精子抗原基因在猪生殖道及成熟精子中的表达特性

【目的】揭示若干精子抗原基因(SPAG1、SPAG5、SPAG6、SPAG11C和SPAG11E)在梅山公母猪生殖道及成熟精子中的mRNA时空表达规律。【方法】利用RT-PCR技术分析各基因在生殖道和精子中组织表达谱,利用半定量RT-PCR分析其在初生至150d梅山公猪睾丸中的发育性表达特性。【结果】5个基因在梅山公母猪生殖道组织中呈现不同的表达特性。其中SPAG1在睾丸中表达丰度最高,在精囊腺、前列腺、附睾体、子宫角和输卵管呈现中等丰度表达,而在附睾尾、子宫颈和卵巢的表达信号较弱。SPAG5在睾丸中表达丰度最高,在前列腺、附睾体和子宫颈中表达信号较弱。而SPAG6在睾丸中高丰度表达,在输卵管中呈现中等丰度表达,在子宫角的表达信号很弱。SPAG11C在附睾体和睾丸中高水平表达,而SPAG11E则在附睾体和附睾尾中低水平表达。在成熟精子中只有SPAG11E有mRNA表达。SPAG1、SPAG5、SPAG6和SPAG11C基因在公猪睾丸中发育性表达分析表明,总体上所检测的4个精子抗原基因的表达水平都随着日龄增加而提高,但存在一些差异。其中SPAG1和SPAG11C呈现相似的表达规律,在初生和30日龄时表达相对较低,但在60、90、150日龄都有显著提高(P0.05)。而SPAG5在初生和30日龄时表达也相对较低,在60和90日龄时均有显著提高(P0.05),但150日龄时略有下降,但差异不显著。SPAG6在初生和30日龄时表达水平很低,至60日龄有显著提高(P0.05),90日龄时维持这一水平,而到150日龄时则有显著下降(P0.05)。【结论】SPAG1、SPAG5、SPAG6、SPAG11C和SPAG11E在梅山公母猪生殖道组织广泛表达,在睾丸组织中其mRNA表达水平变化与性发育相一致,SPAG11E在精子中存在低丰度mRNA表达。     

瘦肉型猪育肥后期不同饲喂方式对肉质的影响

试验以瘦肉型杜长上(杜洛克×(长白×上海白))三元杂交猪为试验动物,采用试验猪场育肥后期日粮,在猪平均体重达到55 kg以上时,采用自由采食和限制饲喂(限制日采食量15%)两种饲喂方式,最终同期屠宰(45 d后).研究结果表明:1.与自由采食相比,限制饲喂未显著改变肌肉系水力、熟肉率、pH值、肉色和剪切力(P>0.05),但除剪切力之外的上述各项指标值均略有增加.2.与自由采食相比,限制饲喂未显著改变肌肉中水分、粗脂肪、粗蛋白、灰分、钙、磷的含量(P>0.05),但粗脂肪含量略有下降.3.两种饲喂方式下肌纤维直径差异不显著(P>0.05).4.背最长肌和半腱肌对限饲的反应程度不一致.     

猪CatSperB和CatSperG基因的克隆、表达及生物信息学

【目的】揭示猪CatSperB和CatSperG基因的存在、蛋白的结构特征、进化关系及时空表达特性。【方法】利用电子和分子克隆技术鉴定猪CatSperB和CatSperG基因全长cDNA,并利用定性RT-PCR和荧光定量RT-PCR进行CatSperB和CatSperG基因的时空表达研究。【结果】①分别获得了3 508 bp CatSperB和3 715 bp CatSperG电子转录子,分别包含3 330和3 483 bp开放阅读框,并经TA克隆测序验证,其CDS序列与人、牛、马和狗等的CatSperB和CatSperG基因的序列相似性在80%以上;②CatSperB分子质量为125.79 kD,为稳定蛋白;CatSperG分子质量为133.40 kD,为不稳定蛋白;③CatSperB和CatSperG 都包含 7 个通道蛋白保守的跨膜结构域,CatSperG蛋白C端含一个超螺旋结构,而CatSperB蛋白无明显的超螺旋结构信号;猪CatSperB和CatSperG与牛、狗和马的CatSperB和CatSperG蛋白同源关系较近,与人和小鼠的同源关系较远;④RT-PCR分析表明,CatSperB和CatSperG基因主要在睾丸中表达,但CatSperB在其它组织也有表达信号;⑤CatSperB和CatSperG基因mRNA表达水平在猪性发育的重要阶段,精子发生（60日龄）、初情期（90日龄）和性成熟（150日龄）前后都有显著提高（P＜0.05）。【结论】获得了猪CatSperB和CatSperG基因的cDNA克隆及其一系列生物信息学参数,揭示了CatSperB和CatSperG蛋白含7个保守的跨膜结构域及不同物种间的进化关系,证实CatSperB和CatSperG基因主要在睾丸表达,且其mRNA表达变化与公猪的性发育相一致。     

不同ESR基因型小梅山母猪生长期血清激素浓度变化的特点

本试验对ESR基因AA和BB两种基因型的小梅山母猪生长期内(30~150日龄)血清中E2、P4、GH、FSH和LH的浓度变化进行了研究。结果表明,生长期小梅山猪BB基因型E2和FSH浓度有高于AA型的趋势,在135日龄时显著高于AA型(P<0.05);AA型GH浓度均高于BB型,且在45~130日龄时差异显著(P<0.05),说明发生了ESR基因突变的小梅山猪,其E2、FSH及GH 3种激素的分泌量也发生了改变。这3种激素的协同作用不仅使小梅山母猪表现出发情早、繁殖性能高等性状,而且在一定程度上反映了BB型小梅山母猪产仔多的特性。     

公司治理结构与会计监督问题

现代企业制度是符合社会化大生产要求、适应市场经济运行的“产权清晰、权责明确、政企分开、管理科学”的企业制度。近年来,我国企业制度建设中发生了一系列问题,诸如公司会计信息失真或质量较低;上市公司内部人控制严重等等,均可以从公司法人治理结构不完善上找到缘由。     

瘦肉型猪育肥后期不同饲喂方式对生长性能及胴体品质的影响

育肥后期利用限饲来提高瘦肉率和改善饲料报酬已经是西欧和斯堪的纳维亚国家普遍采用的方法。尽管我国也进行过这方面的研究,但到目前为止仍未在生产中普遍使用。     

流感病毒NA基因的亚细胞定位及抗病毒活性研究

本研究利用神经氨酸酶(Neuramidinase,NA)可诱导机体产生特异性抗体,抑制流感病毒从已感染的细胞释放减少病毒增殖的特点,探索NA基因用于研制抗病转基因家禽的新思路.通过构建NA基因真核表达载体pcDNA3.0-NA和pcDNA3.0/EGFP-NA,转染NIH 3T3细胞后对NA基因进行亚细胞定位研究;用pcDNA3.0-NA转染鸡胚成纤维细胞(CEF),接种新城疫病毒(NDV)后观察CEF细胞形态,研究NA基因抗病毒能力;用pcDNA3.0-NA转染NIH 3T3细胞后提取细胞裂解液,纯化NA蛋白,以不同浓度倍比稀释后,加至铺满单层CEF细胞的96孔板,37℃孵育24h,弃去上清,接种NDV,采用微量细胞病变抑制法研究NA基因的抗病毒活性;间接免疫荧光试验和EGFP融合表达结果显示,NA蛋白定位于细胞质;NDV-CEF细胞病变抑制试验表明重组的NA蛋白具有较强的抗NDV生物活性.