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简单序列重复(Simple sequence repeats, SSR)在茶树遗传与育种研究中具有重要的作用,基于4300 DNA分析系统的SSR发掘具有通量高、准确和灵敏等特点,已被用于许多物种的分子标记研究,但在茶树的相关研究中尚未见报道。本研究应用单因素试验和L9(34)正交设计试验对影响茶树SSR-PCR的主要参数进行优化,建立了适合于4300 DNA分析系统的茶树SSR-PCR反应体系:1.0 μL DNA(25 ng·μL-1),0.2 μL M13F-F、0.2 μL R和0.4 μL IR-M13F,0.8 μL dNTPs(25 mmol·L-1),1.0 μL 10×Buffer(含Mg2+),0.1 μL Ex-Taq聚合酶(5 U·μL-1),无菌水定容至10 μL。所有引物浓度均为1 μmol·L-1。同时,本研究还证明,可以以自行配制的6.5%聚丙烯酰胺凝胶溶液(acry:bis=29:1)替代4300 DNA分析系统指定凝胶溶液,检测SSR位点。 相似文献
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为研究外源草酸(Oxalic acid,OA)对脐橙果实抗采后绿霉病的诱导效应和抗氧化能力之间的关系,并筛选出外源草酸处理的适宜浓度。以‘龙回红’脐橙果实为试验材料,使用0(清水对照)、12.5、25.0、50.0 mmol·L-1草酸浸泡10分钟后接种指状青霉(Penicillium digitatum),通过分析病斑直径筛选出外源草酸处理的最适浓度,并测定总酚和类黄酮含量、抗氧化酶活性和丙二醛(Malonaldehyde,MDA)含量及其动态变化,探讨外源草酸诱导脐橙抗采后绿霉病的作用机制。结果表明,12.5、25.0、50.0 mmol·L-1草酸处理诱导脐橙抗绿霉病的诱导效果分别为16.26%、25.22%和17.36%,25.0 mmol·L-1草酸处理诱导效果显著高于另外两组。25.0 mmol·L-1草酸处理可以显著提高果实抗坏血酸过氧化物酶(Ascorbate peroxidase,APX)、过氧化物酶(Peroxidase,POD)、多酚氧化酶(Polyphenol oxidase,PPO)的活性,增加总酚和类黄酮的积累,提高自由基清除能力,抑制MDA的积累,从而减轻脐橙绿霉病的发生。25.0 mmol·L-1草酸处理提高了脐橙对采后绿霉病的抗性,可能与草酸诱导提高脐橙抗氧化能力密切相关。 相似文献
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