用于构建双价禽流感DNA疫苗的双目的基因表达质粒的构建及鉴定

为探索构建禽流感双价或多价DNA疫苗的可行性,本研究以本实验室前期研制的禽流感DNA疫苗p CAGGopti HA5为基础[其中含有禽流感病毒(AIV)A/Goose/Guang Dong/1/96(H5N1)的HA基因],将增强型绿色荧光蛋白(eGFP)报告基因作为第二个目的基因,利用双启动子启动、内部核糖体进入位点(IRES)介导以及通过蛋白Linker编码序列连接融合表达两个目的基因的形式,构建了双启动子重组表达质粒pH5-eGFP、IRES介导的重组表达质粒pHIE以及融合表达重组质粒pH6E。并采用脂质体介导将这3种重组质粒分别转染293T细胞,通过间接免疫荧光试验和western blot方法检测HA和eGFP这两种目的蛋白的瞬时表达情况。结果显示,这3种重组质粒均能够正确表达AIV的HA蛋白和eGFP。其中pH5-eGFP表达出两个独立的目的蛋白,而且互相不影响各自的表达和细胞定位;pH6E则以融合形式表达两种目的蛋白,由于HA蛋白具有膜定位信号,所以融合蛋白主要定位于细胞膜上。本研究结果表明,双启动子表达质粒和双目的蛋白融合表达质粒适合用于构建AIV以及其他相关病原的双价DNA疫苗。     

冀中平原奶牛舍温热环境评价及温热参数与生理指标的相关性分析

试验旨在评价冀中平原地区四季奶牛舍的温热环境,并分析温热参数与奶牛生理指标的相关性。选择3栋不同建筑结构的奶牛舍,对各舍温湿度和奶牛的呼吸频率、直肠温度和体表温度等生理指标进行检测。结果显示,奶牛舍四季环境温湿度和温湿指数（THI）变化显著（P<0.05）,其中夏季日均温最高,为28.59 ℃;冬季日均温最低,为1.55 ℃。奶牛夏季每天平均15.5 h遭受轻度热应激,6.0 h遭受中度热应激;冬季每天平均12.0 h遭受轻度冷应激。除冬季外,各季节不同牛舍的温度和THI均未表现出显著差异（P>0.05）。相比带矮墙或卷帘的棚舍,仅设顶子的棚舍夏季平均温度要高0.80~1.27 ℃,冬季低1.36~1.84 ℃。另外,夏季奶牛各项生理指标极显著高于其他季节（P<0.01）,且夏季不同舍奶牛的呼吸频率和直肠温度均表现出显著差异（P<0.05）,体表温度各季节差异均达显著水平（P<0.05）。从环境温湿参数与奶牛生理参数的相关性分析可看出,各项生理参数（呼吸频率、直肠温度和体表温度）与THI、环境温度均呈显著正相关（P<0.05）,但与湿度未表现出显著相关性（P>0.05）。本研究可为奶牛舍环境的评价提供科学依据,并通过环境温热参数的检测推断奶牛生理状况,为应激的发生及预警提供数据。     

法氏囊活性肽对鸡体增重及饲料转化率的影响

把不同剂量的法氏囊活性肽 (BS)冻干粉与传染性法氏囊病 (IBD)活苗混合后 ,对 2 1日龄SPF鸡滴鼻点眼 ,同时另选一批同样生长状态的鸡 ,在颈部皮下接种IBD细胞毒油苗 ,同时肌肉注射上述不同剂量法氏囊活性肽 ,观察法氏囊活性肽对鸡生长性能的影响。结果发现 :免疫后7d ,活苗 0 2mLBS组增长最快 ,比免疫对照组多增 82 5 % ,并且饲料报酬高。但从整个试验期看 ,0 4mLBS组增重效果较好 ,比免疫对照组多增 1 9 8% ,并且有较高的饲料转化率。而肌肉注射BS组中 ,高剂量 (0 8mL)BS组的增重效果一直很好 ,比对照组总增重平均多增 7 2 3 % ,并有较高的饲料报酬。这说明滴鼻点眼或是肌肉注射 ,BS都有促生长的作用     

Finite mixture model analysis of microarray expression data on samples of uncertain biological type with application to reproductive efficiency

Common goals of microarray experiments are the detection of genes that are differentially expressed between several biological types and the construction of classifiers that predict biological type of samples. Here we consider a situation where there is no training data. There is considerable interest in comparing expression profiles associated with successful pregnancies (SP) and unsuccessful pregnancies (UP) in model and farm animals. Successful pregnancy rate is known to be much higher in embryos generated by in vitro fertilization (IVF) than in nuclear transfer (NT) embryos, and higher under induced ovulation for large follicles (LF) than for small follicles (SF). The tasks of identifying genes differentially expressed between SP and UP, and predicting SP for future samples are not well accomplished by comparing IVF and NT, or LF and SF. A suitable method is finite mixture model analysis (FMMA), which models each observed class (IVF and NT, or LF and SF) as a mixture of two distributions, one for SP and one for UP, with different known or unknown proportions (here known to be 0.50 SP for IVF and 0.02 SP for NT). The means of the two distributions differ for the differentially expressed genes, which we identify via a likelihood ratio test. We confirm by simulation that FMMA strongly outperforms hierarchical clustering and linear discriminant analysis using the known class labels (NT, IVF). We apply FMMA to a real data set on IVF and NT embryos, and compute their posterior probabilities of SP, which confirm our prior knowledge of the SP proportions for IVF and NT.     

新型饲料添加剂——木寡糖

长期以来,饲用抗生素在保障动物健康、促进动物生长、提高饲料利用率等方面效果明显,给畜禽生产带来了巨大的经济效益。但随着人民生活水平的提高和健康意识的加强,饲用抗生素所带来的抗药性和有害残留等问题也日益受到人们的重视,于是各国政府纷纷出台措施,严格控制抗生素作为     

两种饲喂技术对仙湖肉鸭配套系种鸭生产性能的影响

试验以1860只仙湖鸭父母代雏鸭随机分成Ⅰ、Ⅱ两组,每组930只,在相同的饲养管理条件下,对种鸭4周龄限饲与8周龄限饲两种饲喂技术进行对比试验。其中Ⅰ组为对照组,采用8周龄限饲饲喂技术;Ⅱ组为试验组,采用4周龄限饲饲喂技术。经过64周试验,结果表明,8周龄限饲技术下的种鸭产蛋率、种蛋合格率、受精率与孵化率虽略高于4周龄限饲技术,但耗料多、产蛋少、经济效益低,因此4周龄限饲技术优于8周龄限饲技术。     

中国野桑蚕人工饲料育研究初报

为解决野桑蚕作为试验昆虫在室内饲养难的问题,以江苏启东野桑蚕为材料,用家蚕低成本饲料进行了饲育研究。在催青期温度25℃、饲育温度27~25℃以及光照条件1~2龄12 L 12 D、3~5龄15 L 9 D的条件下,野桑蚕人工饲料育的2龄起蚕率为31.3%,幼虫期20~48 d,雌、雄蛹体质量分别为0.45、0.25 g,蛹期17~23 d,雌蛾平均产卵266粒,产滞育卵的母蛾占45.0%。研究结果表明,人工饲料育能够使野桑蚕顺利完成世代发育。     

牛基因组DNA两种提取方法的比较研究

研究哺乳动物基因组DNA的水煮抽提法，并将传统的酚仿抽提法和水煮法进行比较，水煮法即通过对细胞的煮沸和冷却，使细胞破裂、蛋白变性，从而获得用于PCR扩增的模板DNA的方法。通过电泳分析和PCR扩增检测了所提取基因组DNA的完整性、可行性。检测时采用3对引物对2种方法提取的DNA进行了PCR扩增，同时对冷冻保存的基因组DNA也进行了扩增检测。结果表明：水煮法提取基因组DNA是一种快速、简便、经济、高效的方法。     

牛磺胆酸的解热作用及其机制的研究

了解牛磺胆酸对发热大鼠体温的影响,并研究其解热作用机理.分别以细菌内毒素、异体蛋白和2,4-二硝基酚致热大鼠,采用荧光分光光度法测定大鼠下丘脑组织中去甲肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）和5-羟色胺（5-HT）含量;ELISA法测定下丘脑组织中肾上腺素E2（PGE2）含量.牛磺胆酸对细菌内毒素和2,4-二硝基酚所致发热大鼠的体温具有显著的降低作用,而对蛋白胨所致的发热体温作用时间较短;给药组下丘脑中的NE、DA、5-HT和PGE2的含量显著低于对照组.试验证明牛磺胆酸具有显著的解热作用,其作用机理与影响下丘脑组织中NE、DA、5-HT和PGE2的含量有关.     

震荡寻方向意欲往何方--大豆一季度回顾及二季度展望

春节前后，由于全球大范围内出现禽流感疫情，对CBOT黄豆及国内的大豆现期两市场均产生了极为不利影响．加上南美大豆产区天气良好及国内豆粕消费处于淡季，由此终结了2005年12月的反弹上涨行情，廷续长期下跌趋势，期价再次进入震荡走低寻求支撑的通道（图1）。但通过以下分析．笔者对全球大豆市场第2季度的走势抱着乐观的态度．认为大豆价格震荡整理后将会出现反弹行情。