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以郑州地区西瓜花叶病病叶分离物──西瓜花叶病毒2号(2-WMV-)为毒源,从繁殖寄主西葫芦病叶中分离、鉴定了病毒。以病毒基因组RNA为模板,逆转录合成cDNA,通过多聚酶链式反应(PCR),从cDNA中扩增和克隆了病毒外壳蛋白(CP)基因,其中包括3’端非编码区,完成了全部核苷酸序列分析。CP基因全长1099个苷耷酸,其中编码区长903个核苷酸,编码301个氨基酸,3’端非编码区长196个核苷酸。Z-WMV-2CP基因的编码区比A-WMV-2,U-WMV-2两株系的CP基因编码区分别长出60个核耷酸,多编码20个氨基酸。与两个株系相比,编码区的核昔酸序列同源性分别为88.5%和87.0%,氨基酸序列同源性分别为90.0%和88.7%,3,端非编码区的同源性分别为68.3%和71.8%。若不考虑Z-WMV-2多出的60个核苷酸及20个氨基酸,则上述同源性依次为95.4%、93.7%、96.4%、95.0%、88.8%和93.4%。构建了含WMV-2CP基因的大肠杆菌表达载体,经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,表达出了与天然病毒外壳蛋白分子量相同的蛋白。 相似文献
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感染土传小麦花叶病毒的小麦花叶病的电子显微镜研究 总被引:2,自引:0,他引:2
经对山东省崂山地区获得的自然感病的小麦病叶进行了电镜的观察和研究。指出在早春时节小麦返青以后很快开始显示症状,沿叶脉出现短的褪绿色条纹,植株生长受阻,矮缩,黄化以至不能抽穗。该病毒粒子为细长的杆状,长度120~270nm,直径为18~20nm。值得注意的是在狭窄的胞质区可经常见到聚集的病毒颗粒,其中大部分病毒附着在膜结构上。当横切时病毒颗粒呈电子透明的空心,围绕这个空心周围是一个着色很深的直径约为10nm的核酸环,围绕这个核酸环周围是一个密度不大的蛋白外壳。病毒颗粒的聚集大多与很多弯曲的管状物的形成聚集相伴随着。也看到了完全由病毒颗粒所组成的晶体状聚集物。根据以上所述,该病原鉴定为土传小麦花叶病毒。 相似文献
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马铃薯Y病毒复制酶基因的转基因烟草对PVY的抗性 总被引:1,自引:0,他引:1
将农杆菌LBA4404/pAL4404、pBin438双元载体上的NIb基因正义序列、反义序列、5''-缺失序列及新霉素磷酸转移酶基因(NPTⅡ)转入烟草品种NC89的染色体,获得抗卡那霉素的转化再生烟草植株.经抗性筛选、PCR检测、无性扩繁和大量重复抗病鉴定,结果表明,转化烟草植株DNA中整合了外源目的基因;NIb基因正义序列、5''-缺失序列转化再生植株中,均出现抗10μg/mlPVY侵染的植株;NIb基因反义序列转化再生植株仅部分抗5μg/mlPVY侵染.ELISA分析认为抗性植株无病毒累积.初步筛选出对PVY侵染具有较高抗性的转基因烟草植株. 相似文献
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华南番木瓜环斑病毒的鉴定、提纯与性质的初步研究 总被引:2,自引:0,他引:2
为害华南番木瓜的病毒以番木瓜科(Caricaceae)和葫芦科(Cucurlitaceae)中若干植物为寄主,范围狭窄。病毒的稀释终点为10-2~10-3;热灭活点为50~55℃;体外存活期为8~16小时。病毒颗粒长约600~800nm、宽约10~15nm的略为弯曲的细丝。在感病番木瓜组织的细胞内,电镜观察到典型的风轮状内含体(pinwheel inclusion body)。病毒具有马铃薯Y病毒组成员的典型特征,可认为是国外报道的番木瓜环斑病毒的中国株系,初步命名为华南番木瓜环斑病毒。 相似文献
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抗青枯病转多肽抗生素基因烟草的选育 总被引:2,自引:0,他引:2
分别于温室和田间条件下,对转单价apidaecin、shiva-I及双价apidaecin+shiva-I基因的14个烟草株系材料的T1和T2后代群体进行青枯病抗性筛选鉴定及农艺性状评价。温室盆栽试验中,于5~6叶龄期采用伤根法进行接种。接种后15天,转apidaecin、shiva-I和apidaecin+shiva-I基因烟草的病情指数较对照分别下降了16.3%、15.2%和59.7%。田间自然病圃筛选鉴定结果表明:B43-5-4、B43-5-1、B43-5-2、B43-5-3和B43-4-1等5个株系材料病情指数较起始品种K326降低21%~70%,且农艺性状与起始品种K326无显著差异。 相似文献
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为了提高马铃薯对细菌性病害的抗性,以来源于膜翅目昆虫的新多肽抗生素Apidaecin为目的基因,以多肽抗生素Shiva-Ⅰ为对照,对多肽抗生素在马铃薯抗青枯病基因工程中的应用进行了研究。采用农杆菌介导的方法,用含有Apidaecin Shiva-Ⅰ双价基因的植物表达载体pBinPRSIHbI对马铃薯栽培品种米拉、中-5-1、Favorata和尼勒克进行了遗传转化试验,共获得卡那抗性再生植株31个,获得了最佳的植株再生分化体系和遗传转化条件。PCR检测及RT-PCR分析表明,目的基因已成功地整合到转基因植株的染色体上并在转基因马铃薯中进行了转录。 相似文献
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结球甘蓝(Brassicaoleracevar.capitataL.)转化时,子叶柄、下胚轴受农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)侵染后,芽再生的激素配比研究表明,中甘8号在激素配比为BA4.0mg·L-1+IAA(1.0~2.0)mg·L-1时,子叶柄和下胚轴芽的诱导率为100%;在BA1.0mg·L-1+ZT1.0mg·L-1+NAA(0.10~0.15)mg·L-1时,子叶柄芽的诱导率为60%左右;在BA1.0mg·L-1+ZT1.0mg·L-1+NAA(0.15~0.20)mg·L-1时,下胚轴芽的诱导率为100%。激素配比与品种间互作效应小,以因素主效应为主。与未侵染外植体芽诱导比较,认为结球甘蓝受农杆菌侵染后,离体芽诱导需要较高的生长素质量浓度。 相似文献
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多肽抗生素apidaecin和Shiva-I在烟草胞外液中的稳定性 总被引:2,自引:0,他引:2
本研究利用电泳分析法和活性分析法测定了多肽抗生素apidaecin和Shiva-I在烟草胞外液中的稳定性.apidaecin的活性半衰期为1.6h;Shiva-I的活性半衰期为8.0h.apidaecin的C-末端酰胺化后稳定性增加l倍,而酰胺化对Shiva-I的稳定性影响不大.利用MALDI-TOF质谱分析了两种多肽抗生素在烟草胞外液中的降解位点,apidaecin有两个蛋白酶降解位点,而Shiva-I有5个.利用蛋白酶抑制剂法测定了烟草胞外液中降解两种多肽抗生素的蛋白酶种类.apidaecin主要被丝氨酸蛋白酶和金属蛋白酶降解;5hiva-I可被丝氨酸蛋白酶、金属蛋白酶、巯基蛋白酶和精氨酸蛋白酶降解. 相似文献
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