北五味子愈伤组织诱导研究

以北五味子的嫩茎段、叶片和叶柄为外植体,以MS和N6附加不同激素配比的培养基为基质,探讨诱导北五味子愈伤组织较合适的外植体及培养基.结果表明,北五味子的嫩茎段是愈伤组织诱导的最佳外植体,培养基为N6 6-BA 2.0 mg\L NAA 1.0 mg\L时为诱导愈伤组织的最佳浓度,诱导率达95.1%;在MS和N6基本培养基中分别附加不同浓度、种类的激素时,各外植体在N6培养基上的愈伤组织诱导效果均好于MS培养基.     

北五味子RAPD-PCR反应条件优化

以采自吉林省汪清地区野生北五味子叶片为材料,提取其基因组DNA,并以此为模板进行北五味子RAPD—PCR反应条件的优化．结果表明,PCR反应混合液为：25μLPCR反应体系中加入20ng模板DNA,200μmol／LdNTPs,0．3μmol／L引物,2．0mmol／LMg^2＋,1UTaqDNA聚合酶,2．5μL 10×Buffer;PCR反应程序为：94℃预变性5min后,在94℃变性1rain,40℃退火1min,72℃延伸2min,共40个循环后,在72℃下最后延伸5min时,在不同引物中均扩增出清晰而稳定的DNA电泳谱带．     

长白山区北五味子种质资源的遗传多样性分析

在长白山区选择具有代表性的56个野生北五味子自然群体,采用RAPD方法对其进行不同群体间遗传多样性分析。结果表明,在20个随机引物中共扩增出125条带(其中62个为多态性条带),平均每个引物扩增出6.25条带,多态率为49.6%;根据RAPD结果对其进行聚类分析的结果,群体间的遗传距离为0～0.56,显示出丰富的遗传变异。了解长白山区北五味子种质资源的遗传多样性将在保护和利用好种质资源、培育新品种等诸方面起到积极的作用。     

人参基因组DNA的提取及RAPD—PCR反应条件的优化

探讨了人参基因组DNA提取方法及RAPD—PCR反应条件的优化．结果表明,用改良的CTAB方法提取的DNA均达到了RAPD—PCR分析的要求;优化的RAPD—PCR反应条件为：在25μLRAPD—PCR反应体系中,模板DNA20ng,dNTP200μmol／L,MgCl2 1．5mmol／L,10×Buffer2．5μL,引物浓度0．4pmol／L,TaqDNA聚合酶1．0U,其余以ddH20定容至25μL．PCR反应程序为：94℃预变性5min;94℃45S,40℃退火1min,72℃1min,共40个循环;最后在72℃延伸5min．