番茄斑萎病毒侵染的西花蓟马酵母双杂交cDNA文库的构建和分析

【目的】探明番茄斑萎病毒(Tomatospottedwilttospovirus, TSWV)和介体西花蓟马(Frankliniella occidentalis)之间的分子互作关系,探索介体因子如何参与病毒侵染过程,以期为解析西花蓟马蛋白调控介体传毒机理奠定基础。【方法】通过若虫期饲毒获得高带毒西花蓟马群体,借助SMART技术构建TSWV侵染的西花蓟马酵母双杂交三框cDNA文库。【结果】3种读码框初级cDNA文库的库容量分别为3.0×10⁶、2.0×10⁶和2.0×10⁶cfu,文库实际扩增基数大于1.5×10⁶ cfu(3种读码框均大于5×10⁵)。扩增文库平均插入片段主要分布在0.5～3.0kb。对文库随机挑选16个克隆,测序后与GenBank数据库比对,结果显示各插入片段具有同源序列。【结论】构建的cDNA文库具有较高的库容量和重组率,可用于后续筛选西花蓟马与TSWV互作的蛋白。