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为了克隆和表达编码扩展莫尼茨绦虫无精症缺失(DAZ)基因,试验根据GenBank中扩展莫尼茨绦虫DAZ基因cDNA序列(登录号为GH291478)设计1对特异性引物,以扩展莫尼茨绦虫组织总RNA为模板,RT-PCR扩增DAZ基因,并克隆到pMD19-T载体中进行序列测定,构建重组质粒pET28a-DAZ,转化BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞,以异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达;利用非变性聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)分析表达产物,通过螯合琼脂糖凝胶FF亲和层析柱对重组蛋白进行纯化。结果表明:重组DAZ基因在大肠杆菌中高效表达,表达的融合蛋白分子量约为14 ku。 相似文献
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采用生化反应、溶血试验、致病力试验和PCR方法对分离的新疆5株绵羊致病株李氏杆菌90SB1、90SB2、90SB5、90SS1和125SL进行了种的鉴别测定,并用RAPD技术对这5株李氏杆菌及标准株李氏杆菌进行了初步分型。结果表明,5株绵羊致病株(野毒株)在生化反应、培养特性、溶血性、致病性及溶血素基因特异性等方面表现高度的一致性,属于同一种LM。RAPD实验表明这5株LM指纹图谱相同,属于同一个型。而且其致病性LM与标准LM对照株(从食品中分离到)指纹图谱差异显著,属于不同型。 相似文献
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新疆绵羊致病株李斯特杆菌分离与鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究采用生化反应,溶血试验,致病力试验,PCR方法对分离的新疆5株绵羊致病株李斯特杆菌90SB1,90SB2,90SB5,90SS1,125SL进行了种型的鉴别测定,并用RAPD技术对这5株李斯特杆菌及标准株李斯特杆菌进行分型。试验结果,五株绵羊致病株(野毒株),在生化反应,培养特性,溶血性,致病性及溶血素基因特异性等方面表现高度的一致性,属于同一种LM。RAPD实验表明此5株LM指纹图谱相同,属于同一个型。此5株致病性LM与标准LM对照株(从食品中分离到)指纹图谱差异显著,属于不同型。 相似文献
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致绵羊脑炎单核细胞增多症李氏杆菌的分离与鉴定 总被引:4,自引:0,他引:4
新疆生产建设兵团某些团的羊群发生以神经症状为主的疾病,采集病死绵羊的脑和肝、脾进行病原菌分离和鉴定。共分离出90SB1、90SB2、90SB5、90SS1和125SL15株单核细胞增多症李氏杆菌。动物接种试验表明,90SB2具有较强的致病性,对家兔耳胸脉注射和结膜囊内接种、小白鼠腹腔注射90SB2均可引起发病。 相似文献