水牛骨骼肌卫星细胞的分离培养和生物学特性分析

为了给骨骼肌修复和心肌治疗方面的机制研究提供平台,试验以水牛胎儿为材料建立了一种简便高效的水牛骨骼肌卫星细胞体外分离和培养方法,采用机械和酶消化相结合的方法获取水牛骨骼肌卫星细胞,进行体外培养和形态观察.结果表明:体外成功分离培养出水牛骨骼肌卫星细胞;细胞在生长培养液中形态良好、生长稳定、增长快速并能进一步分化形成肌管.结果说明水牛骨骼肌卫星细胞能够在体外进行增殖和分化并保持其生物学特性.     

长期连作及强还原土壤灭菌处理对烤烟根际土壤真菌群落的影响

烤烟是重要的经济作物,连作障碍已成为限制其产业发展的主要原因之一,研究长期连作及强还原土壤灭菌处理(RSD)对烤烟根际土壤真菌群落的影响,为缓解烤烟连作障碍提供理论基础。选取烤烟连作 3、5和 7年根际土壤分析理化性质和真菌群落演替规律。选取烤烟连作 3年样地实施强还原土壤灭菌处理(RSD),与未处理(3年)对比,以此评价 RSD修复效果。结果表明:(1)连作处理显著降低烤烟根际土壤 pH及总碳和总氮的含量,RSD处理较未处理(3年)显著提升土壤总碳和总氮的含量。(2)测序结果表明,连作处理显著促进真菌群落 Alpha多样性,主坐标轴分析和聚类分析表明连作处理显著改变真菌群落结构,真菌群落相对丰度的变化及 FUNGuild数据库比对结果表明,连作处理促使病原菌丰度增加。(3)与未处理(3年)相比,RSD处理显著降低真菌群落多样性和病原菌丰度。(4)相关性热图分析表明病原菌相对丰度与 pH、总碳和总氮含量呈显著负相关。因此,长期连作烤烟导致根际土壤质量退化,造成病原菌增多;RSD处理对连作土壤的质量和真菌群落具有良好的修复效果。     

猪圆环病毒2型ORF2和ORF1-2串联基因重组腺病毒对小鼠的免疫效果

为了研究含有猪圆环病毒2型(porcine circovirus type2,PCV2)基因的重组腺病毒作为基因工程疫苗的潜在应用价值,利用本实验室构建的PCV2的ORF2和ORF1-2串联基因的重组腺病毒对小鼠进行了免疫并对其免疫效果进行了研究。分别用表达ORF2和OFR1-2基因的重组腺病毒Ad-ORF2、Ad-ORF1-2经肌肉途径免疫Balb/c小鼠,对免疫后小鼠的血清抗体和脾淋巴细胞中各细胞亚群的比例及其增殖反应、自然杀伤活性和特异性杀伤活性进行了检测和比较。结果表明,用表达ORF2基因和ORF1-2串联基因的重组腺病毒Ad-ORF2、Ad-ORF1-2经肌肉途径免疫Balb/c小鼠后,随着免疫次数的增加,小鼠产生的针对PCV2ORF2基因的特异性抗体水平不断升高,第3次免疫后2周达到最高,但第3次免疫后4周有所下降;免疫重组腺病毒的试验组小鼠的脾淋巴细胞增殖活性、CTL杀伤活性和NK细胞杀伤活性与免疫空载体的对照组和免疫PBS的对照组比较均有显著的差异(P<0.05)。本研究为PCV-2基因工程疫苗的深入研究及应用奠定了基础。     

NH4^＋浓度对有机废水厌氧发酵产氢的影响

[目的]利用人工有机蔗糖废水通过厌氧发酵产氢气,考察水体中NH4＋浓度（0～8 000 mg/L）对厌氧发酵产氢的影响。[方法]分析废水中糖降解速率,比产氢率和产氢率。[结果]结果表明当NH4＋浓度在1 200～2 400 mg/L时,对微生物的厌氧发酵产氢是有利的,但当NH4＋浓度大于4 800 mg/L时,对厌氧发酵产氢有明显的抑制作用,其中对其发酵液相产物也有明显的影响。     

IBDV超强毒株、强毒株及疫苗株的快速鉴别诊断

【目的】利用限制性酶切位点的特异性,鉴别IBDV超强毒株、强毒株及疫苗株。【方法】根据IBDVVP2基因的共保守序列设计1对引物,分别以IBDV超强毒株GX8/99、陕西分离株、强毒株(XZ-1、ZZ-1、JL、GX-2、JS-2、SD-1、SD-3、HeN-4、ZJ-1、JX-2、JS-30)和疫苗株(B87、NF8)的VP2保守序列为模板,采用RT-PCR方法扩增VP2基因的共保守序列,并构建IBDV不同毒株的重组质粒。用AhaⅠ/StuⅠ和BamHⅠ/NspⅠ2组限制性内切酶分别对超强毒株、强毒株及疫苗株的重组质粒进行酶切鉴定。【结果】扩增出了IBDVVP2基因中的共保守序列,其长度为802 bp。超强毒株能被AhaⅠ/StuⅠ切出327 bp的片段,而强毒株及疫苗株则能被BamHⅠ/NspⅠ切出270 bp的片段。【结论】此种RT-PCR结合限制性内切酶酶切的鉴别方法能够很好的区分IBDV超强毒株与强毒株和疫苗株。     

广西园林菟丝子发生危害情况调查与分析

【目的】明确广西园林植物种类及菟丝子寄主、种类和分布,掌握其发生危害规律,为园林菟丝子防控提供科学依据。【方法】2011-2013年,每年4-10月,以南宁市为中心选择16个有代表性市（县）进行园林树木及地被植物感染菟丝子实地调查,记录不同树木感染菟丝子种类、生育期、危害的植物学特征及程度,计算感染率和危害指数。【结果】调查鉴定广西园林树木88种,其中菟丝子寄主62种,发生率达70.45%,62种寄主分属39科,51属,其中桑科最多有6种,其次是豆科、大戟科各5种。广西分布有3种菟丝子,分别为日本菟丝子、中国菟丝子和大花菟丝子,还有一种无根藤,它们分别分布在16、9、7和5个市（县）,寄主分别达到38、20、15、11种,分别占寄主的61.29%、32.25%、24.19%和17.74%。南宁市和防城港市菟丝子种类分布最多,3种菟丝子和无根藤均有感染。中国菟丝子主要以种子繁殖危害,每年3月下旬开始萌芽侵染为害,日本菟丝子、大花菟丝子及无根藤主要以藤茎繁殖危害,4月初开始生长,11月果实成熟。寄主危害指数较高的园林树木依次是八月桂、福建茶、龙船花、黄素梅、小叶榕、非洲茉莉,危害指数达4.01-5.48,属于易感树木。【结论】调查鉴定广西园林树木88种,其中菟丝子及无根藤寄主共62种,分属39科,51属;广西分布有3种菟丝子,分别为日本菟丝子、中国菟丝子、大花菟丝子,还有一种无根藤,其中日本菟丝子为优势种类,为重点防控对象。每年4-10月是菟丝子及无根藤主要侵染危害期,也是防除的重点时期。     

小斑鸠鸟的“痴恋”

重庆市沙区杨梨路230号。45岁的李卫忠拎着两袋橘子气喘吁吁走进自家小院——不等他站稳，一个娇小的身影直扑入怀。     

铜绿假单胞菌对龙葵中Cd的亚细胞分布和化学形态的影响

通过盆栽实验,研究Cd胁迫下铜绿假单胞菌对龙葵中Cd的亚细胞分布和化学形态的影响。盆栽实验中Cd浓度设为0、25、50、100 mg·kg~(-1),采用差速离心法、化学试剂逐步提取法对龙葵中的Cd进行亚细胞分布和化学形态研究。研究结果表明,接种铜绿假单胞菌处理中龙葵叶的Cd含量为未接种的1.14~1.60倍,促进植株中的Cd由根部向茎叶的转移。接种处理可提高根中细胞壁组分的Cd比例,及叶中可溶组分的Cd含量,降低植株根和叶中细胞器组分的Cd比例高达45.74%。此外,接种铜绿假单胞菌可提高龙葵叶中低活性形态Cd的比例。因此,接种铜绿假单胞菌可通过促进龙葵中Cd向地上部分的转移,改变植株中Cd的分布和形态比例,加强龙葵对Cd的耐受性。这些结果有助于重金属污染土壤中植物-微生物共生关系的进一步研究。     

猪圆环病毒2型DNA疫苗对小鼠的免疫效果

【目的】构建一种猪圆环病毒2型DNA疫苗,并对其免疫效果进行了研究。【方法】将表达猪圆环病毒2型ORF2基因的1套真核表达元件系统克隆插入到质粒载体pMD-18T,构建成pMD-18T-ORF2,转入E.coliDH5α,提取质粒,经肌肉注射途径对Balb/c小鼠分别在第1,14和28天进行免疫,用生理盐水代替pMD-18T-ORF2进行相同操作,作为对照组,通过监测免疫小鼠体液免疫和细胞免疫的状况,评估分析pMD-18T-ORF2免疫的效果。【结果】初次免疫后小鼠血清中特异性抗体水平持续升高,在第14天达到峰值,加强免疫抗体水平无显著变化;试验组脾淋巴细胞体外增值能力较对照组低(P<0.01);免疫pMD-18T-ORF2的小鼠脾脏NK细胞杀伤活性极显著高于对照组(P<0.01);试验组小鼠脾脏中Th细胞含量与对照组小鼠无显著差异(P>0.05),Tc细胞含量显著高于对照组(P<0.05),B细胞含量较对照组有所减小,但差异不显著(P>0.05)。【结论】构建的pMD-18T-ORF2对小鼠能产生相应的免疫反应,且细胞免疫的效果较体液免疫更显著,非特异性免疫亦有提高。