鸵鸟禽流感

鸵鸟禽流感张常印（南京动植物检疫局南京２１０００９）刘学贤（江苏省家禽科学研究所扬州２２５００３）近年来，我国的鸵鸟饲养业发展很快，各地分别从非洲、北美或欧洲国家引进了多批种鸵鸟，不论是非洲鸵鸟，还是澳洲鸵鸟（鸸鹋）或美洲鸵鸟（雷鸟），都可感染禽流感...     

新孢子虫病

新孢子虫病张常印秦贞奎王伟达冯斌王新武（南京动植物检疫局２１０００９）（国家动植物检疫局１０００２６）新孢子虫是最近发现的家畜和伴侣动物的一种原虫样的寄生虫，感染的宿主谱很广，目前仅知胎盘是传播途径，自１９８８年以来，在许多国家都有发生新孢子虫病的报...     

西尼罗热病毒RT-PCR检测方法的建立

参考Genebank发表的西尼罗热病毒(West Nile virus，WNV)E糖蛋白基因序列，自行设计合成一对引物，对WNV进行RT—PCR扩增，产物经琼脂糖电泳分析，呈现一条约400bp的条带，将其克隆入pMD18-T—Vector载体中，并进行序列测定，与已发表的WNV基因比较发现，核苷酸的同源性为99．7％，证实为WNV的E基因，通过对样品多次检测，都能扩增出一条约400bp的条带，表明该方法比较稳定。     

含GFP报告基因的伪狂犬病病毒上海株gE-gI基因部分缺失株的构建

在伪狂犬病病毒（pseudorabies virus,PRV)上海株gI基因和gE基因克隆鉴定的基础上，进一步构建了转移载体质粒，为PRV－SH的gE－gI基因部分缺失毒株的构建作准备，将gI和gE基因克隆入pUC18中构建pgEI载体，利用gE基因中的酶切位点缺失掉gE基因5′端363bp，并把录色荧光蛋白（GFP）基因表达盒插入到缺失部分。通过酶切鉴定，表明GFP基因已3插入到pgEI中，构建了含GFP的缺失转移载体pgEI-GFP。用DOTAP试剂将pgEI-GFP转染感染了PRV－SH株的兔肾（RK）细胞，待出现80％以上的细胞病变时收获病毒，并以GFP为标志，通过蚀斑法得到纯化重组病毒，命名为PFDE／DI。     

欧洲控制猪圆环病毒病项目简介

猪圆环病毒病(Porcine Circovirus Diseases,PCVD)在欧洲每年使养猪业损失6亿欧元,在北美造成的损失是每周1千万美元.     

从病死鸵鸟中分离鉴定出O35血清型大肠杆菌

从南京两个鸵鸟场死亡鸵鸟的内脏以多株细菌，经生化试验确定自肝脏的两细菌为大肠杆菌，动物试验揭示这两株大肠杆菌对ＳＰＦ鸡和小白鼠有不同程度的致死性，药敏试验结果显示这两株大肠杆菌对常用抗菌素的敏感不同，但对复方磺胺和卡那霉素均高度敏感。经血清型鉴定，这两株大肠杆菌血清型为Ｏ３５。     

新城疫病毒Ulster株血凝素-神经氨酸酶基因的克隆与鉴定

新城疫病毒Ｕｌｓｔｅｒ株经ＳＰＦ鸡胚增殖和超速离心纯化后，以酚－ＳＤＳ法提取其基因组ＲＮＡ，作为反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）的模板。根据其已发表的Ｆ和ＨＮ基因核苷酸序列，合成一个长为３０ｍｅｒ的寡核苷酸（位于Ｆ基因内）和一对分别长为２８、３０ｍｅｒ的寡核苷酸（位于ＨＮ基因两侧）分别作为反转录引物和ＰＣＲ引物。扩增反应产物经琼脂糖凝胶电泳分析，出现一条长为１．９３ｋｂ的特异性条带，与预期相符。并将此特异性条带克隆入质粒载体ｐＧＥＭ－３Ｚｆ（＋）中，并经限制性核酸内切酶分析（ＲＥＡ）。ＲＴ－ＰＣＲ和ＲＥＡ结果证实其为新城疫病毒Ｕｌｓｔｅｒ株的血凝素－神经氨酸酶基因。