紫花苜蓿盐诱导类受体蛋白激酶基因MsSIK1的克隆及功能分析

【目的】对紫花苜蓿（Medicago sativa L. cv. Zhongmu-1）stress-induced protein kinase gene 1（MsSIK1）进行克隆与表达研究,了解该基因的分子机制及其应用。【方法】以紫花苜蓿叶片总RNA为模板,根据同源克隆设计简并引物,利用RT-PCR结合RACE技术,获得MsSIK1的编码序列。利用同源性比对进行序列分析。通过SMART网站（http://smart.embl-heidelberg.de/）模拟该基因的蛋白结构。构建MsSIK1的亚细胞定位瞬时表达载体,使用基因枪转化法将MsSIK1与GFP在洋葱表皮细胞中融合瞬时表达并观察其亚细胞定位荧光信号。通过Real time-PCR分析MsSIK1在NaCl、ABA和干旱处理条件下的表达特征。利用农杆菌侵染方法获得转基因拟南芥植株,通过RT-PCR对转基因植株进行表达鉴定,获得转基因植株后,利用转基因株系进行盐处理进而对成苗期转基因拟南芥性状鉴定。在盐胁迫处理下,测定野生型与转基因株系的叶绿素含量、MDA含量进而验证该基因的抗盐功能。【结果】获得MsSIK1编码序列2 478 bp,编码825个氨基酸。该蛋白C端与多种植物激酶具有相当高的同源性,模拟蛋白结构发现该基因具有类受体蛋白激酶高度保守的丝氨酸/苏氨酸结构域、跨膜结构域和富含亮氨酸重复序列的膜外结构域。Real time-PCR分析表明该基因在NaCl、ABA和干旱处理条件下上调表达,其中在盐处理条件下,MsSIK1表达先升高后降低,在处理4 h时达到最大值（约为对照值的7倍）。在干旱胁迫处理时,MsSIK1受诱导表达增强明显,当处理2 h时表达量达到最大值（约为对照值的6倍）;ABA处理时,MsSIK1被诱导表达明显,当处理3 h时表达量达到最大值,约为对照值的6.8倍。MsSIK1与GFP融合瞬时表达的洋葱表皮细胞中的荧光信号主要集中于质膜附近,转化空载体的洋葱表皮细胞中的荧光信号分布于细胞各个部位。转基因植株的RT-PCR鉴定表明,T₁代6个株系中所得到的MsSIK1条带明显、亮度高,且T₁-10中表达量最高;但在野生型中检测不到该条带,说明外源基因已经整合到拟南芥染色体中并能遗传到子代。成苗期转基因拟南芥盐处理后发现T₃-2、T₃-6、T₃-10转基因株系较野生型植株长势好,说明MsSIK1的转入提高了拟南芥的抗盐性。与对照相比,转MsSIK1拟南芥在NaCl处理下,叶绿素含量下降较少,其中,野生型叶绿素含量降低了77%,T₃-3降低了53%,T₃-6降低了44%,T₃-10降低了35%;同样盐胁迫下,3个转基因株系的MDA含量积累较少,其中,野生型MDA的含量是T₃-10株系的1.3倍。【结论】MsSIK1作为一个类受体蛋白激酶受多种逆境胁迫诱导,该基因的过量表达提高了拟南芥的抗盐性。     

酸枣幼根原生质体的制备

以生长6～9 d的酸枣种子幼根为试验材料,0.7 mol·L-1甘露醇作为渗透压稳定剂、pH值5.5～6.0、28℃恒温水浴条件下,以光学显微镜观察的水解总时间、初始产生原生质体的时间、原生质体产量及细胞碎片量为指标,研究通过酶水解来制备酸枣幼根原生质体的方法.结果表明,在含1％果胶酶+4％纤维素酶R-10+3％纤维素...     

黑枸杞花青素研究进展

目的研究青藏高原黑枸杞花青素对小鼠巨噬细胞RAW264.7的凋亡作用及相关分子机制。方法利用扫描电镜、DAPI和Hoechst染色、流式细胞术、RT-qPCR和Western-blot检测不同质量浓度黑枸杞花青素诱导小鼠巨噬细胞24 h后对细胞形态学、细胞凋亡率、JNK信号通路因子及相关因子mRNA和蛋白表达的影响。结果花青素诱导细胞24 h后未见明显凋亡形态,且细胞数量增多,细胞凋亡率极显著下降(P<0.01);随着黑枸杞花青素质量浓度增加,Caspase-3 mRNA及蛋白表达降低,Bax/Bcl-2 mRNA表达量比值降低,JNK通路因子JNK mRNA及p-JNK蛋白表达降低且呈剂量依赖性;JNK抑制剂组能显著降低JNK通路因子JNK mRNA (P<0.05)及p-JNK蛋白表达(P<0.01);与JNK抑制剂组相比,花青素+SP600125组能显著降低JNK通路因子JNK mRNA (P<0.05)及p-JNK蛋白表达(P<0.01)。结论黑枸杞花青素可能通过JNK通路抑制小鼠巨噬细胞RAW264.7凋亡从而发挥免疫调节作用。     

Job-Shop scheduling based on improved immune cloning algorithm

Parallel immune clone algorithm is proposed based on population coevolution theory and parallel computing affinity of individual at multiple compute nodes. Introducing the immune memory mechanism, the evolution processes of antibody population and memory units are conducted simultaneously, meanwhile, it improves mutual cooperation among antibodies, and ensures solution set approaching optimal solution from the inside of feasible region or infeasible region border. Clone proliferation, high frequency variation and operation of crossover operators increase the chance that better individuals gain affinity maturation by the operation of clone expansion, improve diversity of antibody population distribution, achieve the balance of optimization between depth and range, and ensure the convergence of the algorithm and the diversity of the search range. A computational study for a standard data set is carried out to test the validity of the algorithm, and the effect of algorithm parameters on the results is analyzed. The simulation results show that the global search capability, local search capability, algorithm stability and computing speed of the algorithm are all superior to conventional optimization algorithms such as normal immune clone optimization algorithm, genetic algorithm, etc.     

植物生长促生菌对盐胁迫下水稻种子萌发及幼苗生长的影响

JT-5是从水稻根际土壤中分离得到的1株植物生长促生菌。在不同浓度盐(氯化钠)溶液的胁迫下,JT-5对水稻种子的萌发、幼苗的生长发育有显著的促进作用。水稻种子经菌株JT-5处理后,在第三天的发芽势显著地提高。在盐浓度为50、75、100、125 mmol/L时,JT-5处理组水稻种子的发芽势分别为84.44%、92.22%、80.00%和84.44%,而相应的对照组仅为68.89%、54.44%、35.56%和17.78%;同样浓度的盐胁迫下,JT-5能够有效地促进水稻幼苗根长和苗高的生长,分别比对照处理组的根长长10～90 mm和苗高高10～40 mm;JT-5处理组水稻的不定根数多于对照组1.0～2.6条;经JT-5处理后的优势均随盐溶液浓度的增加呈扩大趋势;苗干重和根的含水量(占鲜重)均高于对照组。     

金毛狗配子体形态学特征的观察

选取国家二级重点保护野生植物金毛狗Cibotium barometz(Linn.)J.Sm.为研究对象,利用光学显微镜观察了其配子体发育的过程,重点讨论了前人未观察到的毛状体,并给出了其幼孢苗的人工繁殖方法.金毛狗具有较高的观赏价值和药用价值.笔者初步探索了孢苗发生率以及环境条件的关系,为金毛狗人工繁殖和经济开发积累了有效的经验和方法.     

沧州地区近40年来气温和降水量的变化趋势分析

采用线性分析方法和R／S方法相结合,对沧州地区年降水量和年均气温的变化特点和未来趋势进行分析。结果表明,该地区气温和年降水量的变化特点与未来趋势不尽相同。气温在过去35a间呈上升趋势,变化率为0．394℃／10a,同时Hurst指数为0．848,说明当地未来气温增加的趋势可能还将持续;过去51a的年降水量呈现减少趋势,但降水量的Hurst指数仅为0．53,说明当地年降水量在未来有可能发生改变或者将保持基本稳定。     

小麦纹枯病化学防治药剂的筛选

为了筛选小麦纹枯病的高效防治药剂,对多种化学药剂进行了室内毒力测定、盆栽试验和田间防效试验.室内毒力测定结果表明,烯唑醇、井冈霉素、敌力脱、适乐时对小麦纹枯病菌(Rhizoctonia cerealia)抑菌效果较好,EC50均小于1 mg/kg;敌萎丹、立克秀、甲基托布津、扑力猛、五氯硝基苯、三唑酮和退菌特对小麦纹枯病菌也有较好的抑菌效果,EC50均在10 mg/kg以下.盆栽试验结果表明,21%复方适乐时FS1 : 500包衣和2.5%适乐时FS 1:500包表处理防效最好,分别达到84.23%和83.52%;其次为12.5%烯唑醇WP 1 : 625拌种和2%立克秀WS 1 : 500拌种,为81.49%和77.23%;3%敌萎丹FS 1:500包衣、2.5%扑力猛FS 1:500包衣、15%三唑酮WP 1:500拌种和20%井冈霉素SP 1:500拌种也有较好的防效,平均防效均大于60%.大田试验结果表明,返青期3%敌萎丹FS 1:500包衣和12.5%烯唑醇WP 1:625拌种防效最好,防效分别为55.43%和51.51%;收获期白穗率调查结果发现,12.5%烯唑醇WP 1:625拌种防效最好,达84.63%;其次为3%敌萎丹FS 1:500包衣和15%三唑酮WP 1:500拌种,防效分别达到73.36%和72.31%.收获期产量调查结果表明,3%敌萎丹FS 1:500包衣、21%复方适乐时FS 1:500包衣和2.5%适乐时FS 1:500包农处理增产效果较好,分别达到13.81%、12.34%和11.50%.从防治效果和增产效果综合考虑,敌萎丹、复方适乐时、适乐时是较好的种子处理剂.     

我国春玉米区弯孢叶斑病菌生理分化初步研究

利用鉴别寄主技术对黑龙江省、吉林省、辽宁省和河北省玉米弯孢叶斑病菌的生理分化进行研究。结果表明,20个菌株的致病性分为5种类型,其中强和中等致病类型主要分布在辽宁省的瓦房店、吉林省的公主岭和河北省的保定市。     

非农就业、基本社会保险选择对宅基地流转的影响——基于2017年CRHPS追踪调查数据的实证研究

为了解非农就业情况以及不同基本社会保险选择是否会对农户宅基地流转的意愿产生影响,基于中国农村家庭追踪调查(CRHPS)2017年数据,运用Logit模型实证检验非农就业、基本社会保险以及二者之间的交互项对宅基地流转的具体影响。结果表明:农民从事非农就业会显著促进农民进行宅基地流转,而且非农就业时间增加、非农就业程度提高会加剧这种流转意愿。农民参加不同的基本社会保险会对宅基地的流转产生不同的影响;参加新型农村合作养老保险或新型农村合作医疗保险的农民会在新农合或新农保的“枷锁效应”下被锁定在农业经营生产中,从而抑制宅基地流转,参加城镇养老保险或城镇医疗保险的农民倾向于进行宅基地流转,结果正向显著。非农就业与基本医疗保险的交互项说明非农就业时间的增加或非农就业程度的提高会缓解新农合或新农保对农民的“枷锁效应”。最后提出保障农户非农就业福利、注重农户劳动力转移质量以及关注农户与非农就业的相合性等建议。