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【目的】真菌毒素可导致严重的食品安全问题。本试验旨在制备可用于检测伏马菌素B1的特异性单克隆抗体。【方法】制备伏马菌素B1人工抗原,杂交瘤细胞法筛选杂交瘤细胞株制备腹水型单克隆抗体,并对其特性进行鉴定。【结果】筛选得到杂交瘤细胞株F3,分泌的单克隆抗体亚类为IgG1,轻链类型为κ链;10%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单抗蛋白重链分子质量约为50 kD,轻链分子质量约为25 kD;间接酶联免疫吸附法测定杂交瘤细胞F3细胞培养上清和腹水效价分别为1:3 200和1:51 200;亲和力常数为1.60×10-8 mol•L-1;IC50值可达3.589 ng•mL-1;对其它真菌毒素不存在交叉反应;免疫转印法鉴定抗体具有高特异性。【结论】本试验制备FB1单克隆抗体具有较好亲和力和高特异性,具有良好的应用价值。 相似文献
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应用硝化细菌选择性培养基,从南京的土壤和水体中筛选到6株硝化细菌,包括3株亚硝化菌和3株硝化菌,对其生理生化特性、温度敏感性、耐盐性、抗生素抗性、及硝化能力等生物学特性进行了测定。结果表明,6株细菌均为G-,菌体杆状或球状。生长缓慢,培养120 h以后才进入对数生长期,5 d左右形成菌落。最适生长温度为25~30℃。耐受偏碱环境。不耐盐,6株菌都能耐受的盐浓度范围是0.05%~0.3%。通气量对该菌的生长没有太大影响。6株菌株对不同的抗生素具有抗性。其中,菌株J2的抗药谱最窄,只抗卡那霉素。6株菌只能在以碳酸钠或者碳酸氢钠为唯一碳源、以硫酸铵或者亚硝酸盐为唯一氮源的培养基上生长良好。菌株硝化能力不同,其中菌株J2硝化能力较强,在基础培养基中200 h,该菌转化NO2-42%左右,可以作为降解鱼塘中和饲料中亚硝酸盐的硝化菌候选株。 相似文献
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玉米赤霉烯酮的高效液相色谱-荧光法检测技术研究 总被引:1,自引:0,他引:1
建立了高效液相色谱-荧光法(HPLC-FLD)定量检测饲料中镰刀菌毒素玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA,又称F-2毒素)的方法.采用层析柱和免疫亲和柱结合净化提取液的方法,确定乙腈-水(体积比为9∶1)为最佳提取溶液,荧光检测的激发波长(λx)和发射波长(λm)分别为274 nm和440nm.色谱检测条件:流动相为甲醇-水-乙腈(体积比为10∶46∶44);检测波长为激发波长274 nm,发射波长440 nm;柱温25℃,流速0.6 mL·min-1.HPLC-FLD对F-2毒素进行定量分析,线性回归方程为y=1 416 362.246x+2 771.577(R2=1.0000),加标回收率高达88.74%,检测限为5.7 μg·L-1,相对标准偏差低于4.01%;F-2毒素在0.025~0.8 μ,g·mL-1条件下,线性关系良好.结论:HPLC-FLD法精确、灵敏度高,可作为定量检测F-2毒素的有效手段. 相似文献
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为分析当地非典型犬瘟热病毒(CDV)核衣壳蛋白(N)基因的序列特征及其表达产物的抗原性,根据已发表CDV的N基因序列设计引物,用RT-PCR方法从引起非典型症状的CDV细胞培养物中扩增N基因,进行克隆和序列分析,结果表明:该非典型CDV的N基因与已发表的12个CDV强毒株的核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别在96.6%~99.2%和97.9%~99.4%之间,与已发表的4个CDV疫苗弱毒株的同源性分别在93.2%~93.6%和96.4%~97.5%之间;在N基因系统发育进化树上,非典型CDV与12个强毒株处在同一亚群,而且与9个中国分离毒株的亲缘关系近于3个国外毒株。N基因在大肠杆菌中表达的重组N蛋白的分子量为62 ku,主要以包涵体的形式存在;用western blot分析,重组N蛋白可与CDV阳性血清发生特异性反应;以纯化的重组N蛋白为抗原建立的CDV抗体间接ELISA检测方法具有良好的特异性。 相似文献
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鲢鱼鳞片胶原蛋白的提取 总被引:1,自引:0,他引:1
利用酸和酶提取法,从淡水鲢鱼鳞片中提取酸溶性和酶溶性胶原蛋白.经紫外光谱分析显示,所提取的胶原蛋白与I型胶原蛋白标准品接近.氨基酸组成分析表明,ASC和PSC是典型的Ⅰ型胶原蛋白. 相似文献