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1.
陆地棉栽培品种的种子无菌发芽1~3天。将萌动种子的顶端分生组织培养在无激素或附加低浓度激素MS基本培养基上,直接再生完整小植株。从顶端分生组织到再生植株所需的最短培养时间约10天。顶端分生组织供体种芽的萌芽天数及其所连接的胚轴长度对植株再生频率有明显影响,但与品种的关系较小,不同品种均能获得再生植株。应用基因枪轰击法将CPTⅠ基因和NPTⅡ基因的重组质粒导入到棉花茎尖分生组织,培养获得卡那霉素抗性株。  相似文献   
2.
转Bt-CpTI-GNA基因棉花的研究   总被引:3,自引:2,他引:3  
采用农杆菌介导法将外源三价抗虫基因(Bt-CpTI-GNA)导入常规棉花品种中,获得转基因再生株,分子检测表明外源基因已在棉花体内表达,并遗传给后代材料。PCR分子检测与转化的标记基因和外源目的基因抗性三者极有规律性。其所携带的基因在转基因棉花中有分离现象,这可能是外源基因整合到受体棉株体内“基因沉默”而引起所致。  相似文献   
3.
多糖污染是从田间水稻叶片和未成熟种子等高含糖组织中提取高质量RNA的主要限制因素.我们介绍一种简单经济的RNA提取方法,它适合从水稻叶片和未成熟种子这些富含多糖的组织中提取总RNA.这种方法可以克服产率低和质量低的问题.RNA提取后经过电泳和分光光度计分析结果表明,每克水稻组织总RNA产率在520 μg到800 μg之间,OD260/230比值大于2.0,OD260/280比值大于1.9.提取的RNA可以用于体外反转录cDNA、mRNA分离和基因表达系列分析(serial analysis of gene expression,SAGE)库的构建.  相似文献   
4.
转基因棉花纯合系的获得和遗传分析研究   总被引:27,自引:0,他引:27  
研究表明,携带有外源卡那霉素抗性(Npt-Ⅱ)基因的棉花子代幼苗在含卡那霉素(1000mg/L)的培养基上能够较为正常地生长,在外观上与对照有着明显的差异。据此建立了一种鉴定转基因棉花后代种子纯度的简易方法。利用该方法对转基因植株后代卡那霉素抗性和棉铃虫抗性之间的关系进行了研究。同时,还对转基因棉花纯合系的获得和外源基因的遗传稳定性进行了探讨。  相似文献   
5.
影响大白菜离体再生及基因转化的因素研究   总被引:6,自引:1,他引:5  
以耐热大白菜42号自交不亲和系的子叶为外植体再生及 研究了几种因素对大白菜植株再生的影响和农杆菌介导法转CpTI基因的条件,含0.1mg/LNAA,1.0-2.0mg/LCPPU,5.0-10.0mg/LAgNO3的MS培养基较适合于大白菜42号自交不亲和系的子叶离体培养再生植株。测定了在含不同激素组合的培养基上离体27d后的子叶的内源激素含量,在不定芽诱导培养基上子叶内源IAA、ABA含量分别比  相似文献   
6.
农业生物技术产业化发展状况及趋势   总被引:3,自引:0,他引:3  
朱祯 《中国农业科学》2001,34(Z1):61-67
介绍了全球农业生物技术产业发展状况,分析了我国农业生物技术的发展现状,提出了对我国农业生物技术产业化发展的几点建议.  相似文献   
7.
在众多玉米转化方法中,农杆菌法是很有发展潜力的手段之一,它具有诸多优点:操作简便,一次性处理材料量大,成本低,可转化的外源DNA长,且外源基因大多为单拷贝插入.  相似文献   
8.
玉米优良自交系转基因受体系统建立及转化后的筛选与再生   总被引:11,自引:0,他引:11  
通过对培养基和培养条件的筛选和改进 ,提高了诱导玉米优良自交系幼胚产生胚性愈伤组织 ,建立转基因受体系统的效率。通过比较试验 ,确定了潮霉素筛选的浓度和方法。PCR检测证明 ,目的基因已整合到玉米基因组中。  相似文献   
9.
棉花无菌苗的制备和选择是农杆菌介导法转化中的先决条件之一,适宜的无菌苗龄和下胚轴部位是否能促进转化作用,提高转化效果,本文就此进行了研究和探讨。1材料和方法1.1材料 棉花品种为冀合321。外源基因为中国科学院遗传所提供的三价抗虫基因( BT+ CPTI+GNA)。1.2方法 农杆菌介导法将外源三价抗虫基因导入棉花中,种苗培养基为1/2MS+琼脂6. 0%pH5.8用常规法种无菌苗,其它转化方法同常规法。无菌苗龄的制备。隔天播种棉花无菌苗,连续播种 10d:2d、3d、4d、5d、6d、10d。 下胚…  相似文献   
10.
豇豆胰蛋白酶抑制剂转基因棉花的获得   总被引:22,自引:10,他引:22  
利用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导法将豇豆胰蛋白酶抑制剂(Cow-peaTrypsinInhibitor,CpTI)基因转移进入棉花(GosypiumhirsutumL.)。棉花幼苗的下胚轴与携带有CpTI基因和Npt-Ⅱ基因的根癌农杆菌共培养,在选择培养基上诱导出了卡那霉素抗性(Kmr)愈伤组织。选择Npt-Ⅱ阳性的胚性愈伤组织在胚状体诱导培养基上进行胚状体诱导,继而在分化培养基上进行植株分化,最终获得了再生棉花植株。经Npt-Ⅱ分析、PCR及Southern检测证明,外源CpTI基因和标记基因(Npt-Ⅱ基因)存在于转化棉株及其后代中。抗棉铃虫(Heliothisarmigera)生物活性检测表明转基因植株后代具有明显的抗棉铃虫能力。  相似文献   
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