过表达ZmIBH1-1提高玉米苗期抗旱性

【目的】干旱是严重影响玉米生长发育进程的一个重要因素。挖掘玉米抗旱相关基因,通过转基因功能验证和转录组分析,解析关键基因在响应干旱胁迫过程中的分子调控机制,为抗旱分子育种和遗传改良提供理论依据。【方法】以玉米自交系B104（WT）为背景材料,利用农杆菌介导方法构建过表达ZmIBH1-1转基因株系（ZmIBH1-1-OE）;通过对转基因植株进行草铵膦抗性筛选、标记基因和目的基因PCR检测,以及运用实时荧光定量PCR检测目的基因的表达情况,鉴定阳性植株和株系;以WT和ZmIBH1-1-OE转基因株系为材料,通过干旱处理（20% PEG6000）,进行表型鉴定和耐旱生理生化指标测定,验证ZmIBH1-1的抗旱功能;通过对干旱胁迫下玉米4叶期转录组的比较分析,鉴定出差异表达的基因（differentially expressed genes,DEGs）;结合DAP-seq（DNA affinity purification sequencing）分析,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的下游靶基因,利用基因组可视化软件IGV（integrative genomics viewer）分析ZmIBH1-1蛋白结合候选靶基因的位置,然后通过Dual-Luciferase试验验证ZmIBH1-1蛋白与靶基因的调控关系。【结果】通过玉米遗传转化获得12个转化事件;T₃代中,能同时检测到标记基因Bar和目的基因ZmIBH1-1的植株有458个,实时荧光定量PCR检测结果表明,ZmIBH1-1-OE中ZmIBH1-1的表达量显著高于WT,株系3和株系8表达量最高,将其自交获得T₄代转基因株系用于后续试验。在干旱胁迫条件下,ZmIBH1-1-OE株系存活率、叶片相对含水量、叶绿素含量、可溶性蛋白含量及其生理生化指标（超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性）均显著高于WT,说明玉米中过量表达ZmIBH1-1赋予玉米更高的耐旱性。转录组分析结果表明,WT与ZmIBH1-1-OE株系在干旱胁迫下有1 214个差异表达基因;Gene Ontology（GO）功能富集分析结果表明,差异表达基因主要涉及生物过程、细胞组分和分子功能,如在生物过程中主要涉及到光合作用、应激响应、脱水响应等;KEGG富集分析表明,差异表达基因主要参与植物激素信号传导、新陈代谢等过程。结合转录组显著差异表达基因和DAP-Seq分析所得到ZmIBH1-1蛋白的靶基因,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的11个候选靶基因,包括2个钙信号相关基因、3个半胱氨酸代谢相关基因、1个bHLH转录因子、1个应激响应蛋白、1个谷胱甘肽转移酶、1个氧化还原过程蛋白和2个乙烯响应因子;基因组可视化结果显示ZmIBH1-1蛋白可以结合靶基因启动子区;随后通过Dual-Luciferase试验进一步表明,ZmIBH1-1蛋白可以直接作用于11个候选靶基因,其中,ZmIBH1-1蛋白可以促进ZmCa-M、ZmSYCO、ZmbHLH54、ZmGlu-r1、ZmCLPB3和ZmP450-99A2的表达,抑制ZmAGD12、ZmCYS、ZmCYSB、ZmERF-107和ZmEIN3的表达。此外,在干旱胁迫下NAC、WRKY、MYB等转录因子在ZmIBH1-1-OE和WT株系中也存在差异表达。【结论】ZmIBH1-1的过表达可以增强玉米苗期的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控乙烯信号通路中的ZmERF-107和ZmEIN3的表达提高玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控钙信号相关基因ZmCa-M和ZmAGD12增强玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白可能通过间接调控NAC、WRKY、MYB等转录因子响应干旱胁迫。     

水稻插秧机的使用与维修注意事项

水稻插秧机在农业种植中起着重要的作用,在提高水稻种植效率,节省人力、物力资源等方面有着突出的优点。目前,我国大多数农业种植都实现了机械化生产,为农业的发展提供了有力的帮助。然而,在水稻插秧机投入使用过程中,种植人员还不能正确地操作,插秧机的维护保养也不及时,影响了插秧机的安全运行,降低了插秧机的使用寿命。因此,对水稻插秧机的正确使用及其维护保养进行具体的说明。     

赤壁市杉木速生丰产林栽植技术

调查分析了赤壁市杉木栽植情况,结合杉木的生物学特性,对杉木速生丰产林造林地选择、整地、栽植密度、造林方法、抚育管理、间伐等技术措施进行了论述,提出了建议。     

国际化应用型风景园林专业硕士培养模式构建与实践——以湖南农业大学为例

风景园林学科是保持和创造人及其活动与自然世界和谐关系的艺术和科学,国际化应用型专业硕士培养显得尤为重要。文章从就业前景、专业硕士实践需求、职业诉求等方面分析风景园林专业硕士培养的时代背景,以湖南农业大学培养风景园林专业硕士办学条件为基础,按照国际化应用型风景园林专业硕士人才培养要求进行改革并予以实践:围绕"一个源头、双重优化、两项提质、两化双师、三项结合、管理增效"进行教育综合改革;通过"四基地、三平台"建设,完善学位点实践条件建设;通过"风景园林+"的建设思路,凸显农业类院校风景园林教育开放性、综合性、实践性强的特征。文章希望针对农业类院校的自身特征,在专业硕士培养方面做一些有益的探索和改革,为风景园林教育添砖加瓦。     

"陕椒2001"优质高效栽培技术

线椒新品种“陕椒2001”,系西北农林科技大学蔬菜花卉研究所庄灿然研究员主持与宝鸡市农业技术推广中心协作,通过杂交选育而成。2002年2月通过陕西省农作物品种审定委员会审定。每667m~2产干椒260～350kg,适应性广,商品性     

牙克石市联合收割机跨区作业现状及发展

联合收割机跨区作业是指各小麦主要产区之间 ,存在地理上纬度差 ,自然形成了由南到北的麦熟时间差 ,利用这个时间差组织联合收割机跨区作业流动收获。这是我国在市场经济条件下加快麦收进度 ,提高机械利用率 ,促进农业机械化发展 ,增加农民收入 ,夺取粮食丰产丰收所采用的重要手段。是政府部门转变职能 ,强化服务、信息引导 ,组织协调的有益尝试 ;是改革开放的成果 ,是农机部门组织开展社会化服务的一个创举。就牙克石市联合收割机跨区作业谈些看法和建议。1　自然条件状况牙克石市位于呼伦贝尔盟中部 ,大兴安岭北段主脉西侧 ,由于海拔高度…     

3月龄鸡发生盲肠球虫病的诊治

某个体养鸡户从孵化站购进蛋鸡雏1000只，饲养到3月龄时，鸡群中有一部分出现一种以出血性肠炎为主要特征，而且发病较急，病程短，死亡快，死亡率高的疾病，经当地兽医技术人员诊疗，怀疑饲料及药物中毒，后经我站剖检及病原学检验，确诊为盲肠球虫病，现报告如下：     

凯特杏日光温室生物学特性与早期丰产栽培

<正>凯特杏是美国1978年选育的优良品种,品质好,白花结实,丰产性强。1991年引入我国,近年广泛应用于设施栽培,但我国杏树设施栽培生产起步较晚,对设施栽培条件下杏树生长结果特性尚无系统观察试验,设施栽培技术很不成熟,各地生产多照搬杏树露地栽培或其他     

耕牛红薯黑斑病中毒的治疗体会

近年来，我乡耕牛红薯黑斑病中毒发病较多，给农户造成较大损失。用中药白矾散加减和排毒、解毒、补氧、维持酸碱平衡、消炎等的西药结合治疗，取得了较好的疗效。共治疗11例，治愈10例，死亡1例，综合治愈率87％，其中治疗发病黄牛9例，全部治愈；治疗发病水牛2例，治愈1例，死亡1例。现总结如下。