种牛精液冷冻和保存效果研究进展

随着养牛业的高速发展,牛精液液体保存技术的研究也在逐步深入。人工授精技术降低了养殖成本,加速了肉牛的繁殖改良,同时还促进了育种工作的进程,合理有效的使用人工授精技术能够提高牛的饲养效益。与此同时,优良的种牛精液品质也是改良的关键,有实验结果表明：遗传、气候环境、饲养管理等因素会影响牛的精液品质[1],同时强制运动也是决定种牛精液品质的关键环节[2]。合理的精液冷冻与保存不仅能发挥优良的精液品质,同时也为人工授精技术的发展提供保障。本文从牛精液新型冷冻保护剂和损伤修复、牛精液冷冻保存添加剂、牛冷冻精在人工受精中的应用、冷冻保存的发展前景等方面总结了我国牛精液冷冻保存技术的研究和发展,以期对今后种牛精液冷冻和保存技术发展有所帮助、提供参考。     

不同生境种源盐地碱蓬幼苗生长发育对盐分胁迫的响应和适应

为探讨盐地碱蓬适应不同生境的生理机制,研究了不同盐分处理(0,200和400 mmol/L的NaCl;0,200和400 mmol/L的KCl)对盐碱地和潮间带两种种源盐地碱蓬的生长发育、植株离子积累、叶片光合荧光指标和植株抗氧化系统的影响。结果表明,与对照相比,200 mmol/L的NaCl处理使盐地碱蓬的地上部鲜重、干重、肉质化程度显著增加,400 mmol/L的NaCl处理和两种浓度的KCl处理使盐地碱蓬的鲜重、干重、肉质化程度显著降低。不同浓度的NaCl处理使盐地碱蓬地上部Na⁺和Cl^-含量显著增加,K⁺含量显著降低;不同浓度的KCl处理使盐地碱蓬地上部K⁺和Cl^-含量显著增加,Na⁺含量显著降低。200 mmol/L的NaCl处理对碱蓬叶片的净光合速率、光合放氧速率、F_v/F_m值和φPSⅡ值无明显影响,而KCl处理则使碱蓬叶片各光合荧光参数显著降低。低浓度(200 mmol/L)NaCl处理使碱蓬SOD活性显著增加,但高浓度(400 mmol/L)NaCl处理和两种浓度的KCl处理均使碱蓬SOD活性显著降低。两种离子的不同浓度处理均使碱蓬POD活性显著增加。潮间带种源盐地碱蓬的地上部鲜重、干重、肉质化程度、光合荧光参数、地上部离子含量(Na⁺和Cl^-)均显著低于盐碱地生境。钾盐对盐地碱蓬的胁迫效应显著大于钠盐。盐碱地生境种源盐地碱蓬对盐分胁迫的响应显著高于潮间带。     

罐装奶粉真空度形成影响因素研究

奶粉营养成分丰富,为避免罐装奶粉在货架期内出现胀罐情况,保证产品货架期的稳定性,一般采用气调包装并在罐内形成一定真空度。为研究罐装奶粉真空度影响因素,制备罐装奶粉并测试不同条件下罐内的真空度。通过对罐装奶粉进行长期跟踪测试,研究存储时间、存储温度、气体比例对罐内真空度形成的影响。结果表明,随着存储时间增加,罐内真空度呈现先快速增大后趋于平缓的趋势;在存储前期,37℃、47℃条件下的样品形成的真空度较常温更大;二氧化碳（CO2）的比例对罐内真空度形成的影响显著。     

甘露寡糖对肠道健康和免疫的调控机制及其在畜禽生产中的应用

过去几十年来,由于饲用抗生素在畜牧养殖业中的滥用,导致畜禽正常的肠道菌群被破坏并引起肠道细菌耐药性和环境污染等一系列问题,严重损害了畜禽的肠道健康。同时,近年来集约化养殖已经成为畜牧业的发展方向,养殖规模越来越大,如何有效地提高畜禽免疫力已然成为重点的研究方向。健康的肠道是保障畜禽健康生长的基础,保持健康的肠道菌群,能有效提高动物机体的免疫力和抗病能力。甘露寡糖是一种绿色新型饲料添加剂,作为一类功能性寡糖,具有改善畜禽肠道健康和提高免疫应答等作用。在猪生产中,添加甘露寡糖能够提高断奶仔猪的生长性能和免疫力。在家禽生产中,添加甘露寡糖能够改善家禽肠道菌群并提高生产性能和肉品质。作者主要介绍了甘露寡糖的结构及理化性质、改善肠道健康和免疫调控机制及其在断奶仔猪、育肥猪、蛋鸡和肉鸡生产中的应用效果。重点总结了甘露寡糖对畜禽肠道健康和免疫的调控机制及免疫途径,旨在为甘露寡糖在肠道健康和免疫调控方面的深入研究及其在畜禽养殖中的应用提供理论依据。     

蜂胶对细菌脂多糖刺激下奶牛乳腺上皮细胞炎症相关基因mRNA转录水平和紧密连接蛋白的影响

本试验旨在研究中国蜂胶乙醇提取物（ethanol extract of Chinese propolis,EECP）对细菌脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）刺激下体外培养奶牛乳腺上皮细胞炎症相关基因mRNA转录水平和紧密连接渗透性的影响。EECP中总酚酸和总黄酮含量测定采用福林酚法和硝酸铝法,并建立LPS诱导奶牛乳腺上皮细胞（bovine mammary epithelial cells,MAC-T）炎症模型,采用CCK-8法测定EECP对MAC-T相对增殖率的影响,利用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）评估EECP对LPS诱导的MAC-T细胞炎症相关因子（IL-6、IL-8、TNF-α和IL-1β）相对mRNA转录水平;以及对紧密连接蛋白（occludin、ZO-1）相对mRNA转录水平进行检测,并进一步利用免疫荧光技术对紧密连接膜蛋白进行定位,确定EECP对LPS诱导MAC-T细胞炎症紧密连接渗透性的影响。结果显示：EECP中总酚酸含量为106.35 mg没食子酸当量（GAE）·g^-1、总黄酮含量为320.85 mg芦丁当量（RE）·g^-1;CCK-8结果显示EECP的安全浓度为0~15 μg·mL^-1,并可有效提高LPS刺激下MAC-T的活力;LPS刺激显著增加了细胞炎症相关因子IL-6、IL-8、TNF-α和IL-1β mRNA的转录量（P<0.001）;但2.5~15.0 μg·mL^-1 EECP预处理显著降低了IL-6、IL-8、TNF-α和IL-1β mRNA的转录量;与此类似,LPS刺激显著抑制了紧密连接蛋白基因（occludin、ZO-1）mRNA的转录量（P<0.01）,而EECP预处理后紧密连接蛋白基因（occludin和ZO-1）mRNA的转录量显著增加（P<0.05）;免疫荧光染色试验也证实EECP能通过上调紧密连接蛋白（occludin、ZO-1）的表达,缓解LPS诱导的乳腺上皮细胞屏障功能紊乱。该结果证实,EECP对细菌脂多糖诱导奶牛乳腺上皮细胞炎症具有良好的保护作用,这为利用中国蜂胶预防奶牛乳腺炎提供了试验基础。     

HPLC法测定大鼠血浆中乙酰胆碱酯酶抑制剂N-甲基巴婆碱含量研究

目的:建立一种灵敏度高的高效液相色谱法,测定大鼠血浆中乙酰胆碱酯酶抑制剂N-甲基巴婆碱的浓度.方法:流动相为甲醇∶水∶三乙胺(65∶35∶0.1);血浆样品用乙酸乙酯萃取;检测波长:270 nm;流速:1.0 mL/min.结果:线性范围为10-400 g/mL,线性关系良好,最低检测限为5 g/mL.N-甲基巴婆碱日内RSD≤3.7％,日间RSD≤3.1％,提取回收率为98.03％～105.42％(n=5).结论:本方法灵敏度高,精密度、重现性好,适用于N-甲基巴婆碱在生物样本中的检测和药理、药动学研究.     

6×His-猪生长激素融合基因在家蚕生物反应器中的表达

将通过PCR技术改建并去除了信号肽的猪生长激素cDNA基因克隆入转移载体pBacPAK His1,构建了重组转移载体pPGH0 30 ,进而将pPGH0 30与线性化病毒Bm BacPAK6共转染BmN细胞 ,成功获得了猪生长激素重组杆状病毒Bm BacPAK6 pgh。感染重组病毒的细胞可溶性蛋白SDS PAGE和Western blot分析结果显示 ,感染细胞蛋白电泳带的 2 5kD处有 1条猪生长激素特异带。Bm BacPAK6 pgh的BmN细胞培养液接种家蚕 5龄幼虫和蛹 ,感病幼虫与蛹血淋巴的SDS PAGE和Western blot分析结果表明 ,6×His 猪生长激素融合基因在家蚕体内得到了表达 ,特异性条带大小约为 2 5kD。     

紫花苜蓿品种根部特性与持久性和生物量的关系

植物的根部特性与其持久性和生产性能关系密切,但以往关于紫花苜蓿不同品种的相关研究报道较少。本试验通过对10个紫花苜蓿品种第10年的根部特性、生物量、持久性进行研究发现:不同品种紫花苜蓿根部特性差异显著(P＜0.05),其中,新疆大叶和公农1号根茎和主根粗壮,侧根数多;Super 7、Jindera、Eureka根茎和主根细小,侧根数少;L33、美国大叶、SD-006、甘农1号、Ranbule根部特性各指标居中。紫花苜蓿的根部形态指标与持久性和地上生物量显著相关,主根尤其是根茎越健壮侧根数越多,持久性越好;主根和根茎越粗壮,地上生物量越高。综合评价认为,新疆大叶和公农1号根部各形态指标均优于其他品种,地上生物量和持久性好,可以选择为适宜的紫花苜蓿品种在甘肃河西地区推广种植。     

不同粗蛋白水平饲粮对围产期奶水牛生产性能和生殖激素的影响

为研究饲粮不同粗蛋白水平对围产期奶水牛生产性能和生殖激素的影响,试验选择18头围产期奶水牛,随机分为3组,进行为期45 d的饲养试验,饲料配方参考NRC(2001)进行调整。对照组粗蛋白(CP)水平为17.5%,Ⅰ组CP水平为16.5%,Ⅱ组CP水平为18.5%。结果表明:(1)与对照组相比,Ⅰ组干物质采食量(DMI)提高12.89%,Ⅱ组降低12.41%,差异显著(P<0.05)。Ⅰ组CP、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)表观消化率较对照组分别提高7.02%、19.85%和24.89%,差异不显著(P>0.05)。(2)3.5%标准乳(FCM)产量和饲料转化率(FE),与对照组相比,Ⅰ组分别降低1.67%和14.81%,Ⅱ组分别降低29.97%和21.16%,差异不显著(P>0.05);乳糖含量Ⅱ组显著低于其他组(P<0.05)。(3)产后15、30 d促卵泡素(FSH)、孕酮(PROG1)、黄体生成素(LH)、雌激素(E2)各组差异不显著(P>0.05)。说明在该试验饲粮结构下,饲粮CP水平为17.5%时产奶量和FE最高,更适宜围产期奶水...     

猪胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白(OMP)5′末端保守区基因的克隆、表达及其免疫活性研究

以猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型25-4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增外膜蛋白(OMP)5′末端保守区基因片段(OMPc),酶切及核苷酸序列分析鉴定后,与原核表达载体质粒pGEX-6P-1进行连接,构建成重组表达载体pGEX-OM-Pc,转入大肠杆菌BL21中,以IPTG进行诱导,SDS-PAGE电泳分析发现,转化了重组质粒的菌株所表达的融合蛋白相对分子量为34 kD,与实际预测相符,命名为GST-OMPc.GST亲和层析柱进行纯化,ELISA方法对纯化蛋白进行检测.结果表明:纯化蛋白GST-OMPc能够与兔抗猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型的阳性血清反应.OMPc蛋白的成功表达为其功能的研究打下基础.