不同蛋白水平对西农萨能羊泌乳性能的影响

本试验旨在探求西农萨能羊饲料中最合适的蛋白水平,以充分发挥奶山羊的泌乳性能、提高山羊的奶品质。试验采用单因素试验设计,选择处于泌乳盛期体重、胎次、泌乳量接近的健康西农萨能羊,随机分成3组,每组11只。固定能量水平为12.51 MJ/kgDM,蛋白水平分别为10%、14%和18%。试验期共100 d,预试期10 d,正试期90 d。结果表明:随着试验的进行,各组产奶量呈下降趋势,10%蛋白水平组下降幅度最大,14%蛋白组次之,18%蛋白组下降幅度最小;各试验组乳成分分析表明,18%蛋白组中乳脂、乳糖和全脂固形物降低幅度最明显,10%蛋白组降低幅度次之,14%蛋白组降低幅度最小。本试验中同等能量水平,不同蛋白水平对奶山羊产奶量和乳成分影响差异不显著(P>0.05)。     

miR-200a对奶山羊乳腺上皮细胞乳脂合成相关基因mRNA表达的影响

旨在构建pAd-pri-miR-200a重组腺病毒,使其在奶山羊乳腺上皮细胞中稳定表达miR-200a,研究miR-200a对乳脂合成相关基因mRNA表达的影响。以西农萨能羊DNA为模板扩增pri-miR-200a。采用Ad-Easy系统构建重组腺病毒载体pAd-pri-miR-200a,并于HEK 293细胞株中进行病毒的包装、扩繁。TCI50法测定病毒滴度。qRT-PCR检测miR-200a及16个乳脂合成相关基因mRNA表达水平。序列分析结果显示,pri-miR-200a包括pre-miR-200a86bp和侧翼序列共297bp。酶切结果证实pAd-pri-miR-200a构建成功。Ad-pri-miR-200a滴度达8×109 PFU.mL-1。实时定量结果表明,Ad-pri-miR-200a(MOI为200)感染奶山羊乳腺上皮细胞72h,miR-200a的表达量较对照高出2.4倍。同时miR-200a的过表达引起10个基因mRNA表达量下调,6个基因mRNA表达量上调。其中脂肪酸从头合成相关基因FASN、脂滴生成相关基因TIP47及脂肪酸运输相关基因FABP4降幅较大,分别下降了0.47、0.89及0.65倍。而TAG生成相关基因DGAT1和脂解相关基因HSL较对照分别增加了0.52和1.49倍。本研究获得的重组腺病毒Ad-pri-miR-200a能在山羊乳腺上皮细胞中稳定表达miR-200a,同时miR-200a过表达影响乳脂合成相关基因mRNA表达水平。     

不同能量蛋白水平日粮对妊娠后期西农萨能羊生产性能和血液生化指标的影响

本试验旨在研究不同能量蛋白水平日粮对妊娠后期西农萨能羊生产性能和血液生化指标的影响,以筛选出妊娠后期母羊最适的营养水平。试验采用2×2两因子完全随机区组试验设计,将60只处于妊娠期90 d、体重(60±2.4)kg的经产母羊随机分成4组,每组15个重复。日粮干物质蛋白水平分别设为14%、16%;能量水平分别为12.2 MJ/kg.DM和13.3 MJ/kg.DM。结果显示,试验母羊血浆总蛋白和尿素氮含量均与粗蛋白摄入量成正比,血浆白蛋白的含量则与之相反(P>0.05)。低蛋白高能量(14%、13.3 MJ/kg.DM)试验组的母羊具有较高产羔率(227%)、成活率(94.118%),该组母羊所产羔羊具有最大平均初生重(4.10±0.14)kg该试验组初乳具有较高乳总干物质(21.73%)、乳脂(7.71%)和乳蛋白含量(9.30%)(P>0.05),较低的乳糖含量(P<0.05)。试验表明,蛋白、能量水平分别为14%、13.3 MJ/kg.DM的日粮为妊娠后期西农萨能母羊最优的日粮组合。     

不同蛋白水平日粮对西农萨能羊公羔肥育性能的影响

本研究旨在探讨不同蛋白水平日粮对西农萨能羊公羔肥育性能的影响。选择21只健康、体重相近的6月龄西农萨能羊公羔,随机分为3组,分别饲喂蛋白水平为19.5%、16.0%、13.4%的日粮。试验为期50 d,测定试验羊的体重、体尺、血液生化指标、屠宰性能和羊肉品质。结果显示:高蛋白组试验羊体重、日增重、胸围、体斜长最大,料重比最小(P>0.05);血浆中总蛋白、白蛋白、球蛋白、总胆固醇含量高于中、低蛋白组(P>0.05);屠宰率、净肉重、肉骨比、眼肌面积具有最大值(P>0.05);羊肉失水率最低(P>0.05)、嫩度最好(P<0.05)。经综合评定,19.5%蛋白水平日粮更有利于西农萨能羊公羔短期育肥。     

草原红牛肌生成抑制素基因内含子1多态性及部分屠宰性状的相关性分析

以草原红牛为研究对象,采用PCR-SSCP方法检测肌生成抑制素(MSTN)基因内含子1基因的多态性.结果表明:在内含子1发现多态性位点,有AA、AB和BB 3种基因型;测序结果显示在1 452 bp处存在C→T的碱基突变;该位点的多态性对草原红牛的净内率有显著影响(P<0.05),BB型和AB型显著高于AA型(P<0.05),BB型和AB型之间差异不显著(P>0.05);其他屠宰性状在不同基因型间差异不显著(P>0.05).由此可以初步推断MSTN基因可能是影响草原红牛肉质性状的一个主效基因或是一个影响肉质性状的QTL连锁的基因.     

日粮中不同蛋白质和L-赖氨酸水平对西农萨能羊泌乳性能和血浆生化指标的影响

本试验采用2×2因子完全随机试验研究日粮中蛋白质和L-赖氨酸水平对西农萨能羊泌乳性能和血浆生化指标的影响,以筛选泌乳母羊最佳日粮配方。将48只泌乳量和体重接近、处于泌乳盛期(50 d左右)的健康西农萨能羊随机分成4组,每组12只。日粮蛋白质水平分别为16.0%、18.0%,L-赖氨酸水平分别为0、0.67%。预试期7 d,正试期90 d。结果表明:不同蛋白质和L-赖氨酸水平对产奶量和乳成分无显著影响(P>0.05),18%蛋白组产奶量与16%蛋白组相比有下降趋势;血浆生化指标分析表明,蛋白水平为16%、L-赖氨酸为0.67%试验组(第2组)的血浆总蛋白高于其他试验组,且在60 d时差异显著(P<0.05),此试验组的血浆尿素氮浓度低于其他试验组,但差异不显著(P>0.05)。由此可见,蛋白水平为16%、L-赖氨酸为0.67%的日粮更有利于提高泌乳期奶山羊的生产性能。     

调控山羊乳腺脂肪酸代谢miRNAs筛选及相关pri-miRNAs克隆验证

microRNA(miRNA)是调控脂类代谢的重要分子。本研究采用数据库预测和自由能分析法,筛选与山羊(Capra hirus)乳腺脂肪酸代谢相关的miRNA,并对预测得到的miRNA进行克隆验证。预测结果表明,通过MicroCosm、TargertScan和PicTar3个在线数据库预测与山羊脂肪酸代谢相关的30个基因相对应的miRNA,预测得到50条miRNA,其中3个数据库预测一致的miRNA为13条,2个数据库预测一致的为37条。结果显示,脂肪酸合酶基因(FASN)对应4个不同的miRNA,嗜乳脂蛋白基因(BTN1A1)对应2个,而磷酸甘油酰基转移酶6基因(AGPAT6)没有预测到miRNA靶位点;FASN与BTN1A1的3’UTR上miR-103的结合位点分别有3个和2个。通过MFOLD软件对预测所得的50条miRNA靶位点两侧序列的自由能(ΔG>-20kcal/mol)进行分析,9种miRNA与调控脂肪酸代谢基因相关度较高,分别为miR-103/BTN1A1、miR-15/FASN、miR-23/LPL(脂蛋白酯酶)、miR-27/PPARγ(过氧化物酶体增殖物激活受体)、miR-29/GPR41(短链脂肪酸受体)、miR-146/BTN1A1、miR-195/FASN、miR-200/SCD(硬脂酰辅酶A去饱和酶)和miR-497/GPR41,其中miR-103/27/195分别位于BTN1A1、PPARγ和FASN的靶位点与已知物种间同源性较高,增加了这些miRNA/mRNA结合的可能性。此外,靶位点单侧和双侧ΔG小于阈值的miRNA/mRNA分别为14对和9对,其中miR-27/mRNA预测的靶基因为4个,依次为FASN、ACOX1(乙酰辅酶氧化酶基因1)、LPL和PPARγ,miR-103和miR-15的靶基因同为FASN、BTN1A1和ACOX1。以西农萨能奶山羊(Capra hirus)基因组DNA为模板,可扩增出与5条miRNA(miR-103-1/23a/27a/146b/200a)分别相对应的初级miRNA(pri-miRNA);通过序列分析和二级结构分析表明,5条pri-miRNA均包含完整的pre-miRNA序列,同时具有典型的茎环结构,能够产生相应的miRNA。与牛的同源性分析表明,除pre-miR-27a同源性为98%外(山羊pre-miR-27a3’端第11个碱基为G,而牛为A),其余4条pre-miRNA同源性均为100%。因此,本研究筛选的9种miRNA可能调控山羊乳腺脂肪酸代谢,克隆的5条pri-miRNA为其功能研究提供基础。     

羊分子育种技术

<正>分子育种技术是以分子生物学为基础,遗传学为依据,在DNA分子水平上对家畜品种进行的改良,包括转基因技术、克隆技术、胚胎生物技术和分子遗传标记。分子育种技术加快了动物育种速度,改良了动物品种。1分子育种技术的应用1.1在产毛(绒)性状上的应用羊产毛(绒)性状评定指标主要包括剪毛量、毛(绒)的品质、净毛率等。IGF-1是胰岛素样生长因子,能够促进羊毛囊形成和发育,增加纤维直径,研究者通过转基因技术获得IGF-1的转基因绵羊和转基因绒山羊,IGF-1转基因绵羊F1代的净毛量比非转基因绵羊高6.2%,IGF-1转基因绒山羊能够显