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百合脱毒及病毒鉴定的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
简述了百合病毒病研究现状,并对百合的脱毒技术--茎尖培养、珠芽培养、化学处理和热处理,以及主要病毒鉴定方法——指示植物法、电镜技术、酶联免疫法和分子生物学技术进展等方面进行了系统的介绍。 相似文献
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西伯利亚百合病毒RNA提取及RT-PCR方法的比较与优化 总被引:2,自引:0,他引:2
在对感染西伯利亚百合的CMV、LSV、LmoV 3种病毒的检测上,对4种常见的RNA提取方法及影响RT-PCR体系的因素进行了比较研究.改良优化了的RNA提取方法,不需用DEPC水处理和高温烘器皿,省去液氮研磨过程,采用该法从百合叶片中提取总RNA,整个过程及后继反应均不需使用RNasin,降低了成本,同时提取的RNA质量高,适于后期RT-PCR的检测,更适合于百合幼嫩叶片和试管苗RNA的提取.运用一步法,建立了CMV、LSV、LMoV 3种病毒的RT-PCR优化体系,最优反应体系为:M-MLV 5×Reaction.Buffer 1 μL、10×PCR buffer0.5 μL、2.5 mM dNTPs(each)0.8 μL、10 pmol/μL下游引物0.2 μL、10 pmol/μL上游引物0.2μL、M-MLVRT 200 U/μL 0.1 μL、2.5 U/μL Taq polymerase 0.1 μL;0.4 μL感病材料RNA提取液,剩余部分用无菌双蒸水补足,使反应体系达到10μL. 相似文献
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