适宜冷冻干燥保护剂提高植物乳杆菌LIP-1微胶囊性能

为了探讨添加冷冻干燥保护剂对Lactobacillus.plantarum（L.plantarum）LIP-1微胶囊性能的影响,该试验以植物乳杆菌（L.plantarum） LIP-1微胶囊的包埋率和冻干存活率为指标,通过单因素及正交试验,筛选出最佳冷冻干燥保护剂,在此基础上将其添加到微胶囊中,观察对L.plantarum LIP-1微胶囊形态、释放性等性能的影响。试验结果表明冷冻干燥保护剂的最佳配方为质量分数分别为甘油2%、麦芽糖1%、L-半胱氨酸2%、乳糖2%,此时微胶囊的包埋率为67.60%,冻干存活率为83.80%;与未添加保护剂的空白对照组相比,添加适宜保护剂的微胶囊在表观形态、肠液释放性、耐胃酸性及在不同温度（4、20、37℃）下的耐贮藏性能均显著提高（P<0.05）。添加适宜保护剂的微胶囊表面更加光滑致密,粒径更小,约100 μm（空白对照组约为150～200 μm）;在模拟肠液中,添加适宜保护剂的微胶囊完全释放仅需60 min,而空白对照组需要90 min才能释放完全;在耐胃酸性上,添加适宜保护剂的LIP-1微胶囊在120min后,活菌数才开始显著下降（P<0.05）,150 min后,活菌数下降约30%;空白对照组在90 min后活菌数开始显著下降（P<0.05）,150 min后,活菌数下降约44%;在4、20、37℃贮藏28 d后,加保护剂组的活菌数分别下降0.76、1.33、1.88 lg(cfu/g),而空白对照组的活菌数分别下降0.96、 1.50、2.40 lg(cfu/g)。试验结果表明添加适宜的冷冻干燥保护剂可以提高L.plantarum LIP-1微胶囊的性能,为工业化生产中提高益生菌微胶囊的性能提供一定的理论和技术指导。     

植物乳杆菌lai基因同源重组敲除载体的构建与鉴定

植物乳杆菌中lai基因编码亚油酸异构酶可催化亚油酸转化生成共轭亚油酸,为了进一步研究lai基因的功能,利用同源重组基因敲除技术,成功构建用于敲除植物乳杆菌lai基因的同源重组敲除载体。这不仅为乳杆菌基因缺失工程菌的构建提供一个快速有效的手段,也为乳杆菌基因功能研究奠定基础。     

嗜酸乳杆菌的亚油酸异构酶基因克隆及其pMG36e表达载体的构建

以嗜酸乳杆菌基因组为模板,对亚油酸异构酶基因进行PCR,PCR产物克隆到pMD-19T质粒中,经菌落PCR、酶切分析和DNA测序鉴定克隆成功后,亚克隆入乳酸菌表达质粒pMG36e,构建乳酸菌表达载体pMG36e-LAI并转化到大肠杆菌DH5α中,经菌落PCR和酶切分析初步证明表达载体pMG36e-LAI构建成功。该研究为利用工程菌工业化生产高产量、高活性亚油酸异构酶制剂来生产CLA奠定基础。     

益生菌降胆固醇作用的研究现状

本文论述了益生菌对血清胆固醇的作用,并对其可能的作用机制进行了探讨,同时对益生菌降血清胆固醇作用存在的一些争论进行了说明,这将有助于对益生菌的开发和利用.     

马奶酒中产抑菌物质乳杆菌的筛选及鉴定

从内蒙古传统乳制品酸马奶酒中分离出乳酸杆菌99株,通过双层琼脂平板扩散法筛选出具有明显抑菌作用的菌株。在排除有机酸、H2O2等的干扰后,其中5株乳酸杆菌的发酵上清液对受试的指示菌表现出明显抑制作用。依据形态特征和生理生化特征,初步鉴定MKB6和MKB57为瑞士乳杆菌(L.helueticus),MKB38鉴定为嗜酸乳杆菌(L.acidlophilus),MKB41格氏乳杆菌(L.gasseri),MKB49为旧金山乳杆菌(L.sanfrancisco)。     

一种快速定性和定量检测发酵乳中L.rhamnosus的方法

通过比对鼠李糖乳杆菌（L.rhamnosus）与其他乳酸菌的16SrRNA基因序列的差异,设计出L.rhamnosus的种属特异性引物,应用此引物进行种属特异性PCR和实时荧光定量PCR反应,通过琼脂糖凝胶电泳图谱和实时荧光定量PCR图谱分析,建立快速检测发酵乳中益生菌鼠李糖乳杆菌的定性和定量测定方法。     

高效液相色谱法测定传统发酵乳维生素C含量

建立更简便、快速、准确、灵敏的测定发酵乳维生素C含量的方法,并对青海省传统发酵乳(酸牦牛奶、酸山羊奶和酸马奶)Vc含量进行测定.发酵乳样品经5%偏磷酸溶液提取,旋涡混匀0.5 min,离心10min (8000 r/min,4℃)后,用高效液相色谱(HPLC)系统对Vc进行定性定量分析.流动相为0.015 mol/LHAc-NaAc缓冲液(pH 3.5)/甲醇(95/5,V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为254 nm,柱温30℃.在上述色谱条件下,发酵乳中Vc能得到良好分离最低检测限0.040 mg/L,回收率95.07%-98.41%,线性相关系数r＞0.9996.建立了高速、高效、高灵敏度的测定发酵乳Vc含量的HPLC法.并对青海省40份传统发酵乳中的Vc含量测定发现,同类样品中的Vc含量差别较大.     

干酪乳杆菌群和植物乳杆菌群的分子鉴定技术和分类方法的研究进展

乳杆菌属是乳酸菌类群中最大的一个属,在乳酸杆菌的研究和应用中,分类鉴定是其中的一个重要领域。由于乳杆菌属内许多种间的表型特征难以区别,利用生理生化实验方法往往无法进行准确鉴定。近几年,随着分子生物学的飞速发展,从分子和基因水平来认识乳酸菌的遗传结构和分类已成为可能,而采用常规的16SrDNA序列同源性分析不能将相近的植物乳杆菌群和干酪乳杆菌群分别鉴定到种及亚种的水平,目前许多新的分子鉴定技术和分类方法被用来进行相近乳酸菌的分类和鉴定。本文结合自己的试验归纳出如蛋白酶编码基因序列分析、扩增片段长度多态性分析、种间特异性PCR等九种用于区分和鉴定植物乳杆菌群和干酪乳杆菌群的分子技术和方法,对乳酸菌的多相分类学研究和工业化生产具有的重要意义。     

产CLA植物乳杆菌P8的离子束诱变与筛选

本实验以植物乳杆菌P8为出发菌株,采用N+离子注入的方法进行诱变处理,注入能量为50keV,注入剂量为30、50、70、901、10、1301、50、1701、90×2.6×1013N+/cm2。结果显示,菌体的存活率随离子注入剂量的增加呈"马鞍型"曲线,"鞍脊"出现在70×2.6×1013N+/cm2～110×2.6×1013N+/cm2之间,此时菌体的存活率在21%～50%之间。综合考虑存活率、总突变率和突变幅度等因素,推荐90×2.6×1013N+/cm2作为离子注入植物乳杆菌P8的适宜诱变剂量。此菌株经N+离子束诱变,得到产共轭亚油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)正突变菌株共36株,负突变菌株共66株,其中最高产CLA正突变菌株CLA浓度为0.2751mg/ml,转化率为27.51%。最低产CLA负突变株CLA浓度为0.0330mg/ml,转化率为3.30%。菌株的遗传稳定性正在进一步鉴定,若可以稳定遗传,将为研究植物乳杆菌P8产CLA的分子机理和生产出营养价值更高的保健食品奠定基础。     

植物乳杆菌P8微囊化的初步研究

试验以海藻酸钠、海藻酸钠/β-环糊精、海藻酸钠/阿拉伯胶为壁材;脱脂奶粉、脱脂奶粉/麦芽糖、脱脂奶粉/乳糖为保护剂,采用乳化法和锐孔-凝固浴法制备植物乳杆菌P8微胶囊。结果表明:制备植物乳杆菌P8微胶囊的最佳工艺条件为海藻酸钠/β-环糊精浓度为2%、脱脂奶粉/麦芽糖浓度为4%、CaCl2浓度为3%,活菌率达到2.27×1011CFU/g。