黄蓝状菌几丁质酶基因tfchi1的克隆、表达及抗菌活性

 为研究黄蓝状菌（Talaromyces flavus）几丁质酶性质和作用,通过RT PCR、3′ RACE及5′ TAIL PCR技术克隆了一个黄蓝状菌几丁质酶基因tfchi1,该基因全长为2 561 bp,含有6个内含子,包含一个1 194 bp的ORF,编码397个氨基酸,分子量为43.47 kDa,属于糖苷水解酶第18家族。利用基因重组的方法构建酵母分泌型表达载体pPIC9K/tfchi1,并转化毕赤酵母,筛选得到一株高效表达几丁质酶的工程菌GS TFCHI1 9,甲醇诱导第7 d酶活性最高,达32.29 U·mL-1。SDS PAGE检测纯化重组蛋白的分子量约44 kDa。重组几丁质酶Tfchi1最适反应温度为35℃,最适反应pH值为5.5,在pH 6～8之间稳定。Zn2+、Cu2+对 Tfchi1活性有明显的抑制作用。抑菌活性测定结果显示,Tfchi1可明显抑制敏感植物病原真菌的菌丝生长和分生孢子萌发。该酶在几丁质资源的开发利用和生物防治等领域具有较广的应用前景。     

河北猪繁殖与呼吸综合征病毒HB-3(cz)株N基因变异分析及原核表达

为了给河北地区预防和控制猪繁殖与呼吸综合征提供理论数据。应用RT-PCR方法特异性扩增HB-3(cz)株的ORF7(N)基因片段,将扩增片段克隆入pMD-T载体后测序,应用DNAstar分析软件对序列进行分析,并与GenBank中发表的PRRSV毒株序列进行比较。结果显示:HB-3(cz)株与高热病毒株JXA1、HUB2等及传统河北分离株HB-1(sh)氨基酸同源性高达97.6%,属美洲型毒株。将目的片段克隆入原核表达载体pGEX-6P-1,重组质粒pGEX-N转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下成功获得表达,经Western-blot-ting分析表明:表达的融合蛋白分子量约为39.5 kDa,能与PRRSV的阳性血清发生特异性反应,为PRRSV血清学诊断方法的建立奠定了基础。     

一例包涵体肝炎的诊治

包涵体肝炎是由I群禽腺病毒引起的雏鸡的一种急性传染性疾病。其特征为肝炎、肝细胞内形成核内包涵体、贫血和肌肉出血。已知有12种血清型的禽腺病毒与本病有关。     

河北地区猪圆环病毒二型ORF2基因片段的克隆与原核表达

以PCV2 PK-15细胞毒提取的DNA为模板,用PCR扩增PCV20RF2基因的后部约600 bp片段;对PCR产物回收纯化后与载体pMD19-T进行连接、转化,经酶切和序列分析后亚克隆到原核表达载体pET-32a中,构建重组表达质粒pET-32a-ORF2,转入大肠埃希氏菌B121(DE3)中,以IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE电泳和Western-Blotting分析.结果表明.重组表达质粒在大肠中所表达的融合蛋白相对分子量为40 kDa,Western-blotting分析表明该蛋白具有PCV2抗原性.     

普通高校成教学生思想政治教育探析

普通高校中成教学生的思想政治教育工作是一个薄弱环节。这里既有学校方面的原因 ,也有学生方面的原因。因此 ,必须要从提高学生的科学文化素质和思想道德素质 ,培养社会主义现代化建设合格人才的高度 ,重视成教学生的思想政治教育     

河北猪繁殖与呼吸综合征病毒地方株HB-3（cz）株ORF5基因变异分析

猪繁殖与呼吸综合征（Porcine Reproductive and Respiration Syndrome,PRRS）是近年来新发现的由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的一种猪传染病。PRRSV属套式病毒目动脉炎病毒科成员,基因组全长约15kb,为单股正链RNA病毒,含9个开放阅读框（ORF）,其中ORF5编码病毒糖基化囊膜蛋白（E蛋白）,E蛋白为PRRSV3个主要结构蛋白之一,参与体液免疫和细胞免疫,具有较高的免疫原性和中和活性。不同国家和地区分离株的ORF5基因差异较大。PRRSV有2种基因型,     

白羽肉鸡主要病毒性病原免疫抗体变化

通过对不同日龄AA+白羽肉鸡免疫不同剂量的新流灭活疫苗优瑞康和新城疫活疫苗新必妥或新支二联活疫苗新支妥,测定新城疫、H9亚型禽流感、鸡传染性支气管炎抗体水平,从而为白羽肉鸡养殖制定合理的免疫程序提供参考。     

白羽肉鸡不同免疫程序抗体水平的测定

鸡新城疫(ND)、H9N2亚型禽流感(AI)和鸡传染性支气管炎(IB)是目前威胁我国白羽肉鸡AA+养殖的主要病毒性疾病。鸡新城疫是由新城疫病毒(NDV)引起的急性、高度接触性传染病。非典型新城疫经常发生,但不时也有典型新城疫;低致病性禽流感(H9N2)在我国呈大范围的散发和地方性流行,并且呈现条件性致病特点,当温度忽高忽低、通风不良等饲养管理不善的情况下很容易发生。发病的季节性越来越不明显,且H9N2亚型AI分离毒株间存在差异,呈多态性,毒力越来越强;鸡传染性支气管炎     

绿色天使

从1996年开始,她育苗、挖抗、栽种、浇水、剪枝,几乎一日不离地守护在林边村旁。纤细的树苗伴随着她绿色的梦想,在她眼前一天天长高、长壮、成材……多年来,她累计投入20多万元,植树6万多棵。她就像一位绿色的天使,在戈壁荒山上播撒着绿色的种子,营造着一个郁郁葱葱、生机盎然的美丽家园。     

鸡传染性法氏囊炎的免疫程序及防制措施

鸡传染性法氏囊炎(IBD)是一种急性、免疫抑制性传染病,我国于1979年首次发现,20世纪80年代后期至90年代初期严重流行,引起人们高度重视。这些年来疫苗研制、免疫程序和综合防制方面已经取得不少成果和经验,发病已显著减少,但由于病毒广泛存在,威胁依然很大。