猪卵巢颗粒细胞分离培养及鉴定

为构建猪卵巢颗粒细胞的体外培养体系,研究毒素的生殖毒性奠定基础,采用机械分离法从1～5 mm的卵泡中提取猪卵巢颗粒细胞,苔盼蓝染色计算细胞存活率,Giemsa染色和结晶紫染色观察细胞形态,免疫细胞化学染色方法检测促卵泡刺激素受体(FSHR)表达来鉴定颗粒细胞,MTT方法测定细胞生长曲线.结果显示分离提取的猪卵巢颗粒细胞存活率为65%左右,细胞纯度＞97%,细胞结构完整,边缘分明,胞核呈卵圆形位于靠近胞质的中央.另外细胞生长曲线表明,细胞从24 h开始进入对数生长期,并于96 h达到最高密度,之后进入平台期.分离培养的颗粒细胞生长状态良好,且细胞纯度＞97%,是理想的适合进行毒素生殖毒理学的细胞培养体系.     

乳房炎奶牛金黄色葡萄球菌毒素基因的检测及PFGE分型研究

作者针对临床及亚临床乳房炎奶牛乳汁中金黄色葡萄球菌分离株的毒素基因进行检测和脉冲场凝胶电泳(PFGE)基因分型,比较2种类型乳房炎金黄色葡萄球菌分离株的差异.无菌法采集奶样,采用国际标准方法从中分离金黄色葡萄球菌,用多重PCR方法扩增nuc基因和mecA基因以确证金黄色葡萄球菌(SA)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA).进一步用PCR方法检测SA的各种毒素基因(SEs、ETs、TSST 1和PVL基因等).利用限制性内切酶Sma Ⅰ对SA基因组DNA进行酶切和PFGE分析,最后利用BioNumerics软件进行聚类分析.结果:19.3％(23/119)的临床乳房炎奶样和14.8％(26/176)的亚临床乳房炎奶样确定为金黄色葡萄球菌阳性样品,分别从中分离鉴定出43株和26株金黄色葡萄球菌,其中临床乳房炎分离株中有5株为mecA基因阳性.临床乳房炎奶牛奶样中检测到SA的SEA、SEB、SED、SEJ和PVL毒素基因,检出率分别为3.8％(1株)、11.5％(3株)、19.2％(5株)、7.7％(2株)和31.2％(10株);亚临床乳房炎奶牛乳样中仅检测到SA的SEA和PVL毒力基因,检出率分别为7.0％(3株)和84.1％(37株).表明临床与亚临床乳房炎奶牛乳汁中SA菌株携带的毒素基因不一样,SEs可能是临床乳房炎菌株的重要致病基因,PVL可能是亚临床乳房炎菌株的重要致病基因.69株SA使用Sma Ⅰ酶切分型后,可分为7个大簇、50个基因型,来源相同的SA分型后大部分位于同一簇内.临床乳房炎奶牛乳汁中检测到MRSA菌株,PVL基因在亚临床乳房炎中的检出率为临床乳房炎的2.7倍.PFGE方法能较好的区分临床乳房炎和亚临床乳房炎的SA分离菌株.     

奶牛饲喂不同精粗料比TMR对排泄粪尿和氮磷的影响

将18头荷斯坦产奶牛随机分为试验6组,每组3头,试验Ⅰ～Ⅵ组奶牛依次饲喂不同精粗料比（精料：粗料）的TMR1（20∶80）、TMR2（30∶70）、TMR3（40∶60）、TMR4（50∶50）、TMR5（60∶40）、TMR6（70∶30）的日粮,探讨不同精粗料比TMR对奶牛粪尿、N、P的排泄量和CH4释放量的影响。结果,饲喂TMR4与饲喂TMR1和TMR6的奶牛相比,每头奶牛每年CH4释放量减少15.20Kg和89.84Kg;粪便排泄量减少1.37t和1.41t;N降低3.71kg和17.50kg;P减少2.59kg和4.07kg,比TMR1FCM提高10.54%（P〈0.05）;乳脂率增加9.67%（P〈0.05）;乳糖增加7.26%（P〈0.05）,能减少奶牛对土壤水源及空气的污染,提高奶牛的生态效益和经济效益。     

如何提高动物解剖学及组织胚胎学的教学效果

根据动物解剖学及组织胚胎学的课程特点,结合教学实践,在教学过程中运用情景联想法、口诀记忆法、归纳总结法等教学方法,多媒体教学与板书教学相结合,并联系后期课程进行讲授,从而达到拓宽学生知识面、提高动物解剖学及组织胚胎学教学效果的目的。     

《动物解剖学》教学改革与思考

为了激发学生对《动物解剖学》课程的学习兴趣,提高该课程的教学效果,对《动物解剖学》的教学内容、教学方法和考核方式进行了探索和教学实践。在教学内容上,引入该学科新的进展和新技术,变机械记忆为理解记忆;综合应用多媒体技术,增强教学的直观性;采用多种形式、多层次的考核方式激发学习动力。通过各种改革,提高了学生的学习积极性和兴趣,同时也提高了教学质量。     

骨质疏松症治疗药物的研究进展

骨质疏松症是以骨量减少、骨的微观结构退化为特征,致使骨的脆性增加并易于发生骨折的一种全身性骨骼疾病,是当前严重危害人类特别是绝经妇女和老人的疾病之一.近年来出现了许多预防和治疗骨质疏松症的药物,极大地推动了骨质疏松症理论基础的完善和临床治疗研究.就该领域的研究进展进行了简要综述.     

4种方法检测奶牛隐性乳房炎的结果比较及分析

采用BMT法、苛性钠法、酒精法及pH值法对重庆市永川区12个奶牛场的120个乳样进行奶牛隐性乳房炎的检测,结合临床调查和实验室的病原菌分离鉴定,采取常规统计学方法及方差分析,探讨4种诊断方法的准确性和一致性.结果表明,4种诊断方法的隐性乳房炎阳性检出率分别为18.3%、38.3%、51.7%、41.7%,阳性率平均达37.5%,说明永川区奶牛隐性乳房炎感染较重,这与永川区奶牛养殖业处于发展的初期阶段,粗放管理、消毒不严格、机器挤奶为主直接相关;多重比较P<0.01,说明4种方法诊断结果差异极显著;其中,苛性钠凝乳法与牛乳pH值检测法诊断结果接近一致,BMT法与其他3种诊断方法其诊断结果差异较大.实验室的病原分离鉴定初步证实,4种方法中苛性钠凝乳法与牛乳pH值检测法的诊断结果比其他方法更为准确和灵敏.     

禽I型副粘病毒广西分离株F基因序列及毒力的研究

对源于鸡、鹅、鸽的 9株APMV_1广西分离株及我国常用的中发型疫苗毒株I系 (Mukteswar株 )的F基因N_端前段进行了RT_PCR扩增 ,产物进行核苷酸序列测定 ,用基因分析软件DNAStar进行分析并与已发表的其它参考毒株进行比较。结果发现 ,广西分离株在裂解位点的氨基酸组成和排列均符合强毒株的特征 ;根据F基因绘制的系谱树来看 ,广西鸡和鹅分离株都归属于基因型VII,证实近年来广西流行的基因型与国内其他地区的相同 ;并发现中发型疫苗毒株I系 (Mukteswar株 )也属于基因型VII。研究还对分离株进行了常规的毒力和致病性测定试验 ,并与根据F基因序列特征判定的结果相比较 ,结果发现其中一株鸽源和两株鹅源分离株根据常规方法判定的结果与毒株在临床上的致病性不相符 ,而根据F基因序列特征判定的结果与毒株在临床上的致病性相一致     

Study on Biological Characteristics and Drug Sensitivity of Haemophilus parasuis Isolated in Sichuan Province

The study was aimed to investigate the biological characsteristics and drug sensitive tests of Haemophilus parasuis isolated in Sichuan province.This paper reported the biological characteristics,16S rRNA gene PCR and drug sensitive test of the isolates by technique of microbiological and molecular biology.The results showed that the isolates had micro anaerobic and could produce satellite phenomenon,the isolates were just same in biochemical characteristics with field isolates in other area.All the isolates amplified 821 bp 16S rRNA gene.And drug sensitive tests showed that the isolates were highly sensitive to cefradine,ampicillin,cefradine,amoxicillin,cefaclor,ofloxacin,cefotaxime and furadantin,the sensitive rate was 75.61% to 87.80%,but the isolates were high resistance to lincomycin,carbenicillin,enrofloxacin,amikacin and sulfamethoxazole,and multiple-drug resistance was found among the isolates,the number of bacterial strains resistant to antibiotics were more between five and eight,the resisitance strains were 21.95% to 30.49%,7 isolates were even resistant to 13 antibiotics.The results showed the phenomenon of drug resistance of the isolates was very serious.     

红芪粗多糖对免疫应激断奶仔猪生长性能、血清生化指标和抗氧化能力的影响

本试验旨在研究红芪粗多糖(CHPS)对细菌脂多糖(LPS)刺激断奶仔猪生长性能、血清生化指标和抗氧化能力的影响。选择健康的32头断奶仔猪,按体重相近的原则随机分为5组:对照组(基础饲粮)、LPS组(基础饲粮+LPS)、CHPS低剂量组(基础饲粮+LPS+200 mg/kg CHPS)、CHPS高剂量组(基础饲粮+LPS+800 mg/kg CHPS),每组8个重复,每个重复1头仔猪。试验期为28 d。试验期间记录每头猪日采食量,试验第1、21、28天称重,计算各阶段平均日采食量、平均日增重和料重比。试验第21天,LPS组以及CHPS低、高剂量组仔猪腹膜注射100μg/kg BW LPS,对照组注射等量的生理盐水,注射后3 h,前腔静脉采血,分离血清,测定血清生化指标。结果表明:1)与对照组相比,应激期(22～28 d)LPS组平均日采食量和平均日增重均极显著下降(P<0.01);血清碱性磷酸酶、谷丙转氨酶活性及甘油三酯、总胆固醇、尿素氮和丙二醛含量均显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),一氧化氮合酶活性显著下降(P<0.05)。2)与LPS组相比,CHPS高、低剂量组平均日采食量和平均日增重均显著升高(P<0.05);CHPS低剂量组血清甘油三酯、总胆固醇和丙二醛含量均显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01);CHPS高剂量组血清碱性磷酸酶活性极显著降低(P<0.01)。结果提示,在饲粮中添加一定剂量的CHPS能够有效缓解LPS所致免疫应激引起的断奶仔猪生长性能下降,可降低血清甘油三酯、总胆固醇、丙二醛含量及碱性磷酸酶活性,说明CHPS可以有效缓解LPS所致仔猪免疫应激。