肾脏组织基因转录表达的影响,并解析ZBED6基因调控猪肾脏代谢的靶基因及其通路。【方法】对8月龄ZBED6基因敲除巴马香猪(ZBED6 KO)和同月龄野生型巴马香猪(WT)的肾脏组织(n=3)进行总RNA提取,利用实时荧光定量PCR检测胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor 2,IGF2)和差异基因的表达量;以Illumina Hiseq高通量测序技术对ZBED6 KO和WT猪肾脏组织mRNA进行转录组测序(RNA-Seq),用猪Sus scrofa 11.1作为参考基因组序列,通过生物信息学软件TopHat、Cufflink、Cuffmerge和Cuffdiff对测序数据进行分析,筛选ZBED6 KO和WT猪肾脏组织中的差异表达基因,对差异表达基因进行层次聚类和KEGG通路富集分析,并通过实时荧光定量PCR验证RNA-Seq结果中差异表达基因的可靠性。【结果】实时荧光定量PCR结果显示,ZBED6 K... 相似文献
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对加拿大饲用燕麦与青海箭筈豌豆、加拿大饲用豌豆不同比例(100∶0、80∶20、70∶30、60∶40、50∶50、40∶60、30∶70、20∶80、0∶100)混播草地的生产性能和营养价值进行研究,探讨燕麦与豌豆的最佳混播组分和混播比例,以期为甘南高寒牧区燕麦与豌豆混播草地的建植提供参考。结果表明,混播组分间,燕麦与青海箭筈豌豆混播(A1组分)的平均株高较高,燕麦平均枝条数较高,平均营养价值较好。混播比例间,随着豌豆比例的增加,燕麦平均枝条数逐渐降低,豌豆平均枝条数逐渐增加,平均干草产量总体呈缓慢降低的趋势,平均粗蛋白含量逐渐升高,平均中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量逐渐降低;燕麦和豌豆的混播比例为80∶20(B2)时,平均鲜草和干草产量最高,平均枝条数较多,平均粗蛋白、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量较高。在混播组分和混播比例交互作用下,加拿大饲用燕麦和青海箭筈豌豆以50∶50(A1B5)比例混播时干草产量较高(15.82×103kg/hm2),粗蛋白含量为15.61%,中性洗涤纤维含量为47.71%,酸性洗涤纤维含量为30.81%,粗脂肪... 相似文献
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建立一种土壤水循环机理与地形特征结合的层次评价模型,以长江一级支流——黎香溪流域为研究区,以土壤的蓄水量、土壤地形湿度、蒸散发量和灌溉用水条件作为评价因子,采用层次分析法对流域耕地水约束状态进行综合分析,将水约束状态分为轻度、一般、较重、重度、极重5个等级。通过对300个样本的抽样调查,分析结果总体正确率为78%。灌溉条件的影响力随着约束等级的降低而增加,正确率随着约束等级的降低而降低,从极重到轻度正确率分别为85.00%、81.67%、78.33%、75.00%和68.33%。流域内耕地受用水较重及以上程度约束占总面积的55%。模型对流域内部耕地用水状态的相对差异模拟精度较高,灌溉水平的差异是误差的主要来源。 相似文献
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为了研究复方中草药添加剂对生长育肥猪生产性能和血液指标的影响,本试验选用50 kg左右的"斯格"纯种猪90头,分为抗生素组,对照组,中草药0.5%、1.0%、1.5%组。结果表明:①平均日增重,中草药1.0%组与对照组存在显著性差异(P0.05)。②中草药各组腹泻率和死亡率与对照组存在显著性差异(P0.05)。③血清白蛋白、尿素氮含量,抗生素组、中草药1.0%、1.5%组与对照组差异显著(P0.05)。碱性磷酸酶活性,中草药各组与对照组和抗生素组存在显著性差异(P0.05)。④抗生素组和中草药各组IgA水平极显著高于对照组(P0.01);中草药1.0%、1.5%组的IgM水平,分别比对照组提高了50.0%和54.54%,差异显著(P0.05)。⑤1.0%中草药组日增重、采食量、白蛋白等指标比其他中草药组有升高的趋势。 相似文献