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为建立能灵敏、高效、准确诊断猪圆环病毒3型(PCV3)的检测方法,并运用该方法研究PCV3传播特性及组织嗜性,根据GenBank中PCV3 ORF2基因(MF631813.1)的核苷酸序列,设计合成PCV3的引物和探针,通过退火温度以及引物、探针用量和特异性等优化,建立了PCV3微滴式数字PCR检测方法.试验结果表明建立的猪圆环病毒3型微滴式数字PCR检测方法具有较好高的灵敏性、重复性和特异性,最低能检测到1μl 16.35拷贝的质粒标准品,可用于猪圆环病毒3型的早期诊断. 相似文献
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为更加快速及准确地检测猪细小病毒(PPV)与猪圆环病毒3型(PCV3)两种病毒,笔者依照GenBank上已发布的PPV、PCV3基因序列,选取PPV的NSP-1基因和PCV3的ORF2基因分别设计一对引物,通过对退火温度、模板浓度和引物量等条件的优化,建立了可以同时检测PPV和PCV3的双重PCR方法。应用该方法对采自成都周边的67份临床样品进行检测,结果与单项PCR检测的结果一致,且重复性好;该方法检测的最低拷贝数为3.12×105copies/μL,敏感性强。 相似文献
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