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81.
82.
根据GenBank中牛Th1/Th2(BoTNF-α、BoIFN-γ、BoIL-2、BoIL-4、BoIL-6、BoIL-8、BoIL-10)型细胞因子的基因序列,在保守区设计并合成各自特异引物,并以牛3-磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)基因为内参,采用SYBR GreenⅠ染料以建立实时荧光定量PCR检测方法。将Th1/Th2型细胞因子基因克隆至pMD18-T载体上,转化大肠杆菌DH5α,经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒,作为标准品模板建立SYBR-GreenⅠ荧光定量RT-PCR标准曲线和溶解曲线,并做灵敏性、特异性和重复性试验。对建立的Th1/Th2型细胞因子SYBR-GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR方法进行分析,结果表明牛IFN-α、IFN-β、IFN-γ和GAPDH基因的Ct值与标准品稀释度在1×101~1×108 copies/μL范围分别呈良好的线性关系,相关系数均大于0.991。溶解曲线分析表明产物为特异的单峰,具有较高的灵敏性和特异性,重复性较好。建立了检测Th1/Th2型细胞因子的实时荧光定量RT-PCR方法,为在mR-NA水平对牛Th1/Th2型细胞因子的定量分析奠定了基础。 相似文献
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将768只421日龄海兰白蛋鸡随机均分为2组,分别饲喂添加0和1.5%中药增蛋散的2种饲料,于饲养30、60d时采血和屠宰,测定血样中卵泡刺激素(FSH)、促黄体素(LH)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、雌二醇(E2)、孕酮(P4)、甲状旁腺素(PTH)、环磷酸腺苷(cAMP)等的含量及饲料中粗蛋白和钙的消化率,探讨该散剂促产蛋的作用机制.结果显示,当日粮中添加增蛋散饲喂30、60 d时,蛋鸡血清中FSH、LH、T3、T4、E2、P4、PTH的含量,下丘脑和腺垂体中cAMP含量及饲料中粗蛋白和钙的消化率均有显著提高(P<0.05或P<0.01).本试验结果为该散剂提高产蛋后期鸡的产蛋率,推迟其淘汰期的药理作用提供了实验依据. 相似文献
85.
以CP23重组蛋白为抗原建立检测微小隐孢子虫抗体间接ELISA方法的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
摘要:以在E.coli高效表达的微小隐孢子虫子孢子表面抗原CP23为抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗鼠IgG为二抗,建立了检测微小隐孢子虫抗体的间接ELISA方法。经检测筛选出最佳反应条件为1μg/孔纯化的E.coli表达的CP23抗原包被酶标板,用10%免血清进行封闭,以正常E.coli裂解上清液稀释待检血清。实验表明应用CP23重组蛋白作为诊断C.parvum抗原具有特异性高、抗原易纯化和成本低等特点。 相似文献
86.
草原景观下昆虫群落及种群对生境破碎化的反应 总被引:3,自引:2,他引:3
生境破碎化是制约生物多样性重要的“瓶颈”之一。本研究在已有资料的基础上,论述了影响生物群落结构和种群动态过程的生境破碎化的生物反应特征,以及破碎化生境对生物多样性和种间关系的影响机理及基本理论假说,重点对草原景观下有关昆虫群落结构、丰富度、种群数量与动态、种间关系及群落次生演替等与生境破碎化关系的试验研究进行归纳总结, 提出了在草原环境下进行破碎化生境与昆虫群落和种群发生关系研究的问题及优势条件,指出了种间关系和次生演替与生境斑块格局的关系是草原生物多样性保护研究的关键之一。 相似文献
87.
有效微生物菌群(EV)是一种复合高效微生物制剂,在养殖业上使用EM具有改善饲养环境、降低发病率、提高饲料报酬、增加养殖效益等作用。本研究进行了EM对产蛋鸡应用效果试验。试验表明:EM对蛋鸡生产具有明显促进作用,10周试验表明,以10%比例将EM发酵饲料添加于蛋鸡日粮中,并配合饮用EM发酵水,日均产蛋量提高4.70%,产蛋率提高2.90%,料蛋比下降4.73%,毛利润提高12.79%。 相似文献
88.
通过腹腔途径用体内含有荧光蛋白的蜥蜴利什曼原虫感染BALB/c小鼠,感染后采其脏器做冰冻切片,荧光染料染色后用荧光显微镜观察,并经PCR鉴定,结果显示蜥蜴利什曼原虫感染小鼠后,主要分布于心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏。另外,成功建立了利什曼原虫荧光定量PCR检测方法,并采用该方法检测感染蜥蜴利什曼原虫后BALB/c小鼠体内利什曼原虫的增殖情况,结果显示,感染13 d内,BALB/c小鼠体内蜥蜴利什曼原虫呈波浪状增殖。这一结果为研究蜥蜴利什曼原虫感染人和动物的致病机理和免疫方法及疫苗研制等方面提供了基础理论依据。 相似文献
89.
为研究填饲对鹅丝裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)mRNA表达水平的影响,本实验克隆了鹅MAPK14部分编码区序列,并用荧光定量PCR方法检测了填饲对四川白鹅和朗德鹅肝组织MAPK14基因表达量的影响。结果表明:获得鹅MAPK14基因cDNA 951 bp序列,可编码316个氨基酸残基。经分析,鹅MAPK14部分核苷酸序列与原鸡MAPK14基因的同源性为94.8%,对应的氨基酸同源性为99.7%;荧光定量PCR检测发现,无论在对照组还是填饲组,四川白鹅的MAPK14表达量均高于朗德鹅,填饲能显著上调MAPK14 mRNA在2个鹅品种中的表达丰度。结果提示,填饲能够引起鹅肝组织中MAPK14表达丰度显著增加,且该影响存在显著的品种差异。 相似文献
90.
舍饲和放牧BMY牛血液生化指标比较 总被引:2,自引:0,他引:2
[目的]为了解不同饲养管理条件下,BMY牛血液生化指标的变化情况,以到达补充BMY牛的基础性资料,为BMY牛的人工饲养、疫病防治提供理论依据的目的。[方法]采用试剂盒对20头不同饲养管理条件下的BMY年母牛的血液生化指标进行了检测。[结果]显示:舍饲牛的STB、A/G、LDL、GLU、Crea和P等指标显著高于放牧组,放牧牛的GLO、ALT、AST/ALT、GGT和TG等指标显著高于舍饲牛(P<0.05),TP、HGB、ALP、BUN、URIC、T-CHOL、Ca、HDL在两组间差异不显著(P>0.05),舍饲牛的血液生化指标的变异系数要明显小于放牧牛。[结论]舍饲BMY牛的血液生化指标明显要优于全放牧条件下的BMY牛。 相似文献