猪CD4分子的全长cDNA克隆与序列分析

CD4分子为动物辅助性T细胞（TH）和部分胸腺细胞的共受体与信号传导分子，参与TCR介导的TH细胞活化和胸腺细胞分化过程。本研究应用RT-PCR和RACE技术从猪胸腺细胞总RNA中扩增克隆了猪CD4全长cDNA序列，并进行了序列特性分析。序列分析结果表明，在猪胸腺细胞和外周血淋巴细胞中存在2种方式剪接的CD4 mRNA转录本，其中一种mRNA转录本缺失编码40个氨基酸残基的120nt序列，提示该转录本可能编码猪分泌型CD4分子；猪CD4全长cDNA序列为2715nt。其中5′非编码区159nt，3′非编码区1183nt，1374nt的开放阅读框编码457个氨基酸的猪CD4前体蛋白（含4个糖基化住点）；猪CD4分子的7个Cys残基（Cys^43、Cys^122、Cys^327、Cys^418、Cys^421、Cys^444和Cys^446）和2个Ser残基（Ser^432和Ser^439）在动物种间保守；在猪CD4分子胞浆区．存在高度保守的Src家族蛋白酪氨酸激酶p56^kk。识别位点KKTCQC和内化相关双亮氨酸基序。推导氨基酸序列分析结果显示，猪与人、免、猫、狗和鼠CD4蛋白的氨基酸同源性分别为56．0％，54．5％。56．9％，56．5％和44．9％。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型基因重组质粒实时荧光定量PCR标准曲线的构建

根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF7和猪圆环病毒2型(PCV2)ORF1的核苷酸序列设计特异性引物,经RT-PCR/PCR扩增,分别扩增出大小为308 bp和417 bp的部分基因片段。用T4连接酶将目的片段与pGEM-Teasy载体系统连接,并转化到大肠杆菌DH-5α株感受态细胞。提取的质粒经PCR、酶切和测序鉴定,证实为PRRSV和PCV2的阳性重组质粒。将重组标准质粒10倍系列稀释后作为模板,通过实时荧光定量PCR方法(Real-time PCR),建立了PRRSV、PCV2的标准曲线及其直线回归方程,并确定其最佳读板温度。该方法具有线性关系好、特异性强、敏感性高、重复性好等特点,为分析PRRSV和PCV2共感染猪体内病毒的绝对含量提供了必要的技术平台。     

海南橡胶园土壤持续利用措施的研究

This research was designed to help solve existing sustainable use problems such as soil nutrient loss and soil fertility decline in natural rubber plantations located in the hilly land of the south central mountainous area of Hainan Island,China. Two different land management practices, sustainable and traditional, were adopted in a four-year experiment.Contour terraced fields and deep ditches for green manure were built in a sustainable way with a balanced, need-based application of complex fertilizer. Results of the four-year experiment showed that these sustainable measures compared to traditional measures improved available P and available K; had a 47.8% less soil erosion (an average of 3663 t km^-2 year^-1) and a 15.9% lower runoff coefficient of 0.53; increased the dry rubber yield by 42.4%; and improved the economic benefit by 2.4 times. The sustainable land management scheme not only improved land utilisation efficiency, hut also helped maintain soil fertility while increasing production in rubber plantations. It thereby offered a reasonable and sustainable use for land resources in the tropical mountainous areas.     

早实新品系核桃采穗圃快速营建技术研究

对云南省林业科学院培育出的早实核桃新品系进行采穗圃快速营建技术的研究.通过种植密度、施肥、修剪、浇水4因素3水平的正交试验得出,快速营建早实新品系核桃采穗圃的方法为选择具有深厚、疏松、湿润土壤的园地建圃,每666.6m2种植嫁接苗330株,第2年开始,每年每株施厩肥10kg、复合肥0.2kg,旱季浇水8次以上;当新梢长5～8cm及时摘去生长点以促进当年2次分枝.此法,建圃第2年便可开始采穗,到第4年每666.6m2所采接穗累计可供62000株核桃嫁接用,成本0.15元/个,4年后每年产接穗可供36000株以上核桃嫁接用,成本0.06元/个以下,采穗圃接穗的嫁接成活率达81.3%.该技术亦适用于其他核桃良种采穗圃建设.     

猬实的引种栽培

猬实作为我国特有的园林观赏植物,经过几年引种栽培,能适应宝鸡乃至关中地区气候特点.可通过播种、扦插、分株进行繁殖.     

宝鸡市区2008年早春园林植物冻害调查

通过对宝鸡市区园林植物冻害调查发现,不同树种受害等级不同;同一树种在不同的栽培环境,不同生长状况;不同部位以及不同的管理措施条件下,受冻等级不同.对受冻等级不同的植物,采取不同的补救措施.     

六株猪圆环病毒2型国内分离株的全基因组序列测定与分析

利用PK15细胞从临床发病猪和死亡猪淋巴结中分离到6株猪圆环病毒2型(PCV2)，对其全基因组序列进行了测定和分析。结果表明，除深圳分离株(SZ)的基因组全长为1768nt外，其余5株均为1767nt；6个分离株之间全序列核苷酸同源性为98．08％；与欧、美毒株之间同源性高，介于94．4％～99．7％。     

猪圆环病毒2型BF株ORF2基因在大肠杆菌中的表达

采用PCR从构建的猪圆环病毒2型／(PCV2)ORF2重组质粒(pGEM-T-ORF2）中扩增出大小为593bp的ORb2基因，克隆到表达载体pET-32a，经异丙基硫代半乳糖苷诱导，成功表达了ORF2基因编码的结构蛋白。表达的重组蛋白为融合蛋白，分子量40kD，表达量20％左右。经Western blot检测，重组蛋白可被PCV2阳性血清识别。     

基于归一化植被指数获取环境因子权重的土壤管理分区方法

在基于加权环境变量进行土壤管理分区时,常利用作物产量与环境变量之间的关系来获取环境变量的影响权重。然而,当作物产量难以获取或作物产量与环境变量之间不能建立关系模型时,这种基于作物产量获取环境变量影响权重的方法将不再适用。针对此问题,该研究基于归一化植被指数（normalized difference vegetation index,NDVI）可以反映土壤条件而土壤条件又受环境变量影响,提出一种利用NDVI获取环境变量影响权重的方法,并将其应用于橡胶园土壤管理分区。结果表明,利用该方法可以筛选出与NDVI关系紧密的15个关键环境变量,并且可以获取这些环境变量的权重,其中,前5个环境变量（坡向正弦和余弦,地形位置指数,地形湿度指数,剖面曲率）的权重几乎占到15个环境变量权重之和的一半。利用加权后的环境变量可将研究区橡胶园划分为6个分区。这些分区可以很好地区分不同土壤养分（土壤有机质、全氮、有效磷和速效钾）的丰缺水平。同时,不同分区间环境变量的差异也达到了显著水平（P<0.05）。可见,该研究提出的利用NDVI获取环境变量影响权重的方法是可靠的。研究可为土壤管理分区提供可靠的思路。     

不同施肥措施对天然生胶性能的影响

施肥是影响天然橡胶性能的重要因素之一,研究不同施肥措施调控天然生胶性能对于指导生产具有重要意义。选用成龄橡胶树,设置不施肥对照以及氮磷钾肥、有机肥、氮磷钾肥+有机肥、氮磷钾肥+有机肥+镁锌硼肥4种不同的施肥措施,通过探讨不同施肥措施对天然橡胶生胶特性的影响,为天然橡胶生产提供参考依据。研究结果表明,4种施肥措施均能提升生胶中的氮含量(12%)、塑性保持率(7%)和可塑性;氮磷钾肥在施肥初期降低了门尼黏度(17%),提高了生胶的可塑性;有机肥在施肥初期的门尼黏度高于对照26%,即提高了生胶分子量;氮磷钾肥+有机肥利于维持氮含量和杂质含量的稳定性;氮磷钾肥+有机肥+镁锌硼肥有利于保持生胶氮含量、挥发分含量、灰分含量以及塑性初值的一致性。综上所述,4种施肥措施中有机肥、氮磷钾肥+有机肥较为优秀,其次为氮磷钾肥,而氮磷钾肥+有机肥+镁锌硼肥则较差。